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文档简介
第十章 核酸的生物合成一、名词解释97、核酸限制性内切酶答案:(restriction endonuclease)是一类具有极高专一性,在识别位点内或附近,识别并切割外源双链 DNA,形成粘性末端或平端的核酸内切酶。98、粘性末端答案:(sticky end)由限制性内切酶切割后,在双链DNA切口处产生交错互补的单链末端。99、中心法则答案:(central dogma)生物体遗传信息流动途径。最初由 Crick(1958)提出,经后人的不断补充,修改。即:DNA本身复制;以DNA为模板转录成RNA;RNA在逆转录酶的作用下,合成DNA;以RNA为模板翻译成蛋白质.100、半保留复制答案:简单复制,(semiconservative replication)亲代双链DNA以每条链为模板,按碱基配对原则各合成一条互补链,这样一条亲代DNA双螺旋,形成两条完全相同的子代DNA螺旋,子代DNA分子中都有一条合成的“新”链和一条来自亲代的“旧”链,称为半保留复制。101、DNA聚合酶答案:(DNA polymerase)指以脱氧核苷三磷酸为底物,按5-3方向合成DNA的一类酶,反应条件:4种脱氧核苷三磷酸,Mg+、模板、引物。DNA聚合酶是多功能酶,除具有聚合作用外,还具有其它功能,不同DNA聚合酶所具有的功能不同。102、解旋酶答案:(helicase)是一类通过水解ATP提供能量,使DNA双螺旋两条链分开的酶,每解开一对碱基,水解2分子ATP。103、拓扑异构酶答案:(topolisomerase)是一类引起DNA拓扑异构反应的酶,分为两类:类型I的酶能使DNA的一条链发生断裂和再连接,反应无需供给能量,类型II的酶能使DNA的两条链同时发生断裂和再连接,当它引入超螺旋时,需要由ATP供给能量。104、单链DNA结合蛋白答案:(single-strand binding protein SSB)是一类特异性和单链区DNA结合的蛋白质。它的功能在于稳定 DNA解开的单链,阻止复性和保护单链部分不被核酸酶降解。105、DNA连接酶答案:(DNA ligase)是专门催化双链DNA中缺口共价连接的酶,不能催化两条游离的单链DNA链间形成磷酸二酯键。反应需要能量。106、引物合成酶及引物体答案:(primase primosome)以DNA为模板,以核糖核苷酸为底物,在DNA合成中,催化形成RNA引物的酶称为引物合成酶及引物体。大肠杆菌的引物酶单独 没有活性,只有与其它蛋白质结合在一起,形成一个复合体,即引物体才有生物活性。107、复制叉答案:(replication fork)复制中的 DNA分子,未复制的部分是亲代双螺旋,而复制好的部分是分开的,由两个子代双螺旋组成,复制正在进行的部分呈丫状叫做复制叉。108、前导链答案:(leading strand)在DNA 复制过程中,以亲代链(35)为模板时,子代链的合成(53)是连续的,这条能连续合成的链称前导链。109、冈崎片段答案:(Okazaki fragment)、后随链(lagging strand)在DNA复制过程中,以亲代链(5 3,)为模板时,子代链的合成不能以35 方向进行,而是按5 3 方向合成出许多小片段,因为是冈崎等人研究发现,因此称冈崎片段。由许多冈崎片段连接而成的子代链称为后随链。110、半不连续复制 答案:(Semidis continuous replication)在DNA 复制过程中,一条链的合成是连续的,另一条链的合成是不连续的,所以叫做半不连续复制。111、逆转录 答案:(reverse transcription)以RNA为模板合成DNA的过程。112、逆转录酶 答案:(reverse transcriptase)催化以RNA为模板合成DNA的逆转录过程的酶。Temin(1960)首次从劳氏肉瘤病毒中发现。逆转录酶具有多种酶活性:依赖RNA的DNA聚合酶活性;依赖DNA的DNA聚合酶活性,RNA水解酶活性,DNA成方向53。合成时需要引物与模板。113、修复答案: (repair)除去DNA上的损伤,恢复DNA 的正常结构和功能是生物机体的一种保护功能。114、光裂合酶修复答案:又称光复活,(photoreactivation)可见光将光裂合酶激活,它分解DNA上由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体,使它们恢复成两个单独的嘧啶碱。115、转录答案:(transcription)由依赖于DNA的RNA聚合酶催化,以DNA的一条链的一定区段为模板,按照碱基配对原则,合成一条与DNA链互补RNA链的过程。116、模板链(有义链)答案:又称负(-)链,转录过程中用作模板的这条DNA链,称模板链。117、非模板链答案:(编码链nontemplate strand)又称正(+)链、编码链(coding strand)、反义链,与模板链互补的那条DNA链,称非模板链。118、不对称转录 答案:(asymmetric transcription)因为RNA的转录只在DNA的任一条链上进行,所以把RNA的合成叫做不对称转录。119、启动子答案:(promoter)DNA链上能指示RNA转录起始的DNA序列称启动子。120、转录单位 答案:(transcription unit)RNA 的转录只在DNA的一个片段上进行,这段DNA序列叫转录单位。121、内含子 答案:(intron)真核生物基因中,不为蛋白质编码的,在mRNA加工过程中消失DNA序列,称内含子。122、外显子答案:(exon)真核生物基因中,在mRNA上出现并代表蛋白质的DNA序列,叫外显子。123、转录后加工答案:(post-transeriptional processing)细菌中很多RNA分子和几乎全部真核生物的RNA在合成后都需要不同程度的加工,才能形成成熟的RNA分子,这个过程叫转录后加工。124、核内不均RNA答案:(hnRNA)是真核生物细胞核内的mRNA前体分子,分子量较大,并且不均一,含有许多内含子。125、RNA复制答案:(RNA replication)某些病毒RNA即可以做为模板合成病毒蛋白质又可在RNA复制酶(RNA replicase)的催化下,以自身RNA为模板,合成互补的RNA新链,合成方向53,这一过程叫RNA复制。二、填空题137、MeselsonStahl的DNA半保留复制证实试验中,区别不同DNA用 方法。分离不同DNA用 方法。测定DNA含量用 方法。答案:同位素示踪;氯化铯密度梯度离心;紫外分光光度138、DNA聚合酶(E.coli)的生物功能有 、 和 作用。用蛋白水解酶作用DNA聚合酶,可将其分为大小两个片段,其中 片段叫Klenow,具有 作用和 作用,另一个片段具有 活性。答案:53合成酶、53外切酶、35外切酶;大;53聚合酶、35外切酶;53外切酶139、在E.coli中,使DNA链延长的主要聚合酶是 ,它由 种亚基组成。DNA聚合酶主要负责DNA的 作用。答案:DNA聚合酶III;十;修复140、真核生物DNA聚合酶有 、 、 、 、 。其中在DNA复制中起主要作用的是 和 。答案:DNA聚合酶、DNA聚合酶、DNA聚合酶、DNA聚合酶、DNA聚合酶;DNA聚合酶、DNA聚合酶141、解旋酶的作用是使 ,反应需要 提供能量,结合在后随链模板上的解旋酶,移动方向 ,结合在前导链的rep蛋白,移动方向 。答案:DNA双螺旋打开;ATP;53;35142、在DNA复制过程中,改变DNA螺旋程度的酶叫 。答案:拓扑异构酶143、SSB的中文名称 ,功能特点是使 。答案:单链DNA结合蛋白;单链保持伸长状态144、DNA连接酶只能催化双链DNA中的缺口形成3,5磷酸二酯键,不能催化两条 间形成3,5磷酸二酯键,真核生物DNA连接酶以 作为能源,大肠杆菌则以NAD+作为能源,DNA连接酶在DNA 、 、 中起作用。答案:游离的单链;ATP;复制、修复、重组145、DNA生物合成的起始,需要一段 作为引物,引物由 催化完成,该酶需与一些特殊 结合形成 复合物才有活性。答案:RNA;引物合成酶;蛋白质;引物体146、DNA生物合成的方向是 ,冈崎片段合成方向是 。答案:53;53147、由逆转录酶催化的核酸合成是以 为模板,以 为底物,产物是与 。答案:RNA;三磷酸脱氧核甘酸(dNTP);RNA互补的DNA链148、诱变剂大致分为 、 、 三种类型。答案:物理诱变剂、化学诱变剂、生物诱变剂149、RNA生物合成中,RNA聚合酶的活性需要 模板,原料是 、 、 、 。答案:DNA;ATP、GTP、UTP、CTP150、大肠杆菌RNA聚合酶为多亚基酶,亚基组成 ,称为 酶,其中 亚基组成称为核心酶,功能是 ;亚基的功能是 。答案:2;全;2;合成RNA链;保证RNA聚合酶对启动因子的特异识别151、用于RNA生物合成的DNA模板链称为 或 。答案:有义链、负链152、RNA聚合酶沿DNA模板 方向移动,RNA合成方向 。答案:35;53153、真核生物 RNA聚合酶共三种 , , 它们分别催化 , 、 和 的生物合成。答案:RNA聚合酶I;RNA聚合酶II;RNA聚合酶III;rRNA;mRNA;tRNA;5SrRNA154、某DNA双螺旋中,单链5ATCGCTCGA3为反义链,若转录mRNA,其中碱基排列顺序为5 3。答案:AUCGCUCGA155、能形成DNARNA杂交分子的生物合成过程有 、 ,形成的分子基础是 。答案:转录;逆转录;碱基互补配对156、DNA复制中, 链的合成是 的,合成的方向和复制叉移动方向相同; 的合成是 ,合成的方向和复制叉移动方向相反。答案:前导;连续;后随链;不连续的157、RNA聚合酶中能识别DNA模板上特定的起始信号序列的亚基是 ,该序列部位称 。答案:因子;启动子部位三、选择题158、DNA以半保留方式复制,如果一个具有放射性标记的双链DNA分子,在无放射性标记的环境中经过两轮复制,其产物分子的放射性情况如何( )。A. 其中一半没有放射性 B. 都有放射性 C. 半数分子的两条链都有放射性 D. 都不含放射性答案:A159、关于DNA指导下的RNA合成的下列论述除了哪一项都是正确的( )。A. 只有存在DNA时,RNA聚合酶才能催化磷酸二酯键的形成。B. 在合成过程中,RNA聚合酶需要一个引物。C. RNA链的延长方向是53。D. 在大多数情况下,只有一条DNA链作为模板。答案:B160、下列关于DNA和RNA聚合酶的论述哪一种是正确的( )。A. RNA聚合酶用核苷二磷酸而不是核苷三磷酸来合成多核苷酸链。B. RNA聚合酶需要引物,并在生长的多核苷酸链的5端加上核苷酸。C. DNA聚合酶能在核苷酸链的两端加上核苷酸。D. 所有DNA和RNA聚合酶只能在生长的多核甘酸链的3端加上核苷酸。答案:D161、修补胸腺嘧啶有数种方法,其中之一是用DNA连接酶,DNA聚合酶等催化进行,试问这些酶按下列哪种顺序发挥作用( )。A. DNA连接酶DNA聚合酶核酸内切酶B. DNA聚合酶核酸内切酶DNA连接酶C. 核酸内切酶DNA聚合酶DNA连接酶D. 核酸内切酶DNA连接酶DNA聚合酶答案:C162、DNA聚合酶在分类时属于六大酶类的哪一种( )。A. 合成酶类 B. 转移酶类 C. 裂解酶类 D. 氧化还原酶类答案:A163、催化真核生物mRNA生物合成的RNA聚合酶对鹅膏覃碱( )。A. 不敏感 B. 敏感 C. 高度敏感 D. 低度敏感答案:C164、DNA复制中RNA引物的主要作用是( )。A. 引导合成冈崎片段 B. 作为合成冈崎片段的模板 C. 为DNA合成原料dNTP提供附着点 D. 激活DNA聚合酶答案:A165、紫外线对DNA的损伤主要是( )。A. 引起碱基置换 B. 形成嘧啶二聚体 C. 导致碱基缺失 D. 发生碱基插入答案:B166、有关转录的错误描述是( )。A. 只有在DNA存在时,RNA聚合酶方可催化RNA B. 需要NTP做原料 C. RNA链的延伸方向是35 D. RNA的碱基需要与DNA互补答案:C167、有关逆转录作用的错误描述是( )。A. 以RNA为模板合成DNA B. 需要一个具有3OH末端的底物C. 以53方向合成 ,也能35方向合成 D. 以dNTP为底物答案:C168、体内参与甲基化反应的直接甲基供体是( )。A. Met B. S腺苷甲硫氨酸 C. 甲酰甲硫氨酸 D. MettRNA答案:B169、关于大肠杆菌DNA聚合酶的下列论述哪些是正确的( )。A. 它是一个金属酶 B. 它能从3羟基端逐步水解单股DNA链 C. 它在双螺旋区有53核酸酶活性 D. 它需要DNA模板上的游离5OH答案:A B C 170、试将下列DNA复制的有关步骤按正确的顺序排列( )。A. DNA指导的RNA聚合酶合成RNA引物 B. 解旋蛋白打开DNA双链C. DNA指导的DNA聚合酶合成的DNA互补链 D. DNA连接酶连接DNA片段E. 核酸内切酶切除RNA引物答案:B A C E D171、下列关于核不均RNA(hnRNA)的论述哪些是正确的( )。A. 它们的寿命比大多数细胞液的RNA短B. 在3端有一个多聚核苷酸(polyA)长尾,是由DNA编码的C. 它们存在于细胞核的核仁外周部分 D. 链内核苷酸不发生甲基化反应E. 有大约四分之三成份将被切除掉,以形成mRNA答案:A C E172、DNA复制的精确性远高于RNA的合成,这是因为( )。A. 新合成的DNA 链与模板形成了双螺旋结构,而RNA链不能B. DNA聚合酶有35外切酶活力,而RNA 聚合酶没有相应活力C. 脱氧核苷酸之间的氢键配对精确性高于脱氧核苷酸与核苷酸之间的配对D. DNA聚合酶有53外切酶活力,而RNA 聚合酶无此活性。答案:B D173、有关逆转录酶的论述哪些是正确的( )。A. 具有依赖于RNA的DNA聚合酶活性 B. 具有依赖于DNA的DNA聚合酶活性C. 不具备53或35核酸外切酶活性 D. 催化合成反应时,需要模板及3OH引物。答案:A B D174、Crick于1958年提出的中心法则包括( )。A. DNA复制 B. RNA复制 C. 转录 D. 逆转录 E. 翻译答案:A C E175、DNA生物合成中需要以下哪些酶参与( )。A. 引物酶 B. 解旋酶 C. 解链酶 D. DNA连接酶 E. DNA聚合酶答案:A B C D E176、RNA聚合酶的核心酶有以下哪些亚基组成( )。A. B. C. D. E. 答案:A C D177、RNA生物合成的终止需要以下哪些成分( )。A. 终止子 B. 因子 C. 因子 D. dna蛋白 E. 亚基答案:A B178、RNA与DNA生物合成相同的是( )。A. 需RNA引物 B. 以35方向DNA为模板 C. 两条模板链同时合成 D. 新链生成方向53 E. 形成3,5磷酸二酯键答案:B D E179、DNA的切除修复需要以下哪几种酶参与( )。A. 光裂合酶 B. 核酸内切酶 C. DNA聚合酶 D. DNA连接酶 E. RNA聚合酶答案:B C D180、真核细胞 mRNA的加工修饰包括以下内容( )。A. 切除内含子,连接外显子 B. 5端接上“帽子” C. 3端接上CCA D. 3端添加多聚(A)尾 E. 碱基甲基化答案:A B D E 四、是非题116、限制性核酸内切酶是能识别几个特定核苷酸顺序的DNA水解酶。( )答案:119、大肠杆菌DNA生物合成中,DNA聚合酶主要起聚合作用。( )答案:120、原核生物DNA的合成是单点起始,真核生物为多点起始。( )答案:121、DNA生物合成不需要核糖核甘酸。( )答案:122、以一条亲代DNA(35)为模板时,子代链合成方向53以另一条亲代DNA链(53)为模板时,子代链合成方向35。( )答案:123、在DNA生物合成中,半保留复制与半不连续复制指相同概念。( )答案:124、在DNA合成终止阶段由DNA聚合酶切除引物。( )答案:125、目前发现的逆转录酶大部分来自于病毒粒子。( )答案:126、依赖DNA的RNA聚合酶由紧密结合的2亚基组成,其中因子具有识别起始部位和催化RNA合成的功能。( )答案:127、RNA的生物合成不需要引物。( )答案:128、大肠杆菌的mRNA在翻译蛋白质之前不需要加工。( )答案:129、DNA聚合酶切除引物RNA属35外切酶作用,切除错配的核甘酸属53外切酶作用。( )答案:130、冈崎片段的合成需要RNA引物。( )答案:131、转录时,RNA聚合酶的核心酶沿模板DNA向其5端移动。( )答案:132、RNA不能作为遗传物质。( )答案:133、以单链DNA为遗传载体的病毒,DNA合成时一般要经过双链的中间阶段。( )答案:134、亚硝酸作为一种有效诱变剂,是因为它直接作用于DNA,使碱基中的氨基氧化生成羰(酮)基,造成碱基配对错误。( )答案:135、大肠杆菌DNA 聚合酶只起聚合作用,不能校对错配碱基。( )答案:136、RNA也能以自身为模板合成一条互补的RNA链。( )答案:137、真核生物的各种RNA都必须经过剪切,修饰才能成熟。( )答案:138、DNA 不仅决定遗传性状,而且还直接表现遗传性状。( )答案:五、问答题76、Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验。答案:提示:(1)将.coli放入以 15 NH4Cl为唯一氮源的培养基中连续培养十几代,使所有DNA分子标记上 15 N;(2)将 15 N标记的.coli再放入普通的 14 N培养基中培养,在细胞生长一代、二代几代的时间间隔内采样;(3)采用氯化铯密度梯度离心分离DNA,并用紫外照相技术检测DNA所在位置;(4)结果如下:其结果确切的证明DNA以半保留方式复制。77、描述大肠杆菌DNA聚合酶在DNA生物合成过程中的作用。答案:.coliDNA聚合酶I是多功能酶,具有:(1)DNA聚合酶活性,能按模板要求,以5-3方向合成DNA,在DNA复制中,常用以填补引物切除后留下的空隙;(2)5- 3外切酶活性,DNA复制后期,用以切除RNA引物;(3)3- 5外切酶活性,用以校对复制的正确性,当出现错配碱基时,切除错配碱基直到正确配对为止;DNA聚合酶I不是DNA复制和校正中的主要聚合酶,它的功能主要是修复。78、以大肠杆菌为例,试述DNA复制过程,总结DNA复制的基本规律。答案: DNA复制过程分三个阶段:(1)起始:从DNA上控制复制起始的序列即起始点开始复制,形成复制叉,复制方向多为双向,也可以是单向,若以双向进行复制,两个方向 复制速度不一定相同。由于DNA聚合酶不能从无到有合成新链,所以DNA复制需要有含3-OH的引物,引物由含有引物酶的引物体合成一段含310个核甘酸的RNA片段;(2)延长:DNA复制时,分别以两条亲代DNA链为模板,当复制叉沿DNA移动时,以亲代35链为模板时,子链的合成方向是53,可连续进行,以亲代53链为模板时,子链不能以35方向合成,而是先合成出许多53方向的冈崎片段,然后连接起来形成一条子链;(3)终止:当一个冈崎片段的3OH与前一个冈崎片段5磷酸接近时,复制停止,由DNA聚合酶I切除引物,填补空隙,连接酶连接相邻的DNA片段。DNA复制时,由DNA解旋酶(又称解链酶)通过水解ATP获得能量来解开DNA双链,并沿复制叉方向移动,所产生的单链很快被单链结合蛋白所覆盖,防止DNA的变性并保护其单链不被降解,复制叉前进过程中,双螺旋产生的应力在拓扑异构酶的作用下得到调整。DNA复制基本规律:(1)复制过程为半保留方式;(2)原核生物单点起始,真核生物多点起始,复制方向多为双向,也有单向;(3)复制方式呈多样性,(直线型、Q型、滚动环型等);(4)新链合成需要引物,引物RNA长度一般为几个10个核甘酸,新链
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