STP-QY-008硫酸庆大霉素质量标准及检验规程.doc

标题硫酸庆大霉素质量标准及检验规程页数3-1制定人制定日期编号STP-QY-008审查人审查日期版本批准人批准日期生效日期 年 月 日颁发部门品保部发送部门份数目的：明确硫酸庆大霉素质量标准和规范硫酸庆大霉素的检验。适用范围：硫酸庆大霉素的检验。责任人：化验员。引用标准：CP2000版二部。本品按无水物计算，每1mg的效价不得少于590庆大霉素单位。性状 本品为白色或类白色的粉末；无臭；有引湿性。比旋度 取本品，精密称定，加水溶解并稀释成每1ml中含50mg的溶液，依法测定（见比旋度测定法），比旋度为+107至+121。鉴别 (1)取本品约5mg，加水1 ml溶解后，加0.1%茚三酮的水饱和正丁醇溶液1ml与吡淀0.5ml，在水浴中加热5分钟，即显紫蓝色。(2)取本品与庆大霉素标准品，分别加水制成每1ml中含20mg的溶液，照薄层色谱法（见薄层色谱测定法）试验，吸取上述两种溶液各2l，分别点于同一硅胶G薄层板（临用前于105活化2小时）上；另取氯仿-甲醇-氨溶液（1:1:1）混合振摇，放置1小时，分取下层混合液为展开剂，展开后，取出于20-25晾干，置碘蒸气中显色，供试品溶液与标准品溶液所显斑点的颜色与位置应一致。(3)本品的水溶液显硫酸盐的鉴别反应（见一般鉴别反应）。检查 酸度 取本品，加水制成每1ml中含40mg的溶液，依法测定（见PH值测定法），PH值应为4.0-6.0。溶液的澄清度与颜色 取本品5份，各0.4g，分别加水5ml使溶解，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（见溶液的澄清度检查法）比较，均不得更浓；如显色，与黄色或黄绿色2号标准比色液（见颜色检查法）比较，均不得更深。硫酸盐 取本品约0.125g，精密称定，加水100ml使溶解，用浓氨溶液调节PH值至11，精密加氯化钡滴定液（0.1mol/L）10ml及酞紫指示液5滴，用乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.05mol/L）滴定，注意保持滴定过程中的PH值为11，滴定至紫色开始消褪，加乙醇 编号STP-QY-008标题硫酸庆大霉素质量标准及检验规程页数3-250ml，继续滴定至紫蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml氯化钡滴定液（0.1mol/L）相当于9.606mg硫酸盐（SO4），本品含硫酸盐按无水物计算应为32.0%-35.0%。水分 取本品，照水分测定法（见水分测定第一法A）测定，含水分不得过15.0%。炽灼残渣 不得过0.5%（见炽灼残渣测定法）。庆大霉素C组分 照高效液相色谱法（见高效液相测定法）测定。色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-冰醋酸-甲醇（25:5:70）配制的0.02mol/L庚烷磺酸钠溶液为流动相（必要时调节甲醇的含量）；检测波长为330nm。理论板数按C2组分峰计算应不低于2000。C2a峰和C2峰的分离度应符合要求。测定法 取本品适量，精密称定，加水制成每1ml中含0.65mg的溶液，精密量取4.0ml，置10ml量瓶中，加异丙醇2ml与邻苯二醛试液1.6ml，用异丙醇稀释至刻度，摇匀，置60水浴中加热15分钟，冷却，滤过，取续滤液10l注入液相色谱仪，记录色谱图；另取庆大霉素标准品，同法测定。C组分的保留时间依次为：C1、C1a、C2a、C2。量取C1、C1a、C2a、C2的峰高，按下式计算： HX/RXCX（%）= 100% H1/R1+H1a/R1a+H2a/R2a+H2/R2式中：CX为供试品CX组分的含量；HX为测定的供试品CX组分的峰高值；RX（响应因子）为HX/FX；FX为标准品CX组分的含量标准值；HX为测定的标准品CX组分的峰高值。C1应为25%-50%，C1a应为15%-40%，C2a应为20%-50%。含量测定 1、 原理：硫酸庆大霉素属于抗生素，利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，采用量反应平行原理的设计，比较标准品供试品两者编号STP-QY-008标题硫酸庆大霉素质量标准及检验规程页数3-3对接种试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品的效价。2、 主要仪器与试剂：磷酸盐缓冲液（PH7.8）、培养基1、分析天平、培养皿、多功能微生物测试仪、恒温培养箱。3、 步骤：精密称取本品适量，加灭菌水制成每1m