REACH法规 第四卷译稿-7.doc

B.4.急性毒性（皮肤刺激）1.测定方法1.1.引言见描述部分B(A)1.2.定义见描述部分B(B)1.3.参考物质无。1.4.测定方法原理初步考虑在可能产生严重反应的条件下，应仔细考虑物质所有可得的信息，以使测定物的用量为最少。当考虑完整的实验，单体动物实验，是否进行进一步实验时，以下信息是有用的。1物理化学特性和化学反应。如果预期到有严重损伤，强酸或强碱物质就不必测定，（例如pH小于2或大于11.5的物质）。应考虑酸或碱产生的作用。2 如果有可信的证据表明在有效验证的体外测定中会产生严重的后果，就不必进行完整的实验。3 急性毒性研究的结果。如果皮肤急性毒性实验需要用的测定物超过限定用量（2000毫克/千克体重）和没有观察到皮肤有发炎，不必进行进一步的皮肤发炎实验。另外，不必对已知的对皮肤有剧毒的物质进行测定。将单一剂量测定物注入实验动物样品的皮肤，每一动物自我对测定物产生抵抗。在特定的间隔观察和评定发炎的程度，进行进一步观察，以作出对此反应的完整评定。观察时间应足够长，以使可消除的反应能被完整观察到。表现出强烈持久痛苦的动物应被人道宰杀。1.5.质量标准无。1.6.测定方法描述1.6.1.预备实验24小时前，剪去或剃去动物背部的毛。剪毛或剃毛的时候，应小心避免损伤皮肤。只有皮肤健康完整无损的动物才可用于实验。某些种类的兔子在某个季节会有明显的浓密的岛状毛。测定物不应注入浓毛生长的地方。当测定固体（需要的话碾碎）时，测定物应用水弄湿或如需要用合适的介质使其更好地附着于皮肤上。当使用别的介质时，应考虑介质对测定物引起的皮肤发炎的影响。液体测定物不必经过稀释便可使用。1.6.2.实验条件1.6.2.1.实验动物尽管可使用多种哺乳动物，但白公兔是最佳选择。1.6.2.2动物数量如果根据屏蔽效应或其它因素估计物质会产生坏疽（即腐蚀），应考虑做单体动物实验。如果结果表明实验不会产生腐蚀，应用至少2只附加动物完成实验。对于整个完整的实验，至少需要用3只健康公兔子。不必分隔未经过处理的对比组动物。附加动物用于弄清不确定的反应。1.6.2.3.试剂用量如果没有特殊要求，应使用0.5毫升的液体测定物或0.5克的固体或半固体测定物。每只动物未经处理的皮肤作为实验对比。1.6.2.4观察期限 观察期限的长短不必严格限定。应有足够的时间进行完整观察可消除的和不可消除的反应，但通常不会超过注射后的14天。1.6.3.实验步骤动物应被单独关入笼中。测定物应涂于小面积的皮肤（约6平方厘米）而且使其在合适的无发炎处成为薄膜覆盖于表面。如果测定物是液体或粘稠物，就要先使其成为薄膜状再涂于皮肤。在接触阶段，应用合适的闭合或半闭合绑带将测定物松散地固定在皮肤上。应该避免动物接触测定物和测定物的摄入，吸收。在接触时期结束时，剩余的测定物应被擦净，使用适量的水或其他适合的溶剂，避免引起已存的反应的变化和损害表皮的完整。一般的接触时间是4小时。如果预料测定物会产生坏疽（即产生腐蚀），那么应缩短接触的时间（如1小时或30分钟）。如果测定物产生的对皮肤的严重毒性不能被排除，应使用单一动物作以下测定，将三份测定物同时涂于一只动物上。3分钟后擦洗去第一份测定物。如果皮肤没有严重的反应，1小时后擦洗去第二份测定物。如果在这期间的观察表明4小时的接触是需要的和可受控制的，那么4小时后擦洗去第三份测定物，此时反应升级。在这个情况下（即4小时的接触时间是需要的），要另外使用至少2只动物完成实验，除非此实验是不人道的（例如在4小时的接触时间内观察到坏疽的产生）。如果在1小时或3分钟内观察到严重的皮肤反应（例如坏疽），测定应立即结束。更长的接触时间应在特定的条件下（例如人的使用和接触的预期方式）进行。1.6.3.1.观察和评级观察动物产生的红斑和浮肿，在洗去测定物的60分钟，24，48，72小时后对动物产生的反应进行评级。根据表一记录和对动物皮肤发炎评级。如果在72小时内可消除的反应未完全消除，则可适当延长观察时间。除了观察发炎，还应详细记录任何严重的损害如腐蚀（表皮的不可消除的损害）和其它毒性作用。对折叠的皮肤使用一定的技术如组织病理学测定来查清被测定物污染而产生的可疑的反应和结果。2.实验数据实验数据应以表格的形式列出，列出每一只动物在观察阶段发炎产生红斑和浮肿的程度。记录所有严重的损伤，发炎性,可消除的反应或被腐蚀的程度和特征，以及其它毒性反应。3.实验结果报告3.1.实验结果报告可以的话，实验结果报告应包括以下内容：- 动物种类，族系，来源，环境条件，食物等;- 实验条件（包括有关的化学物质的物理化学特性，预处理和清洗皮肤方法，绷带类型（半封闭或全封闭式）;- 列表记录每只动物在每个观察阶段（如洗去测定物的1，24，48，72小时等）的炎症反应；- 描述所有观察到的严重损伤，包括受腐蚀；- 描述观察到的发炎程度和特征，所有组织病理学上的发现；- 描述非皮肤发炎的所毒性性反应；- 结果讨论；- 结果说明；3.2.实验结果评估和解释见描述部分B(D)。4.参考文献见描述部分B(E)。 附录 表格：皮肤反应程度等级 红斑和焦痂的形成无红斑 0极小的红斑（几乎不可见） 1明显红斑 2