2020年香连素片质量标准研究论文.doc

香连素片质量标准研究论文 香连素片是广东万年青制药有限公司的产品，具有清热燥湿、行气止痛的功效，临床用于湿热型痢疾、里急后重、腹痛泄泻。下面是为大家的香连素片质量标准研究论文，欢迎参考 香连素片质量标准研究论文 【摘要】目的建立香连素片的质量控制标准。方法采用薄层色谱法鉴别香连素片中的木香;采用高效液相色谱法测定香连素片中盐酸小檗碱的含量。结果在薄层色谱中检出了木香;盐酸小檗碱的进样量在0.03780.378g范围内呈良好的线性关系(r=0.9997)，平均回收率为101.49%，RSD为1.97%(n=6)。结论本方法专属性强、准确、重现性好，可作为香连素片的质量控制标准。 【关键词】香连素片;木香;薄层色谱法;盐酸小檗碱;高效液相色谱法 Abstract:ObjectiveToestablishamethodforqualitycontrolofXiangliansutablets.MethodsRadixAuckiandiaeinthetabletswasidentifiedbyTLC.ThecontentofberberinehydrochlorideinthetabletswasdeterminedbyHPLC.ResultsRadixAuckiandiaecouldbeidentifiedbyTLC.Berberinehydrochlorideshowedagoodlinearcorrelationovertherangeof0.0378-0.378g(r=0.9997).Theaveragerecoveryofberberinehydrochloridewas101.49%withRSD1.97%(n=6).ConclutionsThemethodisspecific,aurateandreproduciblefortheequalitycontrolofXiangliansutablets. Keywords:Xiangliansutablets;berberinehydrochloride;HPLC;Radixauckiandiae;TLC 香连素片是广东万年青制药有限公司的产品，具有清热燥湿、行气止痛的功效，临床用于湿热型痢疾、里急后重、腹痛泄泻。其处方为木香500g、盐酸小檗碱75g。原药品标准1鉴别木香用试管反应，盐酸小檗碱的含量用紫外分光光度法测定，方法专属性较低且影响因素多。本文采用薄层色谱法鉴别木香、高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含量，结果表明操作简便、准确、重复性好，为该品种的质量标准进一步修订提供了依据。 1仪器与试药 1.1试药 香连素片(批号：030801、030802、030803、040701、041002、050601、050802、060601、060602、060603)均为广东万年青制药有限公司产品;木香对照药材(批号：921-9201)及盐酸小檗碱对照品(批号：110713-xx09)均购自中国药品生物制品检验所;硅胶G预制板及硅胶G均由青岛海洋化工厂生产;乙腈为色谱纯;其他试剂与试药均为分析纯。 1.2仪器 LC?xxA高效液相色谱仪(日本岛津),UV?2501PC紫外分光光度仪(日本岛津),CQ?15A超声波清洗器(上海跃进医用光学器材厂)。 2薄层鉴别2 取本品2片，研成细粉，加三氯甲烷10mL，超声(功率120W，频率50Hz)处理30min，滤过，滤液浓缩至2mL，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.2g、不含木香的阴性样品，同法分别制成对照药材溶液及阴性对照溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各3L，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷?环己烷(体积比51)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%香草醛硫酸溶液，在105加热至斑点清晰。置可见光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰，见图1。 3含量测定 3.1色谱条件 色谱柱：phenomenexC18(150mm4.6mm，5m)流动相：以磷酸盐缓冲溶液0.05mol/L磷酸二氢钾和0.01mol/L十二烷基磺酸钠(体积比11)，含0.2%三乙胺?乙腈(体积比6040)，用磷酸调节pH值至3.0为流动相;流速：1.2mL/min，检测波长：266nm，柱温：室温，进样量：10L，理论塔板数不低于1500。 3.2溶液的制备 3.2.1对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1mL含120g的溶液，作为对照品溶液。 3.2.2供试品溶液的制备 取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸小檗碱60mg)，置索氏提取器中，加盐酸?甲醇(体积比1100)适量，加热回流提取至提取液无色，将提取液(必要时浓缩)移至50mL量瓶中，用少量盐酸?甲醇(1体积比100)的混合液洗涤容器，洗液并入提取液中，并稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL，置10mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得。 3.2.3阴性对照溶液的制备 按照本品的处方、制法制备缺少盐酸小檗碱的模拟样品，按“3.2.2”项方法制成阴性对照溶液。 3.3专属性试验 分别取供试品溶液、对照品溶液及阴性对照溶液，按上述色谱条件测定，结果阴性对照对盐酸小檗碱测定无干扰，说明方法专属性强。结果见图2。 3.4线性关系的考察 精密称取盐酸小檗碱对照品适量，用乙醇溶解制成质量浓度为37.8g/mL的溶液，分别精密吸取1、2、4、6、8、10L注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定色谱峰面积，以进样量(m)为横坐标，色谱峰面积积分值(Y)为纵坐标，绘制标准曲线，经线性回归，得线性回归方程为Y=2.88725106m-5586.84，r=0.9997，表明盐酸小檗碱进样量在0.03780.378g范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系。 3.5稳定性试验 精密吸取同一批供试品溶液各10L，按上述色谱条件，每隔1h测1次峰面积，结果表明盐酸小檗碱在24h内稳定，RSD为0.66%。 3.6重复性试验 取同一批样品共6份，分别按“3.2.2”项下方法进行制备溶液，并按上述色谱条件测定盐酸小檗碱的含量，结果RSD=0.90%,表明方法重现性良好。 3.7回收率试验 精密称取已知含量的样品(批号：030802)共6份，分别精密加入对照品适量，按“3.2.2”项下方法制备溶液并按上述色谱条件测定盐酸小檗碱的含量，计算加入量的回收率。结果见表1。表1盐酸小檗碱加样回收率试验(略) 3.8准确度考察 以含量限度下限的50%为范围低限、以含量限度上限的150%为范围高限，考察测定范围的准确度。 精密称取已知含量的样品(批号：030802)，按含量范围高、低限折算取样量，各6份，分别精密加入对照品适量，按“3.2.2”项下方法制备溶液并按上述色谱条件测定盐酸小檗碱的含量，计算加入量的回收率。结果见表2。表2准确度试验结果(略) 3.9样品的测定 取10批样品，分别按“3.2.2”项下方法制备溶液，分别精密量取供试品溶液及对照品溶液各10L，注入高效液相色谱仪，并按上述色谱条件，测定盐酸小檗碱的含量，结果见表3。表3样品中盐酸小檗碱的含量(略) 4讨论 4.1采用薄层色谱法鉴别木香时,分别采用自制板及预制板同时展开、预平衡与未平衡的条件展开，层析结果表明：自制板与预制板的层析结果无差别，两种展开条件均可检出木香特征斑点，但以未平衡的条件展开，结果容易产生边缘效应，故展开时预平衡10min较好。 4.2薄层层析的环境影响 分别在冰箱、室温、相对湿度45%和75%的环境条件下展开，结果表明：在上述环境条件展开，均可检出木香特征斑点，差异不大，故选用以室温、相对湿度45%75%为展开环境条件，操作简便。 4.3提取方法的选择 参照国家药品标准1，供试品溶液的制备是经索氏提取后上氧化铝柱洗脱，操作较繁琐。我们对提取方法进行了优化，只经索氏提取后直接测定，并与原提取方法的HPLC测定结果作对比。结果表明：只经索氏提取与原提取方法的测定结果一致，因此样品的提取采用索氏提取法。 4.4测定波长的选择 取对照品溶液，在200500nm波长范围内进行扫描，在349、266、231nm均有最大吸收，经HPLC试验比较，盐酸小檗碱在266nm波长的峰面积值最大，故选择检测波长为266nm。 4.5流动相的选择 参考文献3,4，采用磷酸盐缓冲溶液0.05mol/L磷酸二氢钾和0.01mol/L十二烷基磺酸钠(11)，含0.2%三乙胺?乙腈(6040),分别用磷酸调节pH值至3.0、3.2、3.5为流动相，经试验，当流动相的pH值为3.0时对照品及样品的峰形对称，重复性好，阴性对照无干扰，故确定流动相为磷酸盐缓冲溶液0.05mol/L磷酸二氢钾和0.01mol/L十二烷基磺酸钠(11)，含0.2%三乙胺?乙腈(6040)，用磷酸调节pH值至3.0。 4.6耐用性考察 4.6.1柱温的考察 柱温分别为室温、40时，色谱峰的分离度、峰形及峰面积基本一致，故以室温作为柱温，操作较简便。 4.6.2流速的考察 分别设定流速为1.0、1.2及1.5mL/min进行测定，结果表明：当流速为1.0mL/min时保留时间太长，当流速分别为1.2及1.5mL/min时色谱峰的峰形及峰面积无甚差别，且前者的保留时间短一些，故选择流速为1.2mL/min。 4.6.3色谱柱的考察 选用3种不同厂牌的色谱柱：phenomenexC18(150mm4.60mm,5m)、DiamonsilTMC18(250mm4.60mm,5m)和SpherisorbC18(250mm4.60mm,5m)，测定同一批样品(批号：060602)的含量，结果3种色谱柱测得含量的RSD=0.61%(n=2)，表明换用不同厂牌的色谱柱，均可得到满意的色谱图，故本法的耐用性好。 【参考文献】