柴胡黄芩配伍抗大鼠急性酒精性肝损伤作用的实验研究.doc

柴胡黄芩配伍抗大鼠急性酒精性肝损伤作用的实验研究柴胡黄芩配伍抗大鼠急性酒精性肝损伤作用的实验研究更新日期： 06-05 作者：刘仁慧 王宪龄 刘方洲 【关键词】 柴胡 摘要：目的研究柴胡、黄芩以不同剂量比例配伍（21，11，12）对大鼠急性酒精性肝损伤的防治作用。方法采用白酒灌胃造成大鼠急性酒精性肝损伤模型，以单味柴胡黄芩和小柴胡冲剂作为对照药，通过血清和肝匀浆乙醇脱氢酶（ADH）的测定和肝组织病理学的观察，探讨柴胡黄芩配伍对急性酒精性肝损伤的影响。结果柴胡黄芩12组对各项检测指标影响最显著。结论不同比例配伍的柴胡黄芩抗急性酒精性肝损伤中发挥作用的强弱趋势不同，以柴胡黄芩12组疗效较佳。 关键词：急性酒精性肝损伤； 柴胡； 黄芩； 中药配伍 Experimental Study of Radix Bupleuri and Radix Scutellare in Compatibility on Acute Alcoholic Liver Injury Abstract：ObjectiveTo study the prevention and treatment effects of Radix Bupleuri and Radix Scutellariae in compatibility ratio of different dosage by two to one,one to one,one to two on acute alcoholic liver injure by animal experiments.MethodsRat model was duplicated by the white spirit through consecutive gastric infusion for ten days. Radix Bupleuri, Radix Scutellariae and XiaoChaihu Granules were used as positive control medicines, respectively.By investigating the concentration of alcohol dehydrogenase(ADH)in blood serum and liver and the alteration of livers pathology ,explore the effects of Radix Bupleuri and Radix Scutellariae in compatibility on acute alcoholic liver injure.ResultsThe effect of Radix Bupleuri and Radix Scutellariae in compatibility by the ratio of one to two was better than any other treatment groups.ConclusionThe effects of Radix Bupleuri and Radix Scutellariae in compatibility ratio of different dosage were different on acute alcoholic liver injure.Radix Bupleuri and Radix Scutellariae in compatibility by the ratio of one to two had the best function. Key words：Acute alcoholic liver injury； Radix Bupleuri； Radix Scutellariae； Compatibility of Chinese Materia Medica； Experimental study 中医学认为酒为湿热有毒之品，过饮之必伤及脾胃肝胆而引发疾病。柴胡黄芩药是伤寒论柴胡系列方中最有代表意义的基本配伍，可疏肝清肝，和解少阳，针对急性酒精中毒病因病机，有着广泛的临床应用基础。我们前期的研究表明，柴胡黄芩配伍对小鼠急性酒精性肝损伤有良好的保护作用1。本实验采用大鼠急性酒精性肝损伤模型，进一步探讨柴胡黄芩配伍对其的保护作用。 1 材料与方法 1.1 动物健康Wistar大鼠96只，雄性，体重（17020）g，由河南省实验动物中心提供。 1.2 药物柴胡，伞形科多年生草本植物北柴胡Bupleurum chinense DC.的干燥根，产于河南省嵩县。黄芩，唇形科多年生草本植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根，产于山东莒县。小柴胡颗粒，天津市爱康药业公司生产，批号：011202。 1.3 主要试剂与仪器56度二锅头白酒（批号：020128），北京京宫城酒业技术发展公司生产。甘氨酸（批号：20011120），上海化学试剂采购供应站。氢氧化钠（批号：20000710），郑州化学试剂二厂（进口分装）。辅酶（NAD，批号：6110），美国Biomol公司（原装）。722光栅分光光度计，上海第三分析仪器厂。 1.4 方法大鼠随机分8组，除正常组（以等体积的蒸馏水灌胃）外，其余各组均按7 ml白酒/kg/次灌胃给予56度二锅头白酒，2次/d，连续10 d造模结束2。自造模第1天起，每日灌胃给药2次。正常对照组和模型对照组灌服等体积的蒸馏水，其余各组分别灌胃给予相应的药物，剂量皆为10 ml/kg(12 g/kg）连续10 d。末次给酒后24 h，腹主动脉取血制备血清。迅速摘取肝脏右叶以10%的甲醛溶液固定，采用HE染色方法，观察病理形态学；剪下肝左外叶制成10%的匀浆。 1.5 乙醇脱氢酶检测方法（底物发光法） 参照文献3，4方法自行测定，具体操作为：配制0.1 mol/L甘氨酸氢氧化钠缓冲液（pH=9.0），77 mmol/ L NAD溶液，将以上两液按61混合配成试剂，配制825 mmol/L乙醇溶液作为试剂。样品100 l，试剂1 500 l。预孵5 min后，加试剂50 l（空白对照管加等量蒸馏水），22水浴反应1 h，分光光度计340 nm波长处，以空白对照管调零，读取吸光度值。ADH活力单位定义：每分钟催化1 mol还原型辅酶（NADH）的酶量为1个单位。 1.6 统计学处理病理学半定量等 级资料采用Ridit分析法；计量数据采用均数标准差（s) 表示，组间比较采用方差齐性检验及单因方差分析。2 结果 2.1 一般情况观察模型对照组大鼠实验开始时造模后反应不一，或先出现兴奋状态,在笼内奔跑，打斗，尔后见四肢瘫软、行走不稳、卧倒酣睡等中枢神经抑制状态；或直接进入中枢抑制状态。