微生物营养与培养基.doc

微生物细胞吸收 O2、CO2、乙醇和少数氨基酸分子，通常采用的运输方式是单纯扩散生活在低营养环境下的微生物欲获得无机离子、有机离子和一些糖类等浓缩形式的营养物，通常采用的运输方式是主动运输微生物细胞吸收外界营养物质的促进扩散需要特异性载体蛋白参与，靠细胞内外营养物的浓度差来躯动微生物细胞吸收糖、核苷酸、脂肪酸和腺嘌呤等物质，通常采用的运输方式是基团移位在鉴别性EMB培养基上，在反射光下大肠杆菌菌落呈现的颜色是绿色并带有金属光泽根据培养基上呈现菌落颜色的不同而能鉴别大肠杆菌和肠杆菌属几种细菌的培养基是EMB培养基参与微生物基团移位运输方式的体系是Hpr+酶+酶为避免由于微生物生长繁殖过程中的产物而造成培养基pH值的变化，可采用的调节方法是在配制培养基时加入磷酸盐缓冲液或不溶性CaCO3培养放线菌的高氏一号培养基和培养真菌的察氏培养基属于组合培养基化能异养，化能自养，光能自养，光能异养许多微生物及其营养缺陷型在其生长过程中必须外源提供不同的嘌呤碱基和嘧啶碱基，才能正常生长繁殖在实验中培养化能异养型细菌时，通常以牛肉膏（或葡萄糖）为碳源，蛋白胨为氮源、酵母膏为生长因子，以无机盐提供矿质元素在工业生产中培养化能异养型细菌时，通常以淀粉为碳源，豆饼粉当氮源，玉米浆为生长因子；以无机盐提供矿质元素（NH4）2SO4，KNO3，NH4HPO4，NH4OH；等无机的含氮化合物是工业发酵中常用的氮源物质Fe2+、S、NH3和NO2等无机物可作为化能自养菌的能源微量的维生素，碱基（嘌呤、嘧啶也可），卟啉及其衍生物，甾醇，胺类，C4C6脂肪酸，氨基酸，Vk（或氯高铁血红素）是一些异养微生物生长所必需的生长因子蓝细菌、紫硫细菌、绿硫细菌以及藻类等微生物均属于光能无机营养类型借助于微生物细胞膜上底物特异性载体蛋白质参与的促进扩散，其运送营养物质的机制在于载体蛋白具有酶的性质，通过其构象的改变，不需要提供能量，将外界高浓度的营养物质分子加速扩散到细胞内参与微生物细胞基团移位运输方式的酶是一种结合于细胞膜上的蛋白，对底物具有特异性选择作用，是一种诱导酶通过培养基中某些化学物质的化学变化来调节培养基的pH值称为pH的内源调节在微生物的连续生长过程中向培养基中不断流加酸液或碱液，以稳定培养基的pH值，称为pH的外源调节利用纯化学试剂配制的培养基称为组合培养基，或称为合成（或综合）培养基既含有天然成分，又含有纯化学试剂成分的培养基称为半组合培养基固体培养基是由在液体培养基中加入12的琼脂或者512的明胶等凝固剂而制成的于液体培养基中加入0.5的琼脂可制成半固体培养基。在细菌鉴定中常用于细菌的动力的观察微生物可利用的氮源谱是N、C、H、O、X元素型、N、C、H、O元素型、N、H或N、O元素型和N元素型利用无机碳源的化能自养型微生物，其碳源为CO2，NaHCO3或CaCO3培养基设计、选用和配制的4个原则是目的明确，营养协调，物理化学条件适宜，经济节约水活度的含义是表示在天然环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量在选择性培养基中，如加入某种特殊营养物质，从而使专门利用这种特殊营养物质的微生物大量增殖，则这种培养基又称加富培养基生长因子中的泛酸参与微生物体内糖和脂肪酸的合成Na+对微生物的生理功能在于维持菌体的渗透压；而K+可作为微生物体内酶的辅因子，维持电位差和渗透压，Mg2+除了参与微生物体内的蛋白质合成外，还可以作为酶的激活剂若以取食方式来划分微生物的营养类型，可分为渗透营养型和吞噬营养型两大类在基团移位运输方式中，通过细胞内磷酸烯醇式丙酮酸这一高能化合物的磷酸基团将Hpr蛋白激活。基团移位运输方式中的磷酸转移酶系统包括热稳定载体蛋白，酶，酶；其供能物质为磷酸烯醇式丙酮酸以甘露醇为唯一碳源，不加氮源的培养基可用于富集自生固氮菌EMB培养基中含有乳糖和伊红、美蓝两种染料亚硝化细菌硝化细菌硫化细菌硫磺细菌氢细菌能源H2SSH2碳源CO2或碳酸盐CO2或碳酸盐CO2或碳酸盐CO2或碳酸盐CO2或碳酸盐所谓非可逆性凝固培养基系指由血清凝固制成，或者用无机硅胶配成的当凝固后就不能再融化的固体培养基水在微生物细胞中的生理功能是：优良的溶剂，维持生物大分子结构的稳定，参与某些重要的生化反应以及作为某些生化反应的最终产物由于水具有高比热、高汽化热、高沸点和固态水的密度小于液态水4种重要的物理特性，因此对微生物的生命活动十分重要某些石油微生物可利用烃类化合物作为碳源，并产生氨基酸、有机酸、核苷酸、单细胞蛋白、多糖和维生素等产物大肠杆菌产气肠杆菌普通变形杆菌金黄色葡萄球菌乳糖发酵发酵发酵不发酵产酸产酸力强产酸力弱不产酸受抑制菌落颜色深紫色具金属光泽闪光棕色无色透明凡是能够为微生物的生命活动提供结构物质、能量、代谢调节物质和良好生理环境的物质，均称为微生物的营养物紫硫细菌、绿硫细菌、硝化细菌、硫化细菌和氢细菌生长所需要的碳源物是CO2或碳酸盐一些肠道细菌除必须供给有机碳源外，尚需要少量CO2才能正常生长微生物的培养基常常是一个具有多对氧化还原偶的复杂电化学系统，在各对氧化还原偶中，对微生物生长繁殖影响最大的是分子氧和分子氢的浓度渗透压：在用半透膜所分隔的两溶液系统中由浓溶液中的溶质所产生的机械压力称为渗透压营养物：具有营养功能的物质。除具体的营养物质外，尚包括光能微生物所需要的非物质形式的能源。微生物的营养物可为它们正常生命活动提供结构物质、能量、代谢调节物质和良好的生理环境热稳载体蛋白：参与基团移位运输，结合在微生物细胞质膜上，具有高能磷酸载体作用的一种低分子量的可溶性耐热蛋白质通透酶：即底物特异性载体蛋白。是参与促进扩散、能与被吸收的营养物质发生特异性结合以加速营养物由胞外进入胞内、能发生构象改变并具有酶性质的蛋白质。 移位酶：与通透酶同义，伊红美蓝培养基EMB：伊红美蓝培养基为鉴别培养基，其内含有乳糖、伊红、美蓝、蛋白胨等成分。常用于肠道细菌的鉴别。特别是用于鉴别E.coli菌，因E.coli菌发酵乳糖产酸，菌体带 H+与酸性染料伊红结合，再与美蓝结合，致使菌落染上具金属光泽的绿色（透射光下呈深紫色），因此能与其他肠道细菌相区别异养微生物对氮源物质利用的先后次序：蛋白胨简单蛋白质铵盐硝酸盐N2滤膜：即醋酸纤维薄膜。常用于过滤、浓缩水中的细菌，然后置于营养琼脂或浸有培养液的纤维素衬垫上，进行细菌的培养糖类 醇类 有机酸 脂类葡萄糖 果糖 甘露糖 半乳糖 淀粉 纤维素 木质素 几丁质 琼脂等渗溶液：透宜微生物的生长。 高渗溶液：微生物细胞发生质壁分离。 低渗溶液：微生物细胞吸水膨胀，对细胞壁脆弱或丧失的各种缺壁细胞（如原生质体、球状体、支原体）来说，在低渗溶液中还会破裂1).基础培养基（minimum media）在一定条件下含有某类微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基，也称为基本培养基。2).加富培养基（enriched media）在普通培养基（如肉汤蛋白胨培养基）中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物。3)增殖培养基（complete media）在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其他微生物，这种培养基称为增殖培养基。常用于菌种筛选。4)选择性培养基（selected media）一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。5)鉴别性培养基（differential media）一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只需肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基EMB培养基的组分：蛋白胨、乳糖、蔗糖、K2HPO4、伊红Y、美蓝、蒸馏水。 pH值7.2 EMB培养基主要用于从菌落颜色上鉴别肠道细菌欲对普通变形杆菌进行运动能力的观察，应使用应使用肉汤蛋白胨半固体培养基培养基中琼脂的用量是0.5，在半固体直立柱中进行穿刺接种从土样中富集好氧性自生固氮菌：采用Ashby无氮培养基。 富集原理：因土样中好氧自生