Pr-PT-2004 猪丹毒菌种(GC42株)生产工艺规程_免费下载.doc

磐石益格生物科技发展有限公司生产车间工艺规程工艺规程 参考号 Pr PT 2004版本 1生效日 2013 07 10 标题 猪丹毒菌种 猪丹毒菌种 GC42 株 生产工艺规程株 生产工艺规程 制作审核批准 签名 日期 签名 日期 签名 日期 第 1 页共 6 页 目录目录 1 目标目标2 2 适用范围适用范围2 3 定义和缩略语定义和缩略语2 4 关联文件关联文件2 5 程序程序2 5 1 生产工艺质量控制要点2 5 2 生产指令2 5 3 开种2 5 4 选种3 5 5 二级种子制备4 6 附件附件4 磐石益格生物科技发展有限公司生产车间工艺规程工艺规程 参考号 Pr PT 2004版本 1生效日 2013 07 10 标题 猪丹毒菌种 猪丹毒菌种 GC42 株 生产工艺规程株 生产工艺规程 第 2 页共 6 页 1 目标目标 建立猪丹毒菌种 GC42 株 生产工艺规程 使生产工艺标准化 规范化 保证制品质量 防止污 染和交叉污染 2 适用范围适用范围 适用于猪丹毒菌种 GC42 株 生产工艺 3 定义和缩略语定义和缩略语 猪丹毒菌种 GC42 株 生产工艺规程 4 关联文件关联文件 5 程序程序 5 1 生产工艺质量控制要点生产工艺质量控制要点 5 1 1 生产区域要求 菌种开种 做小种等重要的操作均在万级区域内的局部百级区域下进行 菌种培养等工序在万级洁 净区域 培养基消毒 各种用具消毒 培养基制备 物品包扎等工序在十万级洁净区 5 1 2 质量控制要点 生产工艺质量控制要点如下表 制备过程控制点质量控制项目频次 菌种继代 不超 10 代每批 马丁琼脂平皿选种代次 不超 5 代每批 培养温度 36 37 每批二级种子培养 培养时间 10 22 小时每批 二级种子存放2 8 不超 3 天每批 菌种检测纯粹检验 应纯粹每批 5 2 生产指令生产指令 1 生产指令单制定 由车间经理签字确认 2 接收人在接到生产指令单后 签字确认 5 3 开种开种 5 3 1 操作前检查 1 是否无上批遗留物品 2 操作室是否有 已清洁 状态标识 3 使用的物品及用具是否符合生产规定 磐石益格生物科技发展有限公司生产车间工艺规程工艺规程 参考号 Pr PT 2004版本 1生效日 2013 07 10 标题 猪丹毒菌种 猪丹毒菌种 GC42 株 生产工艺规程株 生产工艺规程 第 3 页共 6 页 4 提前半小时打开局百 5 3 2 开种 1 领回菌种后 2 用经蒸汽高压灭菌的注射器 吸取适量 约 2 3 毫升 马丁肉汤溶化稀释菌种 3 用同一注射器吸取菌种稀释液 移植接种到鲜羊血马丁琼脂斜面和纯粹检验培养基中 每管 0 2 0 3 毫升 4 置 36 37 培养 22 24 小时 5 观察长菌情况 纯粹者作为基础种子 置于 2 8 冰箱保存备用 每半个月移植传代一次 使用期限不超每半个月移植传代一次 使用期限不超 1010 代代 5 3 3 清场 1 移出废弃物及使用过物品 2 清洁操作室及设备 3 专人复核后 悬挂 已清洁 状态标识 5 4 选种选种 5 4 1 操作前检查 1 是否无上批遗留物品 2 操作室是否有 已清洁 状态标识 3 使用的物品及用具是否符合生产规定 4 提前半小时打开局百 5 4 2 明胶选种 1 取出移植在新鲜羊血马丁琼脂斜面的菌种 用马丁汤洗下菌苔 2 用马丁汤作 10 倍递进稀释 3 按 10 6 10 7 10 8接种于明胶平皿 每个滴度划皿 2 个 每皿 0 2ml 4 置 36 37 培养 16 22 小时 5 置 15 培养 3 5 天 每天用低倍显微镜进行检查 明胶平皿划皿接种一定要在明胶平皿划皿接种一定要在 1515 18 18 环境 以防明胶培养基自容 环境 以防明胶培养基自容 6 猪丹毒杆菌弱毒菌株在明胶平皿上的培养特性应是灰白色 不透明的圆形小菌落 在低倍显微 镜下呈浅黄色 中心可见核样结构 周边有向外生长的短毛样分支 挑出典型菌落 30 个 移植于新鲜 羊血马丁琼脂斜面 7 置 36 37 培养 24 小时 8 取出存于 2 8 冰箱内 传代菌种每月进行明胶选种一次传代菌种每月进行明胶选种一次 5 4 3 马丁琼脂平皿培养基选种 经明胶平皿培养挑选的菌种 还需通过马丁琼脂平皿培养基选种经明胶平皿培养挑选的菌种 还需通过马丁琼脂平皿培养基选种 1 取从明胶平皿选出并移植在新鲜羊血马丁琼脂斜面的菌种 用马丁汤洗下菌苔 2 用马丁汤作 10 倍递进稀释 3 按 10 6 10 7 10 8接种于含有 0 1 裂解全血及 4 健康动物血清的马丁琼脂平皿上 4 置 36 37 培养 36 48 小时 5 挑选中等大小圆整光滑型 在低倍显微镜下呈周围有微小波纹 中部有黄褐色点状颗粒的典型 菌落 30 个 混合接种羊血斜若干支 连同菌落供选皿 6 置 36 37 培养 24 小时 7 观察长菌情况 若菌落供选皿无杂菌生长 移植血斜亦纯粹 则菌种斜面置于 2 8 保存备用 作为一级种子 如有杂菌生长 应弃去重选 磐石益格生物科技发展有限公司生产车间工艺规程工艺规程 参考号 Pr PT 2004版本 1生效日 2013 07 10 标题 猪丹毒菌种 猪丹毒菌种 GC42 株 生产工艺规程株 生产工艺规程 第 4 页共 6 页 5 4 4 清场 1 移出废弃物及使用过物品 2 清洁操作室及设备 3 专人复核后 悬挂 已清洁 状态标识 5 5 二级种子制备二级种子制备 5 5 1 操作前检查 1 是否无上批遗留物品 2 操作室是否有 已清洁 状态标识 3 使用的物品及用具是否符合生产规定 4 提前半小时打开局百 5 5 2 二级种子制备 1 制备猪丹毒弱毒菌种二级种子的培养基为猪丹毒干粉培养基 配制时分装入若干 2 万 ml 瓶中 每瓶装量 8000ml 以及若干 500 ml 瓶中 每瓶装量 200 ml 2 将 500 ml 种子瓶菌液移植到 2 万 ml 种子瓶中 再按培养液总量加入 2 4 裂解血球全血 3 接种完成后 置 36 37 培养 10 小时 中间摇动一次 4 培养结束 置百级操作台逐瓶抽样作纯粹检验 经检验纯粹者 作为二级种子液 供大量生产 通气培养使用 5 一时未用到的种子液 置 2 8 冷库内存放 限 3 天内使用完 超过 3 天不能再作种用 5 5 3 清场 1 移出废弃物及使用过物品 2 清洁操作室及设备 3 专人复核后 悬挂 已清洁 状态标识 6 附件附件 无 磐石益格生物科技发展有限公司生产车间工艺规程工艺规程 参考号 Pr PT 2004版本 1生效日 2013 07 10 标题 猪丹毒菌种 猪丹毒菌种 GC42 株 生产工艺规程株 生产工艺规程 第 5 页 共 6 页 文件接收单文件接收单 接收部门培训人员名单培训日期 培训人员 签字 注 1 本页由接受部门经理保存 记录并归档 2 下一页将由 QA 部保存 磐石益格生物科技发展有限公司生产车