揭阳学院《食用菌》教案.doc

A228浪险工作室收集制作1、菌丝的形态菌丝分类：菌丝按横隔的有无：有隔菌丝、无隔菌丝按细胞内核的个数划分：单核菌丝、双核菌丝、多核菌丝、二倍体菌丝按生长的空间划分：气生菌丝、基内菌丝根据菌丝发育的顺序和细胞中细胞核的数目：初生菌丝、次生菌丝、三生菌丝初生菌丝：又称单核菌丝、一次菌丝：系由孢子萌发而形成的菌丝，一般都不会形成子实体，只有和另一条可亲和的单核菌丝质配之后变成双核菌丝，才会产生子实体。 生长过程：纤细状多核细胞隔膜单核细胞；特点：菌丝细，分支少，生长慢，生长期短，一般不结实次生菌丝：又名二次菌丝、双核菌丝：由两条初生菌丝结合，经过质配而形成的菌丝，是食用菌菌丝存在的主要形式特征：多细胞双核菌丝，发生锁状联合；特点：粗壮，分支多，生长快，多以锁状联合方式分裂，生理成熟时形成子实体，生长期长锁状联合：概述：该方式是双核菌丝细胞分裂的一种特殊形式。担子菌中许多种类的双核菌丝都是靠锁状联合进行细胞分裂，不断增加细胞数目.锁状联合过程：顶端细胞的两核之间细胞壁上产生一个喙状突起双核之一个移入喙状突起，另一个仍留在细胞下部两异质核同时进行有丝分裂，成为4个子核2个子核在细胞的前部；另外2子核，1个进入喙突 了中，1个留在细胞后部细胞中部和喙基部均生出横隔，将原细胞分成三部分喙突尖端继续下延与细胞下部接触并融通；喙突中的核进入下部细胞内细胞下部成为双核一个双核细胞分裂为两个，在两细胞分融处残留一个喙状结构，即锁状联合锁状联合：部位：次生菌丝顶端细胞；实质：有丝分裂；结果：菌丝伸长分支；痕迹：丝壁有突起三生菌丝：又称三次菌丝、结实性双核菌丝：由二次菌丝进一步发育而形成 的已组织化了的双核菌丝。包含于：菌索、菌根、菌核、子实体菌丝的组织体特殊的菌丝体实质：菌丝体在环境条件不良或在繁殖时，菌丝体的菌丝相互紧密地缠结在一起的一种休眠体，能行使繁殖功能。 作用：适应不良环境或利于繁殖常见类型：菌索、菌核、菌丝束、菌膜、子座菌索：形似根须状；顶端有生长点；表面常角质化，对不良环境有较强的抵抗力；可发育成子实体菌核：块状物休眠体(菌丝体+营养物质），具强再生能力、抵抗力，既是贮藏器官，又是菌丝组织体子座：容纳子实体的褥状结构；由菌丝体组成，或由菌丝体和部分营养基质相结合而形成；形态不一，多为棒状；营养生长、生殖生长菌丝束：菌丝平行排列的束状结构；肉眼可见；具有输导作用；无顶端分生组织菌膜：菌丝紧密交织成一层薄膜子实体的形态：概念：产生有性孢子的肉质或胶质的大型菌丝组织体，由已分化的菌丝体组成，是食用菌的繁殖器官。即通常被人们称作“菇、菌、蘑、耳、蕈”的食用部分。来源：成熟的次生菌丝扭结分化而成作用：产生有性孢子的部位、繁殖器官、食用部分形态：形状、大小 、质地各异，丰富多彩伞状子实体结构：都有菌盖、菌柄，部份有菌幕、菌环、菌托概况：菌盖：是食用菌子实体的帽状部分，多位于菌柄之上。它是食用菌最明显的部分，是食用菌的主要繁殖器官，也是人们食用的主要部分。组成：表皮（各色）菌肉：质地：肉质、胶质、革质等；组成：丝状菌丝或泡囊状菌丝；菌褶：菌盖下片状物、产担孢子部位、具子实层（产担孢子）菌管：辐射状排列、管状子实层（产担孢子）菌柄：作用（支撑菌盖，输送养料次要食用部位）着生方式（中生、偏生、侧生）菌幕：1.外菌幕：包被整个幼小子实体的膜；2.内菌幕：菌盖和菌柄间的连接膜菌托：外菌幕被撑破残留在菌柄基部发育成的杯状、苞状或环圈状的构造，撕裂方式不同，菌托的形状各异.（1苞状, 2.鞘状, 3.鳞茎状, 4.杯状, 5.杵状, 6.瓣裂, 7.菌托退化, 8.带状, 9.数圈颗粒状 菌环：内菌幕被撑破留在菌柄上的单层或双层环状膜 孢子：概述：是一种有繁殖功能的休眠细胞。有性孢子：子囊孢子、 担孢子；无性孢子：节孢子、 粉孢子、厚垣孢子、 分生孢子孢子的形态及表面特征几种主要毒菌：多为担子菌纲、伞菌目、鹅膏科、鹅膏属 已发现：世界：约250种；中国：约90种（30种剧毒）；类型：胃肠型、致幻型、肝损型、溶血型中国菌业发展趋势：1.大力发展传统品种，由单一品种向多品种发展。2.改良栽培方法、生产技艺，栽培方式向多样化、工厂化发展，开发多样性的培养基质，培育新品种。3.生产向专业化、联户规模型发展。 4.开发野生菌类资源。5.发展观赏真菌和家庭园艺.发展趋势总况：1.突破气候及地理限制2.不断改良栽培方法、生产工艺3.增加栽培种类4.培养基质多样化2、食用菌的生理生态营养：生物在生长过程中，不断地从外界环境中摄取化学物质，并加以利用，使其在生长过程中获取生命活动所需的能量及其结构物质的生理过程。营养物质：外界环境可为生物细胞提供结构组分、能量、代谢调节的化学物质，也称为养料。食用菌营养物质的功用：1）建造食用菌细胞的原料；（2）为食用菌生命活动提供所需要的能源。营养物质的基本种类：碳源、氮源、无机盐、生长因、水分氮素水平对食用菌影响：只有无机氮，易生长慢、不结菇；无机氮源多，降低食用菌品质；菌丝体生长期：0.0160.064%为宜，不宜低于0.016%；子实体发育期：0.0160.032%碳氮比影响食用菌生长发育概念：碳氮比（C/N）系指营养基质中的碳、氮元素浓度比值。影响：适宜（菌丝生长期：2025：1；子实体生长期：3040：1）太小：菌丝易徒长，不易结菇,易引起杂菌污染；太大：生长慢，产量低无机盐作用：细胞、酶的组成部分；维持酶的作用、控制原生质胶态。调节：调节氧化还能电位、酶、细胞透性；培养基pH、渗透压等种类：大量元素：P、S、Ca、Mg、K等；微量元素：Cu、Zn、Mn、B、Co等来源：植物残体（木屑、作物秸秆等）应用：一般只补充少量的大量元素（石膏粉、草木灰等）生长因子：食用菌生长所需的微量有机物。作用：参与菌体代谢、酶的组成部分或活性基团刺激和调节菌体生长种类：维生素、氨基酸、碱基来源：牛肉膏、酵母膏、马铃薯、麦麸、玉米粉等水分比重：鲜重90%左右；作用：调解温度二生理类型：腐生菌、寄生菌、共生菌腐生菌：以从动植物尸体或无生命的有机物中吸取养料为营养方式的食用菌。 种类：木腐生菌，如香菇、平菇等；草腐生菌，如草菇等寄生菌：生活于寄主体内或体表，从活的寄主细胞中吸收养分或进行生长繁殖的食用菌 种类：兼性寄生、兼性腐生共生菌：与相应生物生活在一起，形成互惠互利，相互依存关系的食用菌种类：外生菌根，如牛肝菌属与栎属根；内生菌根，如天麻与蜜环菌三理化环境：温度、水分和湿度、酸碱度、氧与二氧化碳、光照温度：（1）对温度需求规律：（高低）孢子萌发菌丝体生长子实体发育（2）几个重要的温度指标：最适生长温度、最低生长温度、最高生长温度常见菌的生长温度指标：生长范围 最适温度 分化 发育n 蘑菇633 2224 818 1316n 香菇333 2226 721 1828n 平菇535 2438 722 1317n 金针732 2225 519 814n 猴头1233 2124 1224 1522n 黑耳538 2432 1530 2028n 银耳630 2225 1826 2025n 草菇1245 3235 2242 3032（3）菌丝体对温度的需求：耐低温（在0不死亡（除草菇）、喜适温（多数在25左右）怕高温（多数在40以上死亡）香菇菌丝在不同温度下长速：温度（）菌丝生长速度（m/天）56.41513.02040.02561.03085.03341.5（4）子实体分化对温度的需求：类型：低温型 1318 、中温型 2024 、高温型 2430 温度反应：分化时（恒温结实菌类：不需要温差刺激，如木耳、灵芝、草菇等。变温结实菌类：需要温差刺激（昼夜温差810 ），如平菇、香菇等。（5）子实体发育对温度的需求：菌丝体生长、子实体形成主要靠料温；子实体生长主要靠气温；（皆兼顾）注意：品种温度型与栽培期要匹配、分化时分清是否给予温差水分和湿度水分：功能（基本物质、调节温度、基质养分介质）培养料含水量（60%65%）影响（含水量少：菌丝生长受阻，不能吃透培养基；含水量多：培养料腐烂发臭、影响堆温上升、菌丝生长减慢、引发菇蚊、螨滋生，危害菌丝）湿度：需求规律，由低到高（菌丝体阶段：60%70；子实体阶段：85%90）影响（太低：阻碍生长；太高：阻碍生长；易染病虫害）类型（喜湿性菌类：木耳、银耳等；厌湿性菌类：香菇、双孢菇等）酸碱度：影响（细胞透性、酶活性、代谢活动）；需求（范围：3.08.0；最适pH：喜酸性：5.06.5（多）；喜碱性：7.5）调节：10%NaoH、石灰、磷酸二氢钾等；保持：喷1%2%石灰水空气（O2与CO2）（需求规律：少多）影响：通气好：长得快、壮、不易生病虫害；通气差：菌丝弱，菇体畸形，易生病虫害需求：菌丝体生长： O2较少，对CO2不敏感，但高CO2抑制生长；子实体分化：对CO2敏感，适当CO2有利于导子实体分化；子实体发育：需要充足O2 调节：通风换气；通风、温度、湿度相互矛盾，需兼顾 光照规律：菌丝体生长：黑暗；子实体分化：散射光；子实体生长：多数：7分阴3分光；喜光型：5分阴5分光，如香菇；厌光型：无光或微光，如金针菇影响：散光是分化的必要因素；直射光对菌丝体生长有害（含紫外线；降低湿度）；光照足：颜色深，健壮；光照弱：色浅，弱，畸形或不分化食用菌与微生物：有益微生物（制作发酵料、提供营养物质、与食用菌伴生、刺激出菇）有害微生物（污染培养料，争夺生长条件，如青霉、酵母菌等、侵染食用菌，致其各种病害，如木霉、头孢霉等）食用菌与动物：有益动物（共生，如白蚁与鸡枞菌；孢子传播媒介，如蝇）有害动物（传播杂菌的媒介，如甲虫、咬食培养料及食用菌，如昆虫）食用菌与植物：植物（提供养料、营养源；提供生态环境）食用菌（益：提供C02，分解转化复杂有机物；害：腐解木料、致树木病害）；共生：形成菌根4、食用菌菌种生产菌种概述：系指在适宜基质上生长良好并已充分蔓延，可用作食用菌生产的种源菌丝体。种类：野（担孢子或子囊孢子）栽（扩大繁殖后的纯次生菌丝）1. 菌种概述 1.1 概念（二）来 野生菌驯化-优良菌株-扩繁-用生原菌株改良生物技术创新基要-实行纯培养不含任何杂1.2 菌种类根据 目的；保藏用种，实验用种，生产用种级别；一级菌种（母种），二级菌种（原种），三级菌种（栽培种）状态：固体菌种、液体菌种一级种（母种）概况 ； 概念 ； 用分离法首次得到的纯次生菌丝体 培养环境； 试管、斜面培养基用途；再生母种；扩大原种，保藏用种特点，菌丝弱而少、不可直接栽培二级种（原种）概况；概念；将母种扩大至粗放培养基上形成的菌种培养环境；大口瓶、较粗放的液体或固体培养基用途；生产栽培种特点；菌丝较多而壮、适应性较强三级种（栽培种）概况；概念；将原种扩大至粗放培养基上形成的菌种培养环境；菌种袋、较粗放的液体或固体培养基用途；栽培生产特点；菌丝多而壮、适应性强生产总过程子实体-母种-原种-栽培种-栽培-子实体2. 制种条件2.1 制种程序；获得培养材料- 培养基质的混合配制- 分装于培养容器中-消毒或灭菌-接种- 培养 -检验-使用 2.2 要求；无菌操作；2.3 接种条件与设备；接种室：分离、移接菌种的净化空间。 接种箱：提供净化的分离、移接等操作空间。超净工作台：提供无菌操作区。酒精灯：产生无菌区，用于菌种分离、移接等。接种工具：用于分离材料与接种。如接种针、镊子，打孔器、手套等。灭菌设备：高压灭菌锅、常压灭菌灶接种工具；要求:前端为导热性好的金属材料2.3 培养条件与设备 培养室：放置、培养菌种等 恒温培养箱：培养母种等 培养容器：试管、培养皿、菌种瓶等 冰箱：保藏菌种等培养室；（培养大量菌种的恒温房）要求；光线暗，密闭好、通风性强，能升温、降温（空调机）有培养架3. 菌种的培养基3.1 概述人工按照一定比例配制各种营养物质，以供给菌种生长繁殖的营养基质。要求；营养种类全、比例合适，水分含量适合、pH适宜，保持无菌状态3.2 培养基的类型类型；原料来源；天然培养基:天然有机物，合成培养基:已知成分的化学试剂，半合成培养基: 化学试剂+天然培养物理状态；液体培养基:营养液，固体培养基:天然固体原料，固化培养基:营养液+凝固剂表面形状；斜面培养基，平板培养基3.3 母种培养基；1，.配制原则；营养成分含量与比例适合食用菌生长发育，pH适宜，有一定pH缓冲能力3.3 母种培养基；2.通用配方；马铃薯培养基（PDA）；马铃薯200g葡萄糖20g琼脂1520g水1000mL3.3 母种培养基；3.配制过程；制马铃薯滤液；削皮，切碎，煮沸20min，取定量滤液融化琼脂预湿；滤液沸腾时加入，融后加余料调解pH；10%NaOH或HCL分装试管；勿污管口，控制装量扎 捆；准备灭菌；灭 菌；1kg/cm2(103kpa、121），2030min摆斜面；无菌检验；约30条件下空白培养23天3.4 原种、栽培种培养基配制原则；营养搭配合理；培养料比母种培养基粗放；碳氮比适合；适宜的PH值和缓冲物质；原种培养基比栽培种培养基精细，营养更易于被菌丝吸收3.4 原种、栽培种培养基种类；棉籽壳培养基，木屑培养基，玉米芯培养基，粪草培养基4 菌种的分离4.1 概况；概念；在无菌条件下将所需要的食用菌与其他微生物分开，在适宜条件下培养以获得纯培养菌丝的过程。关键；无菌操作；接种环境、双手消毒灭菌，分离材料消毒灭菌，开启的管口、瓶口靠近灯焰，拔出的棉塞勿触及任何地方，动作快，接种时间短分离设备：超净工作台、接种箱 注意：于超净工作台或接种箱内使用酒精灯、火焰操作 、确保无菌无菌分离（操作）：环境（超净工作台、接种箱、酒精灯火焰区）要点：操作过程、环节与操作空间确保无菌、防烫伤、烫死菌种、操作动作准确迅速，时间短 分离方法：组织分离法（子实体分离法、菌核组织分离法、菌索分离法）孢子分离法：单孢子分离法、多孢子分离法基内菌丝分离法：菇木（耳木）分离法、土壤内菌丝分离法组织分离方法：将食用菌的部分组织培养成纯菌丝体的方法。特点：简便、易行、保持原品种性状、适用于大型肉质子实体和孢、子不易萌发的菌类、若种菇感染病毒，不易脱毒操作过程：种菇选择种菇消毒切取组织块移接至培养基中央培养挑菌丝纯化应用：菌种复壮、选育、稳定性状等方法：子实体分离法、菌核分离法、菌索分离法子实体分离法：分离部位（菌柄与菌褶接处的菌肉）菌核分离法：菌核中心组织块 菌索分离法：风干菌索尖端部分孢子分离方法：在无菌条件下，使有性孢子在适宜的培养基上萌发成菌丝体而获得纯菌种的方法。 特点：菌丝菌龄短、菌丝生命力强、变异多操作程序 ：种菇选择与处理 收集孢子 孢子培养 挑菌落幕 纯化应用：育种、受病毒浸染菌种脱毒 方法：单孢子分离法、多孢子分离法多孢子分离法：把许多孢子接种在同一培养基上，让它们萌发、自由交配来获得纯菌种的方法。 方法：孢子印分离法、孢子弹射分离法、菌褶涂抹法、空中孢子捕捉法整菇插种法：种菇插在孢子收集器中使孢子散落于培养皿内的方法25、24h现孢子粉、取出分离材料、培养皿盖严钩悬法：25、24h现孢子粉、取出分离材料单孢子分离法：只取一个孢子，让它萌发成菌丝体来获得纯菌种的方法，难度较大，一般只应用于育种。方法：平板划线法、连续稀释法菇木分离法：利用生长食用菌的菇木获得纯菌丝体的方法。 缺点：易受污染土壤内菌丝分离法：利用腐生菌的地下菌丝体分离得到纯菌丝体的方法。特点：易污染、向培养基质添加抑细菌生长物质培养基质的选择：原则（食用菌的品种、食用菌的营养源、当地原料来源、菌种级别、培养目的）培养基质的制备：多为固体培养基接种：在无菌条件下，将母种或原种移接到经过灭菌的培养基上的过程。（关键无菌操作）要点：接种环境消毒灭菌、双手消毒、开启的管口、瓶口靠近灯焰、拔出的棉塞勿触及任何地方、动作快，接种时间短母种转管与接种母种转管与接种无菌操作技术要点：1.工作场所进行灭菌2.将接种用品及原始母种放入接种箱或超净工作台内。3.手、台面、接种工具、母种管用酒精棉球擦试消毒。4. 火焰灼烧接种工具至烧红后冷却，凡有伸进试管的杆部均过火灭菌。5左手大拇指和其他四指并拢握住菌种管和待接试管，斜面向上，并保持水平。6右手小指、无名指及手掌拔掉棉塞，用火焰灼烧试管口，将消毒后接种针伸入菌种管内并不断搅动。7.用接种针快速移取黄豆粒大小的菌种入待接试管斜面培养基中央。8灼烧试管口，并将棉塞在火焰上迅速过一下然后塞上。9贴标签10. 收拾台面5.3.2 原种的接种接原种：用接种铲取蚕豆大小母种菌块，放于瓶中培养料的接种穴里接栽培种：用接种匙（镊、铲）取枣粒大小原种菌块放于袋的两端或瓶中培养料接种穴中（注意：表面老菌丝及老种块勿接入）培养基质因子：营养成分、水分、PH值 外界环境因子：场所卫生、空气、湿度、光线、温度、培养时间母种培养：25恒温培养510天；检查、及时挑拣污染管；纯化出菇试验 使用；控制菌龄（即将长满斜面）原种、栽培种培养：适温，60%左右湿度培养；检查、及时挑拣污染瓶（袋）；勿堆放过挤；控制菌龄（菌丝长满后710天使用）；于凉爽、干燥、通风、避光清洁室内短期存放菌种质量鉴定鉴定项目：形态特征、生理特性、栽培性状、经济效益等（一般从纯度、长势、颜色、菌龄、均匀度、出菇快慢等）。鉴定方法：出菇试验、外观鉴定、菌丝萌发、生长速率测定、纯度测定、吃料能力测定、耐温性测定、耐湿性鉴定母种质量的鉴定外观：菌丝白、整齐、粗壮、有弹性、萌发快出菇试验：好、快、多 吃料能力：快长势：生长快、整齐、浓密、健壮 高温锻炼：恢复萌发快、不倒伏、健壮、旺盛耐干湿性：能生长于偏干、偏湿环境耐干湿性试验：50%原种培养基含水量70%，接入母种正常生长耐高温性试验：适温培养7天3035 锻炼