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VNMR基本操作Universal核磁应用部核磁实验主要步骤样品准备和实验外部条件锁场、匀场和调谐实验设置采样和数据存取数据处理和绘图样品准备样品溶解： 溶剂选择 混合溶剂 去除不溶物 控制溶液体积 浓度控制、pH控制开机步骤开启空气压缩机扳上谱仪电源总开关开控制电路开关开数据工作站电源待登录窗口出现键入用户名和密码放样1、acqi，Eject，确认气流正常。量好样品深度，置于磁体顶上，样品入口处。点击Insert2、设定实验温度，vttype=2 temp=? su vttype=0，或temp，在Temperature窗口中拖动鼠标设定，或vt_set(?)3、设定转速，spin=20 su，或在Acqi窗口拖动鼠标设定锁场和匀场probe=xx1、在Setup EXP窗口中设定溶剂，或键入solvent=CDCl3 等2、find z0 。或在Acqi窗口点击Lock off，用鼠标左右键调整Z0至正共振调整Lock power和Lock gain，一般使锁信号 Lock level 保持在60-80之间。点击Lock on锁场锁场和匀场手动匀场：在Acqi窗口点击Shim，用鼠标左、右键调整Z1和Z2至锁信号最大氘梯度自动匀场：选定实验区(如jexp9) ，键入gmapsys，点击Autoshim on Z氘梯度匀场l d3=0, 0.003-0.25l Solvent ntd1(sec)deuteroacetone 4 6-12D2O 4 3deuterobenzene 4 3dmso-d6 16 3deuterochloroform 64 3探头调谐1、Autoswitchable 探头的用户无须调谐2、调谐前先设定实验，根据所需观测和去偶的核，依次调谐去偶道和观测道探头调谐1、Mercury用户：键入btune，转接探头电缆和射频电缆，轻旋调谐和匹配旋钮至电平显示最低。键入tune off，复原电缆2、Inova用户：键入su，转接探头电缆，揿下Channel按钮，观测道为1，去偶道为2， 轻旋调谐和匹配旋钮至电平显示最低。Channel按钮回零，复原电缆探头调谐1、键入qtune，启动调谐窗口， 转接电缆2、在窗口中用鼠标下拉Mark，选择想要调谐的核，窗口中显示红竖线3、轻旋调谐和匹配旋钮至谐振谷正对红线，并使波谷最深4、退出调谐窗口，复原电缆实验设置1、激活Setup EXP界面2、用鼠标下拉菜单选定要做的实验3、检查实验参数(dg)1H NMR参数设置tn=H1np=32ksw=20p (movesw)tof=0 (movetof)at=np/(2sw)go / gapw=pw90/3tpwr=56d1=1 (5T1)gain=020nt=41H NMR数据处理fn=n or 32klb=n/0.1ft / wft / wtidcaph0 / aphwtilbsb, sbsgf, gfs一维谱显示1、Ds2、vsadj, 鼠标中键调整vs3、鼠标中键点谱图左端调整vp4、鼠标左键选左界，右键选右界，点Expand放大，inset局部放大1H NMR数据处理1、点击Phase(Phasing=100), aph2、第一次点击最强峰，上下拖动鼠标调整rp3、再次点击另一侧的峰， 上下拖动鼠标调整 lp, rp4、点击Box存盘5、光标靠近TMS或溶剂峰，键入 nl，点击Ref，输入0和溶剂的化学位移6、基线校正：Display，Massage, 点击Region, 点BC7、 Part Integral，键入cz, Resets, 用鼠标左键选取出峰的范围用 (右键撤销选择)，Box， 进行积分，用光标选积分段，Set Int，输入积分参考值，dpir8、点击Th，用鼠标选取阈值，dpf1H NMR绘图1. vp=12 pl pscale ppa pltext pir(或pirn)2. vp=70 ppf(top) vp=123. page4. pap(0,160) pll(70,160,10)5. crcom(plot1h,)6. svf(xxxxx), 检查当前目录pwd，保存文件。13C NMR参数设置tn=C13np=32ksw=250p (movesw)tof=0 (movetof)at=np/(2sw)pw=pw90/3tpwr=56bs=32d1=1 gain=3040nt=10000dn=H1dof=tof of 1Hdm=nny / ynn/ yyydmm=g / w / pdseq=Myshapedmf=6000(on 300 MHz)dpwr=30 (attval)l go, sa, ra13C NMR数据处理fn=n or 32klb=1ft / wft / wtidc and bcDEPT参数设置1.先做13C NMR，优化sw2.DEPTpw, tpwrpp=pw90 of 1Hpplvl=tpwr of 1Hmult=0.5,1,1,1.5ss=-4il=yarray pp (mult=1)DEPT数据处理adept, dssaAnalyzeDEPTProcessEditPlotPRESAT参数设置dn=H1nlsdsatfrq=dofsatdly=11.5ssatpwr=-1620tof=dofHomo 2D NMR1、1H NMR2、优化sw，alfa或rof23、设置2D实验参数，采样4、2D NMR数据处理5、2D NMR绘图1D NMR优化alfa或rof21、优化谱宽movesw2、精确调整相位3、键入crof2或calfa4、mp(1,2) 或 mf(1,2)5、jexp2COSY1、键入gCOSY，或在Setup EXP中用鼠标下拉菜单选择实验2、检查tpwr, pw3、 nt=1, 最小相循环的整数倍np=1024, ni=256phase=1(N-type)4、goDQCOSY1、键入DQCOSY，或在Setup EXP中用鼠标下拉菜单选择实验2、检查tpwr, pw nt=2, 最小相循环的整数倍np=2048/4096, ni=512/1024phase=1,2(State)3、goNOESYmix=0.10.8nt=32?phase=1,2(State)TOCSYmix=0.050.1phase=1,2(State)数据处理pmode=fullwft2da, 或在Process窗口中点击Full 2D transformwft(1), wtiwft1da, ds, wtiwft2da同核二维显示1、dconi, 2、dpconi(pos,15,1.3)3、鼠标左键定左界和下界，鼠标右键定右界和上界，Expand放大4、中键调整vs2d，或点击VS+20%, VS-20%5、trace(f2), trace(f1)axis=pp, hhgrid(1,color)同核二维定标1、setref2、光标点TMS3、rl(0p) rl1(0p)同核二维绘图plcosy(15,1.2,1)Hetero 2D NMRIndirected detect: HMQC, HSQC, HMBC, HMQC-TOCSY, HSQC-TOCSYDirected detect: hetcorgHMQC1H NMR: mf(1,3)gHMQC,pw, tpwrpwx, pwxlvldmf=160p of 13C, dpwrj1xh=140np=2048, ni=128phase=1,2(Phase Sen)/1(N-type)/2(P-type)ss=32gHSQC1H NMR: mf(1,3)gHSQC,pw, tpwr, pwx, pwxlvldmf=160p of 13C, dpwrj1xh=140np=2048, ni=128multphase=1,2(Phase Sen)/1(N-type)/2(P-type)gHMBC1H NMR: mf(1,3)gHMBC,pw, tpwr, pwx, pwxlvldmf=220p of 13C, dpwrj1xh=140, jnxh=8np=2048, ni=128phase=0(N-type)gHMQC-TOCSY or gHSQC-TOCSY1H NMR: mf(1,3)gHMQC-TOXY,gHSQC-TOXY,pw, tpwr, pwx, pwxlvldmf=160p of 13C, dpwrj1xh=140mix=0.08np=2048, ni=128phase=1,2(Phase Sen)/1(N-type)/2(P-type)Indirected DetectTMSrl(0p), rl1(0d)cdcl3rl(7.26p), rl1(77d)plhxcor(15,1.3,1,2)Directed Detect1H NMR: sw, tof13C NMR: moveswHETCORsw1=sw of 1Hdof=tof of 1Hdmf=20p of 1H, dpwrnp=2048, ni=128NOESY1D选择激发noesy1dmix=0.5Pbox90eburp1CloseName or Close pxshape(eburp1 100, My shape) WET1Dwet1dPbox90G4等CloseName or Close pxshape(eburp1 100, My shape) presatdn=H1nl, sddof?presatsatmode=y, satfrq=dof, satpwr, satdlyTOCSY1D 选择反转恢复实验tocsy1dmix=0.08Pbox180iburp1CloseName or Close pxshape(iburp1 100 1200, My shape) T1测定dot1AnalyzeExponentialT1 ProcT1 Analysisplotpw90 测定s2pultpwrarray(pw, 40, 1, 1)d1=5T1wftai, dssh, dapwcalcpwx 测定sample: CH3I13Cpwxcaldpwrarray(pwx1, 40, 1, 1)pwxcalcAuto Calibrate 测定login as: vnmr1sample: CH3I13CGlideSetupCalibrate gmapsys1、读mapping文件2、Shim mapShimmap fil