天然药物化学_第九章_生物碱-17.ppt

第九章生物碱 天然药物化学 天然药物化学 莨菪 麻黄 金鸡纳 番木鳖 汉防己 苦参 秋水仙 延胡索 三尖杉 乌头 附子 草乌 北乌头 天然药物化学 一 生物碱的含义及特点1 含义生物碱指来源于生物界的一类含氮有机化合物 含有负氧化态氮原子的有机环状化合物 2 特点大多有较复杂的环状结构 氮原子结合在环内 多呈碱性 可与酸成盐 多具有显著的生理活性 第一节概述 下列除外 低分子胺类 甲胺 乙胺 氨基酸 氨基糖 肽类 蛋白质 核酸 核苷酸 卟啉类 维生素 天然药物化学 二 生物碱的分布及存在形式1 分布生物碱主要分布于植物界 绝大多数存在于高等植物的双子叶植物中 已知存在于50多个科的120多个属中 与中药有关的一些典型的科如毛茛科 黄连 乌头 附子 罂粟科 罂粟 延胡索 茄科 洋金花 颠茄 莨菪 防己科 汉防己 北豆根 豆科 苦参 苦豆子 等 单子叶植物也有少数科属含生物碱 如石蒜科 百合科 兰科等 百合科中较重要的如贝母属 少数裸子植物如麻黄科 红豆杉科 三尖杉科也存在生物碱 天然药物化学 2 存在形式 游离碱 碱性极弱 以游离的形式存在 盐类 与其成盐的有机酸有 柠檬酸 酒石酸等 特殊的酸类 乌头酸 绿原酸等 无机酸 硫酸 盐酸等 苷类 以苷的形式存在于植物中 酰胺 如秋水仙碱 喜树碱等 N 氧化物 植物体中的氮氧化物约一百余种 此外 还有氮杂缩醛类 烯胺 亚胺等 天然药物化学 三 生物碱的生物活性生物碱多具有显著而特殊的生物活性 例如 吗啡 延胡索乙素具有镇痛作用 阿托品具有解痉作用 小檗碱 苦参生物碱 蝙蝠葛碱有抗菌消炎作用 利血平有降血压作用 麻黄碱有止咳平喘作用 奎宁有抗疟作用 苦参碱 氧化苦参碱等有抗心律失常作用 喜树碱 秋水仙碱 长春新碱 三尖杉碱等有不同程度的抗癌作用等 天然药物化学 四 生物碱的生物合成在生物碱的生物合成途径中 氨基酸是其初始物 主要有鸟氨酸 赖氨酸 苯丙氨酸 酪氨酸 色氨酸 邻氨基苯甲酸 组氨酸等 一 生物碱生物合成的主要化学反应1 环合反应 1 希夫碱 Schiff 形成反应氨基和羰基加成 脱水形成希夫碱 涉及希夫碱的形成反应的生物碱有 吡咯 莨菪烷 蒎啶 喹诺里西啶类 2 Mannich氨甲基化反应醛 胺和负碳离子 含活泼氢的化合物 发生缩合的反应为曼尼希氨甲基化反应 结果是活泼氢被氨甲基取代 得到曼尼希碱 曼尼希碱在生物碱中 尤其是苄基异喹啉和吲哚生物碱的生物合成中 许多一级环合都是通过曼尼希反应生成的 天然药物化学 酚的氧化偶联反应为次级环化反应 反应过程为含酚羟基化合物在植物体内经酶作用形成自由基 两个自由基经偶联 形成新键 如在由苄基四氢异喹啉形成各类异喹啉生物碱中 则是由酚的氧化偶联反应生成的 2 碳 氮键的裂解较重要的裂解为Hofmann降解和vonBraun降解 举例 蕃荔枝碱经过酚性氧化偶联反应生成阿朴菲型生物碱 天然药物化学 生物合成研究表明生物碱来源于前体氨基酸 甲戊二羟酸和醋酸酯等 生物碱生物合成的原理涉及少数的环合反应 C N键和C C键的裂解反应以及经常伴随的某些重排 取代基的形成 增减 消除 转化等 天然药物化学 一 鸟氨酸系生物碱来源于鸟氨酸的生物碱主要包括吡咯烷类 莨菪烷类和吡咯里西啶类生物碱 一 吡咯烷类生物碱 第二节生物碱的结构与分类 红古豆碱 天然药物化学 二 莨菪烷 托品烷 类生物碱本类生物碱多由莨菪烷环系的C3 醇羟基和有机酸缩合成酯 主要存在于茄科的颠茄属 曼陀罗属 莨菪属和天仙子属中 典型的化合物如莨菪碱 hyoscyamine 莨菪碱 阿托品 山莨菪碱anisodamine 东莨菪碱scopolamine 三 吡咯里西丁类生物碱 吡咯里西丁 野百合碱monocrotaline 天然药物化学 二 赖氨酸系生物碱 一 吡啶和蒎啶类结构较简单 生源上关键的前体物是蒎啶亚胺盐类 代表性化合物如胡椒中的胡椒碱 piperine 槟榔中的槟榔碱 槟榔次碱等 吡啶蒎啶胡椒碱槟榔碱槟榔次碱 天然药物化学 二 吲哚里西啶类为蒎啶和吡咯共用一个氮原子稠合的衍生物 又分为简单吲哚里西啶和一叶萩碱两类 主要分布于大戟科一叶萩属植物中 如存在于一叶萩中的一叶萩碱中枢神经系统有兴奋作用 吲哚里西啶一叶萩碱 天然药物化学 三 喹诺里西啶类生源上前体物为赖氨酸衍生的戊二胺 本类生物碱是由两个蒎啶共用一个氮原子稠合而成的衍生物 主要分布于豆科 石松科和千屈菜科 代表性化合物如苦参中的苦参碱 matrine 氧化苦参碱 oxymatrine 等 苦参碱氧化苦参碱 三 苯丙氨酸和酪氨酸系生物碱本类生物碱是由苯丙氨酸和酪氨酸为前体物生物合成的一大类数量多 约1000多种 类型复杂 分布广泛 具有较高药用价值的生物碱类型 一 苯丙胺类生物碱较典型的化合物是麻黄中的麻黄碱 ephedrine 苯丙胺 二 异喹啉类生物碱1 小檗碱类和原小檗碱类此两类生物碱可以看成为两个异喹啉环稠合而成 依据两者结构母核中C环氧化程度不同 分为小檗碱类和原小檗碱类 前者多为季铵碱 如黄连 黄柏 三棵针中的小檗碱后者多为叔胺碱 如延胡索中的延胡索乙素 原小檗碱小檗碱延胡索乙素 2 苄基异喹啉类为异喹啉母核1位连有苄基的一类生物碱 罂粟碱蝙蝠葛碱 3 双苄基异喹啉类为两个苄基异喹啉通过1 3个醚键相连接的一类生物碱 连接方式较多 故类型也较多 4 吗啡烷类代表性的化合物有罂粟中的吗啡 morphine 可待因 codeine 等 吗啡烷吗啡可待因 四 色氨酸系生物碱本类生物碱也称吲哚类生物碱 是类型较多 结构较复杂 化合物数目最多的一类生物碱 主要分布于马钱科 夹竹桃科 茜草科等几十个科中 一 简单吲哚类结构特点为只有吲哚母核 而无其它杂环 代表化合物如存在于蓼蓝中的靛青苷 吲哚靛青苷 二 色胺吲哚类此类化合物中含有色胺部分 结构较简单 如吴茱萸中的吴茱萸碱 色胺吴茱萸碱 三 单萜吲哚类分子中具有吲哚母核和一个C9或C10的裂环番木鳖萜及其衍生物的结构单元 如萝芙木中的利血平 reserpine 番木鳖中的士的宁 strychnine 等 士的宁利血平 五 邻氨基苯甲酸系生物碱本类主要包括喹啉和吖啶酮类生物碱 主要分布于芸香科植物 如白鲜皮中的白鲜碱 六 组氨酸系生物碱主要为咪唑类生物碱 数目较少 如芸香科植物毛果芸香中的毛果芸香碱 七 来源于萜类的生物碱 一 单萜类生物碱 秦艽碱甲 二 倍半萜类生物碱 石斛碱 三 二萜生物碱 四 三萜生物碱 如交让木碱八 来源于甾体的生物碱 一 孕甾烷生物碱 二 环孕甾烷生物碱 三 胆甾烷生物碱1 胆甾烷碱类2 异胆甾烷碱类 浙贝甲素verticine 本类生物碱都具有甾体母核 但氮原子均不在甾体母核内 环常绿黄杨碱D 一 物理性质 一 性状1 形态生物碱多数为结晶形固体 少数为非晶形粉末 个别为液体 如烟碱 nicotine 槟榔碱等 2 味生物碱多具苦味 3 颜色生物碱一般无色或白色 少数有颜色 如小檗碱 蛇根碱呈黄色等 有机化合物产生颜色一般要具备长链共轭结构 并有助色团 或同时为离子型 一叶萩碱为淡黄色 是因为氮原子上孤电子对与共轭系统形成跨环共轭 第三节生物碱的理化性质 4 挥发性与升华性少数液体状态及个别小分子固体生物碱如麻黄碱 烟碱等具挥发性 可用水蒸汽蒸馏提取 咖啡因等个别生物碱具有升华性 二 旋光性生物碱结构中如有手性碳原子或本身为手性分子即有旋光性 生物碱的生理活性与其旋光性密切相关 通常左旋体的生理活性比右旋体强 如l 莨菪碱的散瞳作用比d 莨菪碱大100倍 去甲乌药碱 higenaenine 仅左旋体具强心作用 三 溶解性1 游离生物碱 1 亲脂性生物碱大多数叔胺碱和仲胺碱为亲脂性 一般能溶于有机溶剂 尤其易溶于亲脂性有机溶剂 如苯 乙醚 氯仿 特别易溶于氯仿 溶于酸水 不溶或难溶于水和碱水 2 亲水性生物碱主要指季铵碱和某些含氮 氧化物的生物碱 这些生物碱可溶于水 甲醇 乙醇 难溶于亲脂性有机溶剂 3 具特殊官能团的生物碱具酚羟基或羧基的生物碱称为两性生物碱 具酚羟基者常称为酚性生物碱 这些生物碱既可溶于酸水 也可溶于碱水溶液 但在pH8 9时溶解性最差 易产生沉淀 2 生物碱盐一般易溶于水 可溶于醇类 难溶于亲脂性有机溶剂 通常生物碱的无机酸盐水溶性大于有机酸盐 无机酸盐中含氧酸盐的水溶性大于卤代酸盐 小分子有机酸盐大于大分子有机酸盐 二 化学性质 一 碱性1 生物碱碱性来源及碱性大小的表示方法 1 碱性来源根据Lewis酸碱电子理论 凡是能给出电子的电子供体为碱 能接受电子的电子受体为酸 生物碱分子中氮原子上的孤电子对 能给出电子或接受质子而使生物碱显碱性 生物碱碱性大小可用碱的碱式离解常数pKb表示 也可用其共轭酸的酸式离解常数pKa表示 B H2OBH OH 碱酸共轭酸共轭碱目前 生物碱碱性大小统一用pKa表示 pKa越大 碱性越强 一般情况下 pKa 2为极弱碱 pKa2 7为弱碱 pKa7 11为中强碱 pKa 11为强碱 2 生物碱碱性大小与分子结构的关系 1 氮原子的杂化方式生物碱分子中N的孤电子对在有机胺分子中为不等性杂化 其碱性强弱随杂化程度的升高而增强 即sp3 sp2 sp 季铵碱分子中的氮原子最外层有九个电子 极易给出一个电子达到稳定结构 所以碱性强 pKa 11 生物碱分子中碱性基团的pKa值大小顺序一般是 季铵碱 N 烷杂环 脂肪胺 芳香胺 N 芳杂环 酰胺 吡咯 2 诱导效应生物碱分子中的氮原子上电子云密度受到氮原子附近供电基 如烷基 和吸电基 如各类含氧基团 芳环 双键 诱导效应的影响 供电诱导使氮原子上电子云密度增加 碱性增强 吸电诱导使氮原子上电子云密度减小 碱性降低 碱性强弱次序 二甲胺 甲胺 氨 关于氮杂缩醛结构 具有氮杂缩醛结构的生物碱常易于质子化而显强碱性 如氮原子的邻位碳上具 双键或 羟基者 可异构成季铵碱 使碱性增强 如醇胺型小檗碱亦为氮杂缩醛结构 其氮原子上的孤电子对与 羟基的C O单键的 电子发生转位 形成季铵型小檗碱 醇胺型小檗碱季胺型小檗碱 但是 在稠环中 氮杂缩醛体系中氮原子处于桥头N时 因其具有刚性结构不能发生质子化异构 相反由于OH的吸电效应使碱性减小 3 诱导 场效应 共轭效应生物碱分子中氮原子的孤电子对与 电子基团共轭时一般使生物碱的碱性减弱 吸电子共轭效应使氮原子上的电子云密度降低 造成碱性减弱 供电子共轭效应使碱性增强 如含胍基生物碱呈强碱性 注意 氮原子的孤电子对p电子的轴与共轭体系的 电子轴共平面是产生p 共轭效应的必要条件 空间效应如果氮原子周围的取代基分子较大 对氮原子构成屏蔽作用 使氮原子难于接受质子 造成碱性降低 莨菪碱东莨菪碱 氢键效应生物碱的共轭酸盐若能生成稳定的分子内氢键 与含氧基团 则共轭酸的酸性较弱 其共轭碱的碱性较强 麻黄碱共轭酸伪麻黄碱共轭酸二者平面结构 不稳定 稳定 对于具体生物碱来说 若影响碱性的因素不止一个 则需综合考虑 一般来说 空间效应与诱导效应共存 空间效应居主导地位 共轭效应与诱导效应共存 共轭效应居主导地位 综上所述 生物碱结构中的碱性基团与碱性强弱之间的关系为 胍基 季铵碱 脂肪胺和脂杂环 芳胺和吡啶环 多氮同环芳杂环 酰胺基和吡咯环 二 生物碱沉淀反应含义生物碱在酸性水或稀醇中与某些试剂生成难溶于水的复盐或络合物的反应称为生物碱沉淀反应 这些试剂称为生物碱沉淀试剂 反应意义和作用1 用于检查生物碱的有无 在生物碱的定性鉴别时 这些试剂可用于试管定性反应和作为平面色谱的显色剂 2 另外在生物碱的提取分离中还可指示提取 分离终点 3 个别沉淀试剂可用于分离纯化生物碱 如雷氏铵盐可用于沉淀分离季铵碱 3 常用的试剂碘化铋钾 Dragendorff 试剂 其组成为KBiI4 与生物碱反应生成橘红色至黄色无定形沉淀 B HBiI4 碘化汞钾 Mayer 试剂 其组成为K2HgI4 与生物碱反应生成类白色沉淀 B H HgI2或 B H 2HgI4 硅钨酸 Bertrad 试剂 其组成为SiO2 12WO3 nH2O 与生物碱反应生成类白色或淡黄色沉淀 雷氏铵盐试剂 雷氏铵盐即硫氰酸铬铵 其组成为NH4 Cr NH3 2SCN 4 其与季铵型生物碱反应生成红色沉淀或结晶 三 注意事项1 反应一定要在酸性条件下 生物碱成盐溶于水方可反应 2 对生物碱的有无定性时 应用三种以上试剂分别进行反应 均阳性或阴性方有可信性 3 仲胺一般不与生物碱沉淀试剂反应 如麻黄碱 4 水溶液中如有蛋白质 鞣质亦可与此类试剂产生阳性反应 应在被检液中除掉这些成分 三 检识方法 1 显色反应某些试剂能与一些生物碱反应生成有颜色的溶液 该类反应称为生物碱显色反应 所使用的化学试剂称为生物碱显色试剂 2 色谱检识 生物碱的薄层色谱1 吸附薄层色谱法极性吸附剂一般用来分离和检识弱极性和中等极性的生物碱 常用的极性吸附剂有硅胶和氧化铝 性炭等非极性吸附剂常用于分离极性较强的生物碱 生物碱薄层色谱所用流动相系统有中性和碱性两种 2 分配薄层色谱法常选用硅胶 纤维素为支持剂 以甲酰胺为固定相的薄层色谱 适于分离弱极性和中等极性的生物碱 移动相采用氯仿为主的溶剂系统 先用固定相饱和 以水为固定相的薄层色谱 适于分离检识水溶性的生物碱 盐 可用BAW系统展开 二 纸色谱生物碱的纸色谱固定相常用水 甲酰胺或缓冲溶液 三 高效液相色谱法高效液相色谱法对结构相似的生物碱的分离检识可获得满意的效果 第四节提取与分离方法 一 提取方法 一 水或酸水提取法此法适用于水溶性生物碱及生物碱盐的提取 酸水提取液可以采用下列方法进一步处理 1 阳离子树脂交换法 2 萃取法 二 醇类溶剂提取法醇类提取法适用于各种极性生物碱的提取 三 亲脂性有机溶剂提取水溶性生物碱不适用此法 此法提取需先用氨水 石灰乳将药材粗粉湿润膨胀 同时使药材中生物碱盐转变为游离形式再用亲脂性有机溶剂提取 二 分离方法常用的分离方法有萃取法 沉淀法 盐析法 结晶法 色谱法等 一 总生物碱的初步分离生物碱的初步分离应用最多的方法是根据生物碱的碱性强弱 酚羟基的有无及溶解性能 将生物碱初步分成弱碱性生物碱 中强碱性生物碱和强碱性生物碱 水溶性生物碱和酚性 非酚性生物碱五类 二 生物碱单体的分离1 利用生物碱的碱性差异进行分离常用pH梯度萃取法 2 利用总碱中各生物碱 盐 极性差异进行分离3 利用生物碱的特殊官能团进行分离4 利用色谱法进行分离 5 水溶性生物碱的分离水溶性生物碱可用萃取法处理 但很难将水溶性杂质去除 常采用下列方法除去水溶性杂质 沉淀法 是在水溶液中加生物碱沉淀试剂 使水溶性生物碱产生沉淀与水溶性杂质分离 溶剂法 是在生物碱的碱水溶液中加入正丁醇等有机溶剂进行萃取分离 离子交换树脂法 三 总生物碱的提取 一 溶剂法1 酸水提取法 原理 生物碱的盐类易溶于水 游离的生物碱溶于有机溶剂 方法 水或1 酸水溶液 7 15倍量 过程 水提 浓缩 碱化 氨水或石灰乳 萃取 氯仿 苯等 浓缩萃取液 得亲脂性总生物碱 2 乙醇提取法 原理 生物碱及其盐类易溶于乙醇 过程 酸性乙醇冷浸 过滤 碱化 氨水或石灰乳 萃取 氯仿 苯等 浓缩萃取液 得亲脂性总生物碱 3 碱化 有机溶剂提取法 过程 碱水润湿 10 氨水或石灰乳 有机溶剂 氯仿等 提取 浓缩 回收溶剂 得亲脂性总生物碱 弱碱性总生物碱的提取酸水润湿 酒石酸或乙酸 有机溶剂提取 氯仿 四氯化碳或苯 浓缩 回收溶剂 得弱碱性总生物碱 二 离子交换树脂法 1 酸水液通过磺酸型阳离子交换树脂2 碱水润湿树脂3 有机溶剂洗脱4 回收溶剂5 得总生物碱 三 沉淀法1 将季铵生物碱水溶液调至弱酸性 2 加入新鲜配制的雷氏铵盐 3 沉淀溶于丙酮或乙醇 4 滤液中加饱和Ag2SO4 5 适量氯化钡 6 滤液即为季铵生物碱的盐酸盐 雷氏铵盐 四 生物碱的分离 一 系统分离 类别生物碱分离流程图 总生物碱 酸水溶解 酸水滤液 有机溶剂萃取 有机溶剂层 弱碱性生物碱 酸水层 中 强生物碱 有机溶剂层 1 2 NaOH萃取 碱水层 有