（药剂学专业论文）ca自微乳的研制.pdf

t 、r 、 0 ， i ) i l _ r 。 目录 中文摘要1 英文摘要4 研究论文c a 自微乳的研制 引言8 第一部分c a 自微乳的制备 前言9 9刖吾 材料和方法9 结果”1 3 附图1 7 附表2 0 讨论2 3 小结2 4 参考文献2 4 第二部分c a 自微乳的质量评价 前言2 5刖舌一2 5 材料和方法2 5 结果”3 0 附图3 4 附表4 l 讨 念4 7 小结4 8 参考文献4 8 第三部分c a 自微乳在家犬体内的药代动力学研究 前言4 9日u 蟊“ 材料和方法4 9 结果5 2 附图5 6 附表6 2 讨论6 8 小结6 8 参考文献6 9 结论_ 7 0 综述7 1 致谢8 2 个人简历8 3 中文摘要 c a 自微乳的研制 摘要 c a 是由藤泽制药公司于1 9 8 2 年提取的一种真菌代谢产物。适用于防 治器官移植后的排斥反应，其临床疗效是环孢素( c s a ) 的1 0 - 1 0 0 倍。 c a 自1 9 8 9 年试用于临床以来，取得了良好的评价。现已作为预防、治疗 排斥反应以及自身免疫性肝炎的一线药物。目前国内市场主要为进口的 c a 固体分散体胶囊，价格昂贵。由于c a 在水中几乎不溶，溶解度仅为2 3 “g m l ，并且c a 很不稳定，因此本研究选择了制各一种能增大c a 溶解度， 提高其稳定性的制剂。 自微乳药物传递系统( s e l f - m i c r o e m u l s i f y i n gd r u gd e l i v e r ys y s t e m ， s m e d d s ) 由油相、乳化剂和助乳化剂组成，口服后在胃肠蠕动下自发分 散形成微乳，s m e d d s 可作为水难溶性药物的载体，可提高药物的溶出度 和渗透率，能增加药物的口服生物利用度，近年来受到药学领域的瞩目。 结合c a 的理化性质和s m e d d s 在提高难溶性药物生物利用度方面的优 势，本课题选择了制备c a 自微乳，并对其稳定性和生物利用度进行了研 究。目前国内外还未有c a 自微乳剂型上市，因此c a 自微乳的研究具有现 实意义。 目的：选择合适的乳化剂、助乳化剂、油相、稳定剂，制备c a 自微 乳。建立c a 自微乳体内、外分析方法，对c a 自微乳进行质量评价，并对 c a 自微乳的稳定性和生物利用度进行考察。 方法： 1c a 自微乳的制备：首先对空白自微乳的基本处方进行了筛选并确 定了空白处方的组成。然后对稳定剂进行了筛选，选择稳定剂a 作为c a 自微乳的稳定剂，选择b h t 作为抗氧剂。在处方优化过程中，确定了处方 的含药量，对处方中的乳化剂、助乳化剂、油相以及稳定剂的用量进行了 优化。按优化后的处方制备稳定性较高的c a 自微乳，并压制c a 自微乳软 胶囊，用于溶出度测定和动物试验。 2c a 白微乳的质量评价：建立c a 自微乳含量和溶出度测定的h p l c 方法。对c a 自微乳的外观、粘度和稀释后微乳的粒径、z e t a 电位进行考 中文摘要 察。按最佳处方制备c a 自微乳，分别进行高温试验、强光照射试验、加 速试验和长期稳定性试验，对其稳定性进行考察。 3c a 自微乳的药代动力学研究：以健康雄性家犬为试验动物，考察 c a 自微乳软胶囊的药代动力学，并与参比制剂进行了比较。采用单剂量 方式口服给药( o 5 m g k g ) ，定时股静脉取血，用液相色谱一串联质谱法 测定血药浓度。采用3 p 8 7 程序对血药浓度数据进行处理，对比两制剂在家 犬体内的生物利用度。 结果： 1 从稳定性、稀释后粒径、溶出度、生物利用度等方面综合考虑，最 终确定了c a 自微乳的最佳处方为： c a 0 5 9 聚氧乙烯氢化蓖麻油( r h 4 0 ) 4 0 9 1 ，2 一丙二醇1 5 9 小分子酯(cp)449 稳定剂a 1 0 9 b h t 0 0 5 9 2 玎? l c 测定c a 自微乳含量的标准曲线方程为： a = i 6 2 2 5 x 1 0 4 x 一9 9 3 3 2 1 0 3 ，( f o 9 9 9 9 ，n = 7 ) 溶剂选用5 0 的乙腈一水溶液，此时c a 异构体i i 的转化比例为4 9 3 。 方法平均回收率为9 9 8 9 ，低、中、高3 种浓度样品的日内测定结果的相 对标准偏差( r s d ) 分别为1 4 3 、1 5 7 、0 5 8 ( n = 6 ) ；中浓度样品日 间测定结果的r s d 为1 3 2 ( n 芦6 ) ，均符合中国药典规定。 3 玎? l c 测定c a 自微乳软胶囊溶出度的标准曲线方程为： a = 7 2 5 3 x1 0 4 x - - 8 9 9 6 1 0 3 ，( 闻9 9 9 9 ，n = 7 ) 溶出度测定方法按中国药典2 0 0 5 年版附录x c 第三法，溶出介质为纯 水1 0 0 m l ，水温为3 7 4 - 0 5 ，转速为1 0 0 r m i n 。低、中、高三种浓度样品的 回收率分别为9 9 1 4 、9 9 5 1 、9 9 5 9 ，连续测定浓度为0 0 1 m g m l 的同 一样品6 次，峰面积的r s d 值为1 4 3 ，符合中国药典规定。 4c a 自微乳的质量评价及稳定性研究 按最佳处方制备的c a 自微乳为无色透明均一的液体，2 5 时，粘度 为4 6 0 m p a s ；c a 自微乳用重蒸水稀释2 0 0 倍后，形成微乳的粒径约为 2 中文摘要 1 7 n m ，z e t a 电位为- 2 1 3 m v ( 2 5 。c ) 。高温试验结果表明c a 自微乳在6 0 士2 下放置l o 天，样品外观、粘度、粒径无明显变化，但含量约降低了5 ， 有关物质增长了0 4 1 ；强光照射试验发现，c a 自微乳对4 5 0 0 4 - 5 0 0 1 x 的强 光敏感，放置1 0 天后有关物质略有增加；加速试验显示c a 自微乳在 4 0 4 - 2 ，相对湿度7 5 4 - 5 条件下加速6 个月，三批样品的外观、粘度、粒 径均无明显变化，含量约降低了3 ，有关物质在2 以内；长期稳定性考 察显示9 个月后三批样品有关物质分别为0 2 9 、0 2 7 、0 2 4 ，含量降 低值在1 以内，结果表明在2 5 4 - 2 条件下，c a 自微乳的稳定性较高。 5 采用3 p 8 7 程序对血药浓度数据进行处理，结果表明最佳拟合模型为 二级模型一级吸收，权重因子为1 c 2 。c a 自微乳软胶囊和参比制剂的药物 动力学参数分别为：t u 2 ( a ) - 1 3 7h ，2 3 9h ；t z 2 ( 1 3 ) - 1 3 1 3h ，1 9 5 4h ； t ( p e a k ) ：o 7 9h ，2 9 2h ；c ( m a x ) - 3 6 2 1n g m l ，l1 4 9n g m l ；a u c - 2 3 8 2 9 ( n g m 1 ) 水h ，17 4 4 7 ( n g r n l ) 木h 。 结论：按最优化处方制备的c a 自微乳，物理和化学稳定性均较高， 2 5 4 - 2 条件下放置9 个月，c a 自微乳外观、粘度、粒径及z e t a 电位均无变 化，含量降低值小于1 ，有关物质在0 3 以内。c a 自微乳的生物利用度 高于参比制剂。本研究显著提高了c a 在自微乳基质中的稳定性，在开发 c a 自微乳剂型方面取得了突破性进展。 关键词：免疫抑制剂；自微乳药物传递系统；表面活性剂；高效液相 色谱法；液相色谱一串联质谱法；药物代谢动力学；生物利用度 3 英文摘要 p r e p a r a t i o na n ds t u d yo fc as m e d d s a b s t r a c t c aw a se x t r a c t e df r o mm e t a b o l i t e so ff u n g u sb yf u ji s a w ap h a r m a c e u t i c a lc o 1 t di n19 8 2 c ah a sb e e na p p l i e dt op r e v e n ta n dc u r eo fr e j e c t i o n a f t e ro r g a nt r a n s p l a n t a t i o na n di t sc l i n i c a le f f i c a c yi sb e t t e rt h a nc y c l o s p o r i n e ( 10 10 0f o l d s ) c ah a sb e e ng i v e nag o o de v a l u a t i o ns i n c ei tw a su s e di n c l i n i c a li n19 8 9 n o w , c ah a sb e e nu s e da saf i r s t - l i n ed r u gt op r e v e n to rt r e a t r e j e c t i o na n da u t o i m m u n eh e p a t i t i s i nt h ed o m e s t i cm a r k e tt h e r ea r em a i n l y i m p o r t e dc a s o l i dd i s p e r s i o nc a p s u l e sw h i c ha r ev e r ye x p e n s i v e d u et oi t s a l m o s ti n s o l u b l ep r o p e r t y ( 2 - 31 x g m 1 ) a n di n s t a b i l i t yi nw a t e r ，t h ea i mo ft h e s t u d yi st op r e p a r eaf o r m u l a t i o no fc a t oi n c r e a s ei t ss o l u b i l i t ya n de n h a n c e i t ss t a b i l i t y s e l f - m i c r o e m u s i f y i n gd r u gd e l i v e r ys y s t e m ( s m e d d s ) i sm a i n l yc o m 。 p o s e do fo i l ，s u r f a c t a n t a n dc o s u r f a c t a n t s m e d d sh a sr e c e i v e d g r e a t a t t e n t i o n sr e c e n t l yf o ri t sp o t e n t i a lu s ea st h ed r u gd e l i v e r ys y s t e mf o rp o o r l y w a t e rs o l u b l ed r u gt oi m p r o v ei t sb i o a v a i l a b i l i t y a f t e ro r a l l ya d m i n i s t e r e d ，t h e s m e d d sh a st h ea b i l i t yo ff o r m i n gm i c r o e m u l s i o nf o l l o w i n gd i l u t i o nb y a q u e o u sp h a s ei ns t o m a c hw i t hg e n t l ep e r i s t a l s i s f o rc o m b i n i n gp r o p e r t i e so f c aw i t ha d v a n t a g e so fs m e d d si n i m p r o v i n gs o l u b i l i t yo fp o o r l yw a t e r s o l u b l ed r u g s ，t h i ss t u d yc h o s et o p r e p a r ec as m e d d sa n ds t u d i e di t s s t a b i l i t ya n db i o a v a i l a b i l i t y y e tt h e r ea r en o tc as m e d d sa p p e a r i n go nt h e m a r k e ta th o m ea n da b r o a d ，t h er e s e a r c ho fc as m e d d sh a sp r a c t i c a l s i g n i f i c a n c e o b j e c t i v e ：s e l e c ta p p r o p r i a t es u r f a c t a n t ，c o s u r f a c t a n t ，o i la n ds t a b i l i z e r t op r e p a r ec as m e d d s v i t r oa n dv i v oa n a l y s i sm e t h o d so fc as m e d d s w e r ee s t a b l i s h e d ；e v a l u a t et h eq u a l i t yo fc a s m e d d s ；s t u d yt h es t a b i l i t y a n db i o a v a i l a b i l i t yo fc as m e d d s m e t h o d s ： 1 p r e p a r a t i o no fc as m e d d s ：f i r s t l y , s e l e c ta n di d e n t i f yt h em a i n l y 4 英文摘要 c o m p o n e n t so f b l a n ks m 匣d d s t h e nc h o o s es t a b i l i z e r aw h i c hc o u l dg r e a t l y e n h a n c et h es t a b i l i t yo fc ai ns 匝d d sa st h es t a b i l i z e ro fc ：as 匝d d s b h tw a sc h o s e na sa n t i o x i d a n to fc as m e d d s i nt h eo p t i m i z a t i o np r o c e s s o fc as 匝d d sf o r m u l a t i o n ，t h ec o n t e n to fc ai nf o r m u l a t i o nw a s i d e n t i f i e d i no r d e rt og r e a t l yi m p r o v et h es t a b i l i t yo fc ai ns m e d d s ， c o n t e n t so fs u r f a c t a n t ，c o s u r f a c t a n t ，o i la n ds t a b i l i z e ri nf o r m u l a t i o nw e r e a l s oo p t i m i z e d a c c o r d i n gt ot h eo p t i m i z e dp r e s c r i p t i o no fc as m e d d s ， s t r o n gs t a b i l i t ys a m p l e sw e r em a d ea n ds o rc a p s u l e so fc as m e d d s w e r e p r e p a r e df o rd i s s o l u t i o n t e s ta n da n i m a le x p e r i m e n t s 2q u a l i t ye v a l u a t i o no fc as 匝d d s ：t h eh p l cm e t h o d sw e r e e s t a b l i s h e dt od e t e r m i n et h ec o n t e n ta n dd i s s o l u t i o nr a t eo fc as m e d d s s t u d yt h ea p p e a r a n c ea n dv i s c o s i t yo fc as m e d d s ；s t u d yp a r t i c l es i z ea n d z e t ap o t e n t i a lo fc am i c r o e m u l s i o n a c c o r d i n gt ot h eb e s tp r e s c r i p t i o n ， p r e p a r ec a s m e d d s t h e nc a r r yo u th i g ht e m p e r a t u r et e s t ，s t r o n gl i g h tt e s t ， a c c e l e r a t i v et e s ta n dl o n g t e r mt e s tt os t u d yt h es t a b i l i t yo fc as m 匣d d s 3p h a r m a c o k i n e t i cs t u d i e so fc as m e d d s ：u s eh e a l t hm a l ed o g sa s e x p e r i m e n t a la n i m a l s r e f e r e n c ep r e p a r a t i o nw a su s e da ss t a n d a r dt oe s t i m a t e t h ep h a r m a c o k i n e t i c so fc as m e d d ss o f tc a p s u l e s a f t e ro r a l l ya d m i n i s t e r e d s i n g l e d o s eo fc as m e d d ss o f t c a p s u l e sa n dr e f e r e n c ep r e p a r a t i o n ( o 5 m g k g ) t od o g s ，b l o o ds a m p l e s w e r ec o l l e c t e df r o mt h ev e i na t p r e d e t e r m i n e dt i m e i n t e r v a l s t h ec o n t e n to fc ai nw h o l eb l o o dw a s d e t e r m i n e db vh p l c m s m sm e t h o d t h ep h a r m a c o k i n e t i c sp a r a m e t e r sw e r e e s t i m a t e db y3 p 8 7p r o g r a m 1 1 1 eb i o a v a i l a b i l i t yw a sc o n t r a s t e db e t w e e nc a s m e d d sa n dr e f e r e n c ep r e p a r a t i o n r e s u l t s ： lc o n s i d e r i n gt h es t a b i l i t y , p a r t i c l es i z e ( d i l u t e d2 0 0f o l d sb yw a t e r ) ， d i s s o l u t i o na n db i o a v a i l a b i l i t y , t h eb e s tf o r m u l a t i o no fc as m e d d sw a s ： c a c r e m o p h o r r h 4 0 1 , 2 p r o p y l e n eg l y c o l m i c r o m o l e c u l ee s t e r ( c p ) o 5 9 4 0 9 15 9 4 4 9 5 英文摘要 s t a b i l i z e ra 1 o g b h t 0 0 5 9 一 21 1 1 es t a n d a r dc u r v eo fh p l cf o ra s s a yo fc as m e d d sw a s ： a = i 6 2 2 5 x 1 0 4 x - - 9 9 3 3 2 x 1 0 3 ，昨o 9 9 9 9 ，n = 7 ) s e l e c t5 0 a c e t o n i t r i l e w a t e rs o l u t i o na ss o l v e n ti nw h i c ht h ec o n v e r s i o n r a t i oo fc ai s o m e r1 1w a s4 9 3 t h ea v e r a g ev a l u eo fr e l a t i v er e c o v e r yw a s 9 9 8 9 ，i n t r a - d a yp r e c i s i o nw e r e1 4 3 ，1 5 7 ，o 5 8 ( n = 6 ) ，i n t e r - d a y p r e c i s i o nw a s1 3 2 ( n = 6 ) ，c o n s i s t e n tw i t ht h er e g u l a t i o no fc h p 3t h es t a n d a r dc u r v eo fh p l cf o rd e t e r m i n i n gt h ed i s s o l u t i o nr a t eo fc a s 匝d d ss o f tc a p s u l ew a s ： a = 7 2 5 3 1 0 4 x - - 8 9 9 6 x1 0 3 ，( 闻9 9 9 9 ，n - 7 ) u s et h et h i r dm e t h o do fc h p ( 2 0 0 s ) a p p e n d i xx ca s t h em e t h o do f d e t e r m i n a t i o nd i s s o l u t i o nr a t eo fc as m e d d ss o f tc a p s u l e t h ed i s s o l u t i o n t e s tu s e dw a t e rw i t h37 + 0 5 a sm e d i u ma n dt h es p e e do fd i s s o l u t i o nt e s t e r w a s1 0 0 r m i n t h er e l a t i v er e c o v e r i e sw e r e9 9 1 4 ，9 9 5 1 ，9 9 5 9 t h e i n t r a d a yp r e c i s i o no ft h es a m p l e ( o 0 1 m g m 1 ) w a s1 4 3 ( n = 6 ) ，c o n s i s t e n t w i t ht h er e g u l a t i o no fc h p 4t h e q u a l i t ye v a l u a t i o na n ds t a b i l i t ys t u d yo fc as m e d d s a tt e m p e r a t u r eo f2 5 ，t h ec as m e d d s p r e p a r e da c c o r d i n gt ot h eb e s t p r e s c r i p t i o nw a sc o l o r l e s sa n du n i f o r ml i q u i da n d i t sv i s c o s i t yw a s4 6 0m p a s a f t e rd i l u t e d2 0 0 一f o l d sb yd o u b l ed i s t i l l e dw a t e r , t h ep a r t i c l es i z eo ft h ec a m i c r o e m u l s i o nw a sa b o u t17 n ma n dt h ez e t ap o t e n t i a lw a s 2 1 3 m v ( 2 5 1 h i 曲- t e m p e r a t u r et e s ti n d i c a t e dt h a tc as m e d d sh a dn os i g n i f i c a n tc h a n g e i n a p p e a r a n c e ，v i s c o s i t ya n dp a r t i c l es i z ea t6 0 - 士2 f o r 10d a y s ，b u tt h e c o n t e n to fc ad e c r e a s e db ym o r et h a n5 ，r e l a t e ds u b s t a n c ei n c r e a s e db y o 4l s t r o n gl i g h tt e s tf o r10d a y ss h o w e dt h a tt h es a m p l e sw e r es e n s i t i v et o l i g h to f4 5 0 0 - j ：5 0 0 1 x ，t h er e l a t e ds u b s t a n c e si n c r e a s e ds l i g h t l y n l ea c c e l e r a t e d t e s ti n d i c a t e dt h et h r e eb a t h e so fs a m p l e sh a dn os i g n i f i c a n t c h a n g e si n a p p e a r a n c e ，v i s c o s i t ya n dp a r t i c l es i z ea t4 0 士2 c ，7 5 土5 r e l a t i v eh u m i d i t yf o r 6m o n t h s ，t h ec o n t e n td e c r e a s e db ya b o u t3 ，t h ec o n t e n to fr e l a t e ds u b s t a n c e w a sc o n t r o l l e di n2 r e s u l t so fl o n g - t e r mt e s tf o r9m o n t h ss h o w e dt h a tt h e 6 英文摘要 r e l a t e ds u b s t a n c e so ft h et h r e eb a t h e so fs a m p l e sw e r e0 2 9 ，0 2 7 ，0 2 4 ， t h ec o n t e n to fc ad e c r e a s e db yl e s st h a n1 r e s u l t so fl o n g t e r mt e s t i n d i c a t e dt h a tc as m e d d sh a dh i g h e rs t a b i l i t ya t2 5 士2 5t h ep h a r m a c o k i n e t i c sp a r a m e t e r sw e r ee s t i m a t e db y3 p 8 7p r o g r a m t h ec o n c e n t r a t i o n - t i m ec u r v e sc o u l db ef i t t e dt oat w o c o m p a r t m e n tm o d e l w i t hf i r s to r d e ra n dw e i g h tf a c t o r = l c 2f o rb o t hc as m 匣d d ss o f tc a p s u l e s a n dr e f e r e n c ep r e p a r a t i o n t h em a i np h a r m a c o k i n e t i c sp a r a m e t e r so fc a s m e d d ss o rc a p s u l e sa n dr e f e r e n c ep r e p a r a t i o nw e r eh 2 ( c t ) ：1 3 7 h ，2 3 9 h ； t l 2 ( p ) ：1 3 1 3 h ，1 9 5 4 h ；t ( p e a k ) ：o 7 9 h ，2 9 2 h ；c ( m a x ) ：3 6 2 1 n g m l ，1 1 4 9n g m l ；a u c ：2 3 8 2 9 ( n g m 1 ) 木h ，17 4 4 7 ( n g m 1 ) 凇h c o n c l u s i o n ：t h ec as m e d d sp r e p a r e d a c c o r d i n gt ot h eb e s t f o r m u l a t i o nh a dh i g h e rp h y s i c a la n dc h e m i c a ls t a b i l i t y a tt h et e m p e r a t u r eo f 2 5 士2 f o r9m o n t h s ，t h ea p p e a r a n c e ，v i s c o s i t y , p a r t i c l es i z ea n dz e t ao ft h e s a m p l e sh a dn os i g n i f i c a n tc h a n g e s ，t h ec o n t e n to fc a d e c r e a s e db yl e s st h a n l a n dt h er e l a t e ds u b s t a n c ew a sc o n t r o l l e di n0 3 c as m e d d sh a d h i g h e rb i o a v a i l a b i l i t yt h a nr e f e r e n c ep r e p a r a t i o n t h i ss t u d ys i g n i f i c a n t l y i m p r o v e dt h es t a b i l i t yo fc a i ns m e d d sa n dm a d eab r e a k t h r o u g hi nt h e d e v e l o p m e n to fc a s m e d d s k e yw o r d s ：i m m u n o s u p p r e s s i v ea g e n t ；s m e d d s ；s u r f a c t a n t ；h p l c ； h p l c m s m s ；p h a r m a c o k i n e t i c ；b i o a v a i l a b i l i t y 7 研究论文 c a 自微乳的研制 引言 c a 是由日本藤泽制药公司于1 9 8 2 年从链霉菌培养基中提取的一种代 谢产物。c a 对t 细胞具有选择性的抑制作用，适用于防治器官移植后的排 斥反应，其临床疗效比环孢素a ( c s a ) 高1 0 1 0 0 倍。与c s a 相比，c a 具有免疫抑制作用强、不良反应少、有效剂量小、治疗费用低等优点。 c a 正在取代c s a 成为器官移植术后首选的免疫抑制剂。但c a 在水中的溶 解度小，口服应用生物利用度低。如何提高c a 的溶解度，从而提高c a 的 生物利用度，成为制备c a 口服制剂首要解决的问题。 自微乳药物传递系统( s m e d d s ) 是目前研究广泛的一种能够显著提 高难溶性药物溶解度的药物传递系统。利用微乳或自微乳化技术可将某些 在水中溶解度差、吸收差的药物制成口服液体或固体胶囊制剂，既可以提 高药物的生物利用度和稳定性，又拓宽了药物的使用人群( 如儿童、难以 吞咽的患者等) ，而且易于工业化生产，s m e d d s 是一种理想的给药剂型。 因此本课题选择了制备c a 的自微乳剂型，并对制备的c a 自微乳的稳 定性和生物利用度进行了考察。目的是制备一种稳定性好，生物利用度高 的c a 口服自微乳。 8 研究论文 c a 自微乳的制备 4 叁， 网置 1 9 4 3 年，h o a r 提出了微乳( m i c r o e m u l s i o n ) 的概念。1 9 7 0 年以来， 微乳作为药物载体的研究日益受到人们的关注，随着对微乳的微观结构、 形成理论和结构性质等研究的不断深入，出现了新型给药系统一自微乳药 物传递系统( s e l f - m i e r o e m u l s i f y i n gd r u gd e l i v e r ys y s t e m ，s m e d d s ) l i j 。空 白自微乳主要由乳化剂、助乳化剂、油相三部分组成，在处方筛选过程中 首先确定了基本处方，然后对处方进行了优化。经初步稳定性考察发现 c a 在自微乳中稳定性较差，某些辅料在处方中的应用会降t k c a 的稳定 性。如何选择合适的辅料和稳定剂来提高c a 自微乳的稳定性是本课题的 难点，因此在筛选处方时将能否提高c a 的稳定性做为筛选处方的一个重 要标准，同时兼顾了自微乳的物理稳定性( z e t a 电位、粒径分布等) 。 l 仪器与试药 1 1 仪器 d u 6 4 0 型紫外可见分光光度计 高效液相色谱仪 色谱工作站 检测器 9 0 p l u sp a r t i c l ea n a l y z e r n d j - 7 型旋转式粘度计 z e t a s i z e r3 0 0 0 h s y b - i 型澄明度检测仪 3 913 型恒温恒湿加速试验箱 1 万电子分析天平 1 1 0 万电子分析天平 多头磁力搅拌器 材料与方法 b e c k m a n 腑f e r s 2 4 8 7 m i l l e n n i u m 3 2 舫f o r s2 4 8 7 美国布鲁克海文 上海天平仪器厂 m a l v e mi n s t r u m e n t sl t d 天津大学精密仪器厂制造 f o r m as c i e n t i f i c 上海精科 s a a o f i u s 常州国华电器有限公司 9 研究论文 z k - 8 2 型电热真空干燥箱 k q - 2 5 0 b 型超声波清洗器 量筒 1 2 药品与试剂 c a 原料药 乙腈( 色谱纯) 磷酸( 分析纯) 四氢呋喃( 色谱纯) c r e m o p h o r r h 4 0 c r e m o p h o r e l 3 5 s o l u t o l h s15 t w e e n 8 0 1 ，2 一丙二醇 小分子酯( c p ) 肉豆蔻酸异丙酯( i p m ) 中碳链脂肪酸三甘油酯( 1 3 4 9 ) 2 ，6 一二叔丁基对甲酚( b h t ) 丁基羟基茴香醚( b h a ) 没食子酸丙酯 其它试剂均为化学纯 2 处方筛选 上海市实验仪器总厂 昆山市超声仪器有限公司 b o m 匣x 华北制药集团 美国d i k m a 公司- q l、p h h 石家庄化工厂 上海星可生化有限公司 b a s f 公司 b a s f 公司 北京凤礼精求商贸有限责任公司 北京凤礼精求商贸有限责任公司 天津市永大化学试剂开发中心 泰山化工厂 上海沪峰生物科技有限公司 北京凤礼精求商贸有限责任公司 上海和氏璧化工有限公司 上海和氏璧化工有限公司 竹山天新公司 此部分主要从空白自微乳处方的确定、稳定剂的选择和处方的优化三 个方面对c a 自微乳的制备进行了论述。 2 1 空白自微乳基本处方的确定 2 1 1 乳化剂的确定 经查阅文献和处方前研究1 2 4 1 ，初步筛选出几个h l b 值较高的非离子 型表面活性剂t w e e n 8 0 ，c r e m o p h o r e l 3 5 ，s o l u t o l h s 15 ，c r e m o p h o r r h 4 0 为空白自微乳的乳化剂，并分别从毒性、乳化能力、对c a 检测是否有影 响三方面对乳化剂进行了筛选。 2 1 2 助乳化剂的选择 助乳化剂可以和乳化剂形成复合界面膜，降低界面张力及电荷斥力， 1 0 研究论文 增加界面柔顺性，促进微乳形成并增加稳定性1 5 1 。分别选用低分子量的醇 类，包括乙醇、异丙醇、l ，2 一丙二醇、正丁醇等；短链的脂类，如乙酸乙 酯；醚类，如- - z , - - 醇单乙醚等作为助乳化剂。从所选助乳化剂的挥发性、 助乳化性、毒性以及来源等方面对助乳化剂进行了筛选。 2 1 3 油相的选择 分别以r h 4 0 为乳化剂，1 ，2 一丙二醇为助乳化剂，两者按3 ：1 的比例 ( k m = 3 ) 混合后，与不同的油相( 载油量为3 0 ) 制成自微乳，用新制 备的双蒸水稀释一定倍数后测其粒径，根据形成微乳的难易对油相进行初 步筛选。 2 1 3 1 三元相图的绘制 乳化剂、助乳化剂、油相三者并不能任意比例混溶，只有当三者比例 在一定范围内时才能形成均一透明的溶液，制备的自微乳才具有较高的物 理稳定性。本部分试验分别以乳化剂、助乳化剂、油相为三顶点绘制了三 元相图，对处方筛选具有指导意义。 绘制三元相图时样品制备过程如下，按油相：助乳化齐t j = 2 0 ：0 ，1 8 ：0 2 ，1 6 ：0 4 ，1 4 ：0 6 ，1 2 ：0 8 ，1 0 ：1 0 ，0 8 ：1 2 ，0 6 ：1 4 ，0 4 ：1 6 ，0 2 ：1 8 ，0 ：2 0 的比例制备油相、助乳化剂混合液2 o g ，分别向 此混合液中滴