脊髓缺血损伤模型及行为学的实验研究.doc

脊髓缺血损伤模型及行为学的实验研究脊髓缺血损伤模型及行为学的实验研究更新日期：2011-01-18 伍亚民王正国朱佩芳廖维宏 摘要：目的制作一种新的家兔脊髓缺血损伤模型，观察其行为功能改变。方法以选择性阻断腰动脉制作腰髓缺血损伤模型，32只家兔随机均分为对照组，缺血30，60及90 min组。采用Jacobs法对家兔后肢功能评级，Reuter法对脊髓感觉运动反射功能评分。结果再灌注1 d时，缺血30 min家兔轻瘫，缺血60，90 min家兔全部(8/8)发生完全性截瘫。Reuter分值变化趋势为缺血90 min组缺血60 min组缺血30 min组对照组。结论选择性阻断腰动脉血流30，60，90 min可以模拟出轻、中、重不同程度局部脊髓缺血再灌注损伤。本模型是一种较理想的脊髓缺血损伤模型。 关键词：兔；脊髓损伤；局部缺血；行为 Experimental Study on ischemic injury model of spinal cord and behavior WU YaminWANG ZhengguoZHU Peifang, et al. （Research Institute of Surgery, Daping Hospital, The Third Military Medical University, Chongqing 400042, China） Abstract：ObjectiveTo make a new ischemic injury model of spinal cord and investigate function changes of behavior in rabbits. MethodsThe ischemic injury model of spinal cord was created by the selective occlusion of lumbar arteries in 32 rabbits，which were randomly and equally divided into four groups, i.e. control group, ischemia for 30 minutes, ischemia for 60 minutes and ischemia for 90 minutes. The function of hind extremities was evaluated by the Jacobs method; and the sensory, motor and reflex functions of spinal cord were scored through the Reuter method. Results A mild paralysis was noted in the ischemia for 30 minutes group from one day perfusion, but the complete paralysis of all rabbits happened in the two groups of ischemia for 60 minutes and ischemia for 90 minutes. The Reuters score in the order from the highest to the lowest was ischemia for 90 minutes, ischemia for 60 minutes,ischemia for 30 minutes and control group. Conclusions Mild, moderate and severe reperfusion injury of regional spinal cord ischemia can be simulated by the selective occlusion of lumbar artery for 30 minutes, 60 minutes and 90 minutes respectively. It is a very good model of ischemic injury in spinal cord. Key words：Rabbits;Spinal cord injuries;Ischemia；Behavior 脊髓继发性损伤最基本的机制是“血管机制”，即脊髓缺血缺氧在脊髓继发性损伤中具有重要作用1。缺血性脊髓病是多种损伤疾患的后遗症，如胸腹主动脉瘤手术治疗就可能发生因脊髓缺血所致的截瘫, 且其发病率高达40452，3。研究脊髓缺血致截瘫的机制具有十分重要的理论价值和临床意义。由此，建立理想的脊髓缺血损伤模型十分必要3。笔者制作一种新的家兔脊髓缺血再灌注损伤模型，并从行为学方面进行了初步研究。 材料与方法 1动物模型与分组：日本大耳白家兔32只,体重(2.250.25)kg, 雌雄不拘。随机均分为对照组，缺血30,60,90 min组。以选择性阻断腰动脉制备脊髓缺血损伤模型，具体方法见参考文献46 。 2观察指标与方法：(1)后肢运动功能：家兔致伤后于再灌注1，3，7，14 d时，参照Jacobs等7方法结合实际工作体会（以下括号内所述）对各组家兔后肢运动功能进行评级，具体标准如下： 0级，全瘫（针刺无反应）；1级，严重瘫痪，最小的功能性运动（肌肉搐动）；2级，能进行功能性运动（受累肢体可负重），但不能齐足跳动；3级，能齐足跳动，但有共济失调和轻瘫（跛行）；4级，齐足跳动，轻度共济失调和(或)轻瘫（奔跑但不够灵活）；5级，正常。据此以03级为截瘫标准，计算出各组家兔的截瘫率。(2)感觉运动功能综合评分：根据Reuter等8方法对各组家兔再灌注后1，2，4，8，24，48，72 h脊髓感觉、运动、反射功能进行评分。 3统计学处理：采用t检验对组内、组间样本进行显著性检验。 结果 1兔后肢运动功能观察：再灌注1 d时, 各组家兔的Jacobs分级就显示出较明显的差别。见表1。 其后观察了再灌注14 d期间的截瘫率。结果发现，对照组家兔术后114 d无明显瘫痪表现, 截瘫率为8/8; 缺血损伤各组家兔随缺血程度的不同,其后肢表现为不同程度、不同类型的瘫痪。再灌注1 d时, 缺血30，60，90 min组家兔大部分发生截瘫,截瘫率分别为5/8,8/8,8/8；但缺血30 min组有3只家兔后肢功能恢复至5级,1只家兔功能恢复至3级；而在缺血60,90 min组家兔仍然全部处于瘫痪状态。再灌注14 d时，截瘫率分别为8/8,7/8,8/8。 表1再灌注24 h各组家兔后肢运动功能评级 组别 兔数 Jacobs分级 0 1 2 3 4 5 对照组 8 0 0 0 0 2 6 缺血30 min组 8 2 2 0 1 0 3 缺血60 min组 8 6 0 1 1 0 0 缺血90 min组 8 8 0 0 0 0 0 2感觉运动功能观察：按Reuter法评分，正常家兔评0 分,全瘫时评11分。结果发现，除对照组家兔再灌注24,48,72 h外,其他各组所有时相点评分值均明显高于伤前正常分值；缺血期间各组评分均为11分。总体而言，再灌注后损伤各组各个时相点的分值均明显高