2[1].2.1动物细胞培养和核移植技术 学案.doc

2.2.1动物细胞培养和核移植技术 学案编制：赵大鹏 审稿：米云科 杜延平 2011-3-12【目标引领】1.了解动物细胞培养的过程2.比较动物细胞培养与植物组织培养区别3.掌握动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景复习巩固：1.细胞的全能性： 2.植物组织培养： 3.植物体细胞杂交： 相关知识链接：1.胰蛋白酶 2.影响酶活性的因素 3.培养基和培养液 4.植物体细胞杂交【自学探究】 动物细胞工程常用的技术手段有_ _、_、_ _、_ _等。其中，_ _ 是其他动物细胞工程技术的基础。一.动物细胞培养（一）动物细胞培养的过程1.为什么要进行动物细胞培养？2.动物细胞培养概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关 ，将它分散成 ，然后放在适宜的 中，让这些细胞生长和增殖。3.动物细胞培养过程：培养动物所用的细胞大都取自_或出生不久的_器官或组织（因为这些组织或器官中的细胞 ）。将组织取出来后，先用_等使组织分散成单个细胞，然后配置成一定浓度的 。放在培养瓶中的具有一定浓度的细胞悬浮液在培养箱中培养的过程叫做_；随着细胞生长的和增殖，培养瓶中的细胞越来越多，需要定期地用_使细胞从瓶壁上脱离下来，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中培养，这称为_。传代细胞中遗传物质没有发生改变的叫做_；遗传物质发生了改变，并且带有_的特点，这种传代细胞叫做_。4、细胞贴壁 、概念：指培养过程中，细胞贴附在 上的现象。 、培养贴附性细胞的要求：培养瓶或培养皿的内表面 、 。5、接触抑制：指贴壁细胞因为 时导致细胞停止分裂增值的现象。6、原代培养：指动物组织经过 处理后的初次培养。一般能传代约 代，得到细胞株。细胞株的遗传物质与原细胞相比 。7、传代培养：指贴壁生长的细胞（10代后）经 处理后的继续培养，得到细胞系，能无限传代。细胞系的细胞已经发生 ，基本上具有癌细胞的特性。（二）动物细胞培养的条件1、动物细胞培养液的成分： 、 、 、 、 、 属于 培养基。2、动物细胞培养的条件有： ：对 和 进行无菌处理，还可在培养液中添加一定量的 。此外，应定期 。 ：合成培养基中有 、 、 、 、 等，通常需加入 和 。 ：适宜温度为 ，适宜pH为 。 ：主要是 和 。【合作解疑】1、原代培养和传代培养如何界定？2、细胞株和细胞系如何界定？3、幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？思考一下，这是什么道理？4、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？5、动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？6、为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？二.动物体细胞核移植和克隆动物【自学探究】1、动物核移植将动物的一个细胞的 ，移入一个已经 的卵母细胞中，使其 并发育成一个 ，这个胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。可分为 和 。2、克隆的条件：具有包含物种 的活细胞；能有效调控细胞核发育的 ；完成 的必要的环境条件。3、体细胞核移植的过程：、供体体细胞经细胞培养后，提取 ；、收集卵巢采集 ，培养至减数分裂第二次分裂中期除去 ，制成无核细胞质；、将 与 融合，并培养成 ；、将 移植到代孕母体子宫内，发育成新个体。4、细胞核移植技术的意义及前景：克隆动物不仅可以作为生物学和医学研究的实验动物，而且对于改良动物品种获得更优秀动物个体用于生产、治疗人类疾病、保护濒危动物等，都有重要的应用价值。动物体细胞核移植可用于加速家畜 进程，促进 繁育；保护 ；生产 ；作为异种移植的 ；用于组织器官的 。5、体细胞核移植技术存在的问题：克隆动物存在 、 、 等问题。【合作解疑】1、阅读教材47页相关文字，回答：对动物来说，为什么不能用类似植物组织培养的方法获得完整的个体？2、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？3、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？4、你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？【拓展运用】试比较植物组织培养和动物细胞培养项目主要原理培养基结果培养目的植物组织培养动物细胞培养【巩固练习】1下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是 （ ） A培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C动物细胞培养一般能够传到4050代，但其遗传物质发生了改变 D动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞2一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能（ ） A有选择地繁殖某一性别的家畜 B繁殖家畜中的优秀个体 C用于保存物种 D改变动物的基因型3下列哪项属于克隆 （ ） A将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞 D将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系4有关全能性的叙述，不正确的是 （ ） A受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高 B生物体内细胞由于分化全能性不能表达 C卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高 D植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性5下列属于组织培养但不是克隆的是 （ ）A将花粉离体培养成单倍体植株 B芽发育成枝条 C根尖分生区发育成成熟区 D上皮细胞无性繁殖产生的细胞群6动物细胞培养液和植物组织培养液的共有成分是 （ ）A葡萄糖 B蔗糖 C动物血清 D维生素7动物细胞培养的细胞来自于 （ ）A任何个体的细胞 B只能取自动物胚胎细胞C只能取自幼龄动物的组织细胞 D胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞8动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是 （）A.动物细胞培养B动物细胞融合 C单克隆抗体 D胚胎、核移植9细胞株的特点是 （）A遗传物质没有改变，可以无限传代B遗传物质发生改变，不可无限传代C遗传物质没有改变，不可无限传代D遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代10关于杂交瘤细胞的不正确叙述是 （）A有双亲细胞的遗传物质B不能无限增殖C.可分泌特异性抗体 D体外培养条件下可大量增殖11.动物细胞融合技术最重要的用途是 （）A.克服远源杂交不亲和B.制各单克隆抗体C.培育新品种D.生产杂种细胞12.在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为:A原代培养 B传代培养 C细胞株 D细胞系13.如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（ ） A、乳腺细胞的 B、卵细胞的 C、胃腺细胞的 D、囊胚时期的胚胎细胞的14一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能（ ）A