组织培养所需的实验条件和器具.doc

组织培养所需的实验条件和器具图片怎样才能发上来？请帮助！一、植物组织培养全过程：二、植物组织培养常用的设备和器材1、培养室: 包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间，是组织培养实验所必须具备的基本条件。 2、仪器设备：主要有超净工作台、冰箱、水浴锅、高压蒸汽灭菌锅、烘箱等。 超净工作台 高压蒸汽灭菌锅 水浴锅3.实验常用用具培养容器试管用于茎尖、花药、幼胚培养。一般要求试管口径要大，长度稍短，便于操作，以20mm*150mm、25mm*150mm、0mm*200mm为宜。三角瓶是植物组织培养中最常用的培养容器，适于各种培养。接种外植体时多用容积为50毫升的三角瓶，一般实验用100毫升的三角瓶，生产育苗多用150毫升的三角瓶，液体振荡培养用300毫升以上的大三角瓶。优点是瓶口小，瓶底大，培养面积大，受光好，易放置，不易失水，培养效果好。缺点是价格较贵，易破损。果酱瓶或罐头瓶用于组培苗的大量繁殖，生产中应用较多的是200300毫升的果酱瓶或罐头瓶。优点是成本低，瓶口大，操作方便，透光好，空间大，培养材料生长健壮。但培养基容易失水，污染率较高。培养皿用于无菌材料分离、无菌发芽、单细胞固体平板培养、胚和花药培养、滤纸灭菌等。常用的规格有60mm、90mm和120mm。兰花瓶主要用于蝴蝶兰、大花蕙兰等兰科花卉组培苗的继代培养。塑料容器优点：重量轻，运输方便，清洗过程中不会损耗；缺点：不易清洗，透光不好，壁上会有水珠，植物生长效果不是很好，用久了会变毛，价格贵。封口材料为防止培养基干燥和污染杂菌，培养容器瓶口需要一定的封口材料包扎。可用牛皮纸、硫酸纸、耐高温聚丙烯塑料，用线绳或耐高温橡皮筋捆扎，或用塑料瓶盖。玻璃器皿试剂瓶用于各种试剂、母液的存放，有广口和细口之分，有白色和棕色之分。见光易分解的药品用棕色瓶保存。烧杯用于配置各种母液和培养基。量筒配制各种溶液及培养基是测量用。容量瓶用于配制各种溶液时定容用。移液管（吸管）用于吸取各种母液和植物生长调节剂，有条件的可用微量可调移液器。接种器械镊子有直镊和枪镊之分，接种和转移材料常用枪镊，枪镊腰部弯曲，使用省力，枪镊规格有16cm、20cm、23cm、26cm、30cm。剪刀有直剪和弯剪之分，用于剪取植物材料、茎段，进行继代培养的转接。解剖刀用于切割植物材料。其他工具包括接种针、接种铲等，用来接种花药或转移植物组织。三、常用药品组织培养所需药品主要用于培养基的配制，也有部分用于消毒，主要有以下几类： 类别药品作用消毒药品次氯酸钠、次氯酸钙、双氧水、漂白精片、溴水、硝酸银等。消毒无机盐类KNO3、MgSO47H2O、NH4NO3、KH2PO4、CaCl22H2O、Fe2（SO4）3、Na2HPO4、CuSO4、NaNO3、Na2SO4、ZnSO4、MnSO44H2O、MnCl22H20、KI、H3BO3 等。无机盐是供外植体吸收的基本营养成分，各有不同作用，如N、P 影响蛋白质的合成，Ca、K、S、Mg 影响酶活性等。有机化合物蔗糖、维生素类、肌醇、氨基酸等。其中蔗糖是不可缺少的碳源，也是渗透压调节物质。维生素的主要作用是促进细胞分裂和诱导器官分化。氨基酸是蛋白质组成成分，也是有机氮源。植物生长调节剂生长素类吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、2，4D 和吲哚丁酸（IBA）。2，4D 有利愈伤组织生长，NAA、IAA、IBA 有利于器官分化。细胞分裂素类激动素（KT）、6苄基腺嘌呤（BA）、玉米素（ZT）等。其作用是促进细胞分裂与分化，其中KT 能明显促进芽的分化而抑制根的形成。赤霉素类以GA3 运用最广泛有促进不定芽和幼株伸长的作用。有机附加物人工合成和天然的有机物，常用的有酵母提取物、椰乳、果汁等及相应的植物组织浸出液。对细胞和组织的增殖和分化有一定促进作用。此外琼脂在组培中作为凝固剂，是外植体的支持体，常用浓度为0.51。水培养基用水原则上使用蒸馏水，去离子水等。四、实验条件1、光照光照是组织培养中的重要外界条件之一，它对外植体生长和分化有很大的影响。光照对组织培养的影响主要表现在光周期、光照强度（光强）和光质这三个方面。2、温度温度最重要的作用是决定呼吸的速度和控制植物组织代谢过程的化学反应。在植物组织培养中，不同植物繁殖的最适温度不同，大约为2328之间，但也有不少例外，差异比较大。通常低于15时，培养的外植体组织生长缓慢或出现停滞，但高于35对生长也不利。在实际工作中，在考虑某种培养物的温度要求时，也应考虑原植物的生态环境所处温度条件，如生长在高海拔和较低温度环境的植物，则培养的环境温度可适当低些。3、湿度植物组织培养中的湿度影响主要有两个方面：一是培养容器内的湿度条件，二是培养室的湿度条件。培养容器内的湿度主要受培养基的影响，相对湿度可达100%，而培养室的湿度变化随季节而有很大变动，它可以影响培养基的水分蒸发，一般要求70%80%的相对湿度。4、培养基的PH值外植体的培养增殖都要求一定的PH值。通常一般培养基的PH值都在5.66.0之间。如果PH值不适则直接影响外植体对营养物质的吸收，进而影响外植体的脱分化、增殖和器官形成。不过PH值对不同植物的影响会有差异，有的宜偏酸，有的宜偏碱，在实际工作中，依不同植物而调整。5、氧和其他气体培养容器中的气体成分会影响到培养物的生长和分化。氧是植物组织培养必需的，在接种时应避免把整个外植体全部埋入培养基中，以免造成缺氧。在静止的液