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教案首页 课程名称组织学与胚胎学年级专业、层次临床医学本科授课教师职称 教授课 程(大、小班)大班学时2学时授课题目(章,节)绪论基本教材或主要参考书组织学与胚胎学 授课目的和要求: 1. 掌握组织学的概念、研究的内容及其在医学中的地位。 2. 掌握组织的概念和类型。 3熟悉组织学一些常用的研究技术方法。 4了解学习组织学的目的和方法。大体内容与时间安排,教学方法:1. 组织学的研究内容 30min 多媒体教学2. 组织学的研究方法 50min 多媒体教学3. 组织学在医学中的地位 15min 多媒体教学4. 小结 5min 多媒体教学 教学重点、难点:重点:1. 组织的概念和类型。 2. 组织学一些常用的研究技术方法。 难点:电子显微镜技术教研室审阅意见:教研室主任签字:年 月 日 基本内容辅助手段和时间分配一、组织学研究内容和意义组织学(histology)是研究正常机体微细结构及其相关功能的科学。研究内容包括各种组织、细胞、亚细胞及其结构分子。组织是由结构相似的细胞群及其间的细胞外基质共同构成的。四大基本组织:上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织。 四大组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官;多个功能相关的器官构成一个系统。一个成人约有11015个细胞,约210种,细胞是机体结构与功能的基本单位。细胞外液由细胞产生,因此细胞是组织的构成基础。二、组织学的研究方法(一)光学显微镜技术1.一般光学显微镜技术 应用一般光学显微镜(简称光镜)观察组织切片的方法。是组织学研究的最基本方法。石蜡切片术是最常用的技术,包括取材固定、脱水包埋、切片染色、封片等过程。* 取材固定 用甲醛等蛋白凝固剂固定新鲜组织块以保存组织原本结构。* 脱水包埋 用酒精脱尽组织块中水分后用二甲苯置换出酒精再用石蜡等包埋成硬块。* 切片染色 以切片机切成510um厚的组织切片,贴于载玻片上,脱蜡后染色。光镜结构的常用计量单位是微米(um) 1mm = 1000 um 组织学染色方法多种,如HE染色法、银染法等。(1)HE染色法是最常用染色法,是用苏木精和伊红两种染料进行染色。HE是苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)的首个字母缩写。苏木精是碱性染料,使细胞核染色质和胞质内的核糖体呈紫蓝色。伊红是酸性染料,使细胞质和细胞外基质中带较强碱基的蛋白质成分着红色。易于被碱性或酸性染料着色的性质分别称为嗜碱性和嗜酸性。若两种染料的亲和力都不强,则称中性。(2)特殊染色法银染 用硝酸银将神经细胞染为黑色。醛复红染 用醛复红将弹性纤维染为紫色。甲苯胺蓝染 用甲苯胺蓝将肥大细胞的分泌颗粒染为紫色。以上这些染色方法习惯上称为特殊染色。(3)活体染色* 封片 切片经脱水等处理后,滴树胶,用盖玻片密封保存。除石蜡切片外,还有火棉胶包埋切片、冰冻切片涂片、铺片和磨片等。2特殊光学显微镜技术为应用一些带有特殊装置的显微镜进行研究的方法。其中包括荧光显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜和激光共聚焦扫描显微镜等组织学研究内容和意义: 30min观察模式图和切片图组织学的研究方法: 50min简单了解石蜡切片术的制作过程结合切片图重点讲述HE染色法,及嗜碱、嗜酸性特殊染色法中银染在组织学染色中出现相当多,加以描述简单介绍特殊光学显微镜技术,目前的科研研究需要使用这些仪器基本内容辅助手段和时间分配(二)电子显微镜技术电子显微镜(简称电镜)是观察细胞和细胞间质超微结构的电子仪器。电镜用电子束代替可见光,用电磁透镜代替光学透镜,用荧光屏将电子束成像。电镜分辫率比光镜大得多,分辨率可达0.2nm,放大倍数为几万至十几万甚至百万倍。电镜结构的常用计量单位是纳米(nm) 1um = 1000 nm 电镜分两种:透射电镜和扫描电镜。1透射电镜术 主要用于观察组织细胞的内部结构。将组织经处理作成超薄切片(5080nm),再经重金属染色后,用透射电镜观察的方法。其标本的制作需经过: 取材固定 将新鲜组织切成小块(1mm3),以戊二醛与锇酸二次固定。包埋切片 用树脂包埋,以超薄切片机切成5080nm的超薄切片。染色观察 以醋酸铀和柠檬酸铅等重金属电子染色后置于电镜下观察。电镜下观察标本是黑白反差结构影像,影像较黑,称电子密度高,反之,称电子密度低。2扫描电镜术 主要用于观察组织细胞表面的立体结构。将观察组织经固定后,在其表面喷镀一层碳膜和合金膜,用电子束扫描喷镀膜,经喷镀膜散射的二次电子被探测器收集,在荧光屏上形成具有立体感的图像。(三)组织化学技术应用化、物理、免疫学等原理和技术,对组织和细胞内某种物质,作定性、定位和定量研究。1普通组织化学术利用化学反应原理,使试剂和组织中待查物质发生反应,产生有色沉淀物或重金属沉淀;用光镜或电镜观察。(1)糖类:常用过碘酸希夫反应(periodic acid Schiff reacition,PAS)显示多糖和糖蛋白的糖链。过碘酸氧化糖分子,后者与希夫试剂结合,形成紫红色沉淀物,此为PAS反应。(2)脂类:包括脂肪和类脂,常用脂肪染色法。(3)酶类:采用免疫组织化学技术显示。(4)核酸:显示核酸的传统方法是孚尔根反应。还可用显微分光光度计等测定反应强度。2免疫组织化学术 根据抗原与抗体特异性结合的原理,检测组织中肽和蛋白质的技术。3原位杂交技术通过检测细胞内mRNA或DNA片段,原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达的技术。 (四)放射自显影术通过研究活细胞对同位素标记物质的代谢过程来显示该细胞的功能状态。 结合电镜图重点讲述电子显微镜技术交待两种电镜的区别简单介绍该技术简单介绍该技术基本内容辅助手段和时间分配(五)细胞培养术和组织工程细胞培养术是将离体的细胞在模拟体内的条件下进行培养的技术。组织工程是用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官,将之用于临床治疗的技术。三、组织学在医学中的地位是一门重要的基础学科是生理学的结构基础,是病理学的正常参照四、小结结合本学科的研究进展介绍该技术组织学在医学中的地位15min小结 5min (教案末页)小结1组织学的概念。2组织的概念和类型。3HE染色法。4光镜结构与超微结构。复习思考题、作业题1. 什么是组织学?组织学研究的内容有哪些?有哪些研究方法?2光镜结构是指什么?光镜结构常用的计量单位是什么?光镜切片的厚度一般是多少?3超微结构是指什么?电镜结构常用的计量

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