家族遗传性胃癌ppt课件.pptx

家族遗传性胃癌 基因诊断 筛查 和临床处理 贾淑芹北京大学肿瘤医院分子诊断中心1 AutosomalDominantInheritedCancerSyndromes BreastandOvarianCancerBRCA1 2ColonCancerandPolyposis 2 HNPCCFAPPolyposisCowdensPeutz JehgersJuvenilePolyposis MMRAPCMYHPTENSTK11SMAD4BMPR1A OtherGICancers GastricPancreasMEN1MEN2 MTCVHLLi Fraumeni CDH1p16MeninRETVHLp53 北京大学肿瘤医院 PKUCH 分子诊断中心 MDC 癌症遗传基因筛查101基因panel为癌症患者及其家系成员进行风险评估 遗传咨询和干预 3 癌症的遗传易感性 4 谁应该做癌症遗传易感性检测 若携带与癌症相关的已知基因突变 患癌的风险有多大 对于未发病的携带者 我们能做些什么 遗传弥漫型胃癌 HDGC 林奇综合征 Lynch 遗传性乳腺癌卵巢癌综合征 HBOC 青少年息肉综合征 JPS 黑斑息肉综合征 PJS 90 家族性腺瘤息肉病 FAP 李 佛美尼综合征 LFS 家族遗传性胃癌 背景 5 家族性胃癌的遗传风险 6 Chun Ford CancerJ 2012 遗传性弥漫型胃癌 1998年 首次发现于新西兰3个毛利家族中 早发的胃癌显示出常染色体显性遗传模式 连锁分析将基因定位于16q22 1 在3个家系中都发现E cadherin CDH 1 种系截短突变 外显率 60岁前 70 的患者均患癌 7 遗传性弥漫型胃癌 常染色体显性遗传 早发 14 69y 平均 37yLauren分型 弥散型 不易早期诊断 预后差 CDH1种系突变为特征 8 HDGC诊断标准 IGCLC 2 3confirmedDGCcasesin1stor2nddegreerelativesindependentofage SingleDGC 40PersonalorfamilyhistoryofDGCandLBC 1case 50 SingleDGC 40PersonalorfamilyhistoryofDGCandLBC 1case 50 20101 2GCcasesinfamily oneconfirmedDGC 50 20151 2GCcasesinfamily oneconfirmedDGC 19991 2GCcasesinfamily oneconfirmedDGC 50 2 3confirmedDGCcasesin1stor2nddegreerelativesindependentofage 9 2015版标准解读 10 2例以上胃癌 至少其中一例是弥漫型 30 40 种系突变 年龄 40岁的弥漫型胃癌 10 种系突变 任何一个家属同时具有弥漫型胃癌和乳腺小叶癌 其中至少一例 50岁 个人双侧乳腺小叶癌或者多个家族成员乳腺小叶癌 一例 50岁 患者同时具有弥漫型胃癌和唇 腭裂 印戒细胞癌的癌前病变 11 CDH1突变的患者印戒细胞癌中E cadherin表达降低或缺如 12 CDH1与患癌风险 终生患癌风险 男性携带者 70 GC女性携带者 56 GC女性携带者 42 乳腺小叶癌 LBC 中位发病年龄毛利族 32yrs其他 43yrs 13 Hansford Huntsman JAMAOnc2015 终生患癌风险 男性携带者 67 GC女性携带者 83 GC女性携带者 60 乳腺小叶癌 LBC 18 40ys携带者建议行预防性全胃切除术 14 CDH1与患癌风险 2016NCCN V1 HDGC中CDH1种系突变的地域差异 15 低风险区 北美 加拿大 英国 50 中风险区 德国 25 高风险区 葡萄牙 意大利 22 散发性胃癌高发区 中 日 韩 10 HDGC中CDH1的突变定位 16 临床处理 遗传学检测和咨询 E cadherinorCDH1 年龄 25岁或早于先证者10年 每6 12个月做一次胃镜检查 盲取活检30块 乳腺X光 乳腺核磁 预防性全胃切除 vanderPost etal Journalofmedicalgenetics 2015 17 家族遗传性胃癌 二 我们的研究 18 MaterialandMethods 19 Samples 103HDGC1500sporadicGC3097normalcontrolMethods 16exonsPCR sequencing GC sitesequencing Familiesandcontrols MLPA HDGC 20 Results 1 Table1 Patientinformation c 1018A G p T340A 7cases c 865G Ap A289T 1case c 1273G C p V425L 1case 2 CDH1germlinemutation c 1888C G p L630V 34cases c 2165 1G A 1case 21 c 1298A G p D433G 1case c 2206G A p V736M 1case c 1103C GT p T368S 1case c 1174G A p V392I 1case c 1581A C p R527S 1case 22 1case exon14deletion 3 CDH1rearrangementinHDGC Normal E14del E14DEL Normal 23 E14del V736M R527S L630V A289TT340AT368SV392IV425LD433G N 4 SitesofCDH1germlinemutations Missensemutation 2165 1G A E14del Rearrangement Splicesitemutation 24 5 CDH1L630VandGC 25 CDH1L630VmutationinGCandnormalcontrols 6 Summary Exon Sites Type Polymorphism Functional prediction Cases MutationrateMutationrateinHDGCinHDGC Mutation Reference p T340A missense benign 7 1 82 0 012 1 92 0 011 0625 3 9 c 1298A Gp D433G missense rs376097289 NA possibly affect damagingprotein function 1 1 734 0 0014 0 p V392I missense rs141864044 0 0008 benign tolerated 1 014 0 14 0 6 92 0 061 021 1 14 c 2165 1G A splice probablydamaging affectproteinfunction 1 1 82 0 14 1 92 0 11 1 734 0 0014 0 14 E14del rearrangement affectproteinfunction affectproteinfunction 1 1 82 0 14 1 92 0 11 0 26 Results 2 CellfunctionstudyforCDH1L630V 27 aminoacid1 27 154 708731777 882 EGFRactivation Extracellulardomain Juxtamemberanedomain Srckinaseactivation P38activation L630V 28 B Figure1Confirmationofwild typeormutantCDH1 L630V FLAGfusionproteinexpressingingastriccancercelllineandCHOcellline ANCI N87celllineBCHOcellline A FLAG actin NCI N87cellline FLAG actin CHOcellline 29 1 FunctionofL630VinNCI N87cell 1 1TheinfluenceofCDH1anditsmutantL630VontheproliferationinNCI N87cellline ODValue 490nm 0 0 6 0 7 0 8 24h 48h 72h 96h MockWT L630V0 50 40 30 20 1 30 Figure2CDH1hadnosignificantdifferenceontheproliferationofNCI N87gastriccancercells Hours 0 20 40 Mock WT L630V 24h36h 31 Percentageofmotilecells 1 2TheinfluenceofCDH1anditsmutantL630VonthemigrationinNCI N87cellline Figure3CDH1mutantL630VpromotedthemigrationofNCI N87gastriccancercellsthroughwoundhealingassay A 2 1TheinfluenceofCDH1anditsmutantL630VontheproliferationinCHOcellline 2 FunctionofL630VinCHOcellline 0 0 80 60 40 2 1 1 2 1 4 1 6 24h 48h 72h 96h MockWTL630V 32 ODValue 490nm Figure4CDH1hadnosignificantdifferenceontheproliferationofCHOcancercells Hours Mock WT 2 2TheinfluenceofCDH1anditsmutantL630VonthemigrationinCHOcellline 0h12h24h Figure5CDH1mutantL630VpromotedthemigrationofCHOcancercellsthroughwoundhealingassay Percentageofmotilecells 20 L630V0 40 60 Mock WT L630V 80 12h 24h 33 DISCUSSION CDH1anditsmutantL630Vhadnosignificantinfluenceoncancercellproliferation CDH1mutantL630Vpromotedthemigrationofgastriccancercells 34 结论 中国人GC中CDH1种系突变以错义突变为主 突变频率为3 14 50 1591 HDGC中CDH1突变频率为8 53 or9 78 CDH1T340A很可能是HDGC的致病突变 CDH1L630V在我国正常人群和GC HDGC人群中突变频率均无显著差异 35 结论 36 90 以上的HDGC无CDH1种系突变 CDH1种 系突变可能不是我国HDGC的主要遗传易感基因 本研究为国内家族遗传性胃癌的预防性切除术积累数据 提供理论及实践的基础 家族遗传性胃癌 三 案例分析 37 35号家系CDH1T340A carrier gastriccancerLungcancerEsophegealcancerBreastcancerTestedCancerSomaticmutationT340A 61y 38 34y 40y 35号家属