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果蝇眼色性状的伴性遗传王伊丹(中山大学生命科学学院2013级生物技术与应用基地班 广州 510275)【摘要】通过果蝇眼色的实验验证伴性遗传的规律并正确认识伴性遗传正反交的差别。采用黑腹果蝇(D.melanogaster)野生型(红复眼品系)wild type(+)18#和突变型(白复眼品系)white eye(W)22#进行正反交杂交,收集F1,F2代果蝇并统计总数及雌雄个体中眼色各性状数量。实验结果可知果蝇的眼色决定基因位于X染色体上,符合伴性遗传规律。【关键词】伴性遗传;正反交;眼色;性别黑腹果蝇(D.melanogaster)是生物学研究中最重要的模式生物之一,它在遗传的染色体理论建立中起到非常重要的作用1。很多生物中都有性染色体,果蝇也不例外,其性染色体属于XY型,雄蝇为XY,为异配性别;雌性为XX,是同配性别。通过果蝇眼色性状的遗传学研究可以观察到果蝇眼色性状的遗传与性别有密切关系,因此知道控制眼色的基因位于X染色体上且存在正反交的区别。本文通过对黑腹果蝇野生型红色复眼与突变型白色复眼个体进行杂交,通过F1,F2代的数目及性状利用卡方检验验证伴性遗传的规律。1. 实验材料与方法 1.1实验动物黑腹果蝇(D.melanogaster)野生型(红复眼品系)wild type(+)18#和突变型(白复眼品系)white eye(W)22#由我院提供。 1.2实验用培养基本次实验采用麦麸,玉米粉培养基。配制方法:将琼脂,红糖加入水中煮沸至完全溶解;用少量水把麦麸,玉米粉调至糊状,倾入中不断搅拌,连续煮沸20min;加入丙酸,再煮几分钟停火;趁热加入酵母并搅拌均匀2;立即分装至洁净的培养试管中,每管培养基厚度约为0.5-1.0cm3。 1.3果蝇F1,F2代眼色各性状数目的测定挑选和收集18#和22#品系处女蝇各3-4只,雄蝇同样各3-4只。A杂交组合:18#()+和22#()W各挑选3-4只,放在同一培养瓶内,贴上标签。B杂交组合:22#()W和18#()+各挑选3-4只,放在同一培养瓶内,贴上标签。将配好的A,B杂交组合放在25培养箱中培养,7天后见到F1幼虫出现,即倒干净亲本果蝇(成虫)并处死。再过7天,观察F1成虫性状,把观察结果记录, 注意分析正反交后代眼色和性别的关系。A,B组合各挑选3-5对成虫转入新的培养瓶中饲养。7天后倒干净F1的成虫并处死。再过7天F2成虫出现,把成虫转到另一空瓶,麻醉后观察眼色和性别,记录结果,可连续收集7天的数据。 1.4统计分析方法统计F2代正反交组合中雌雄果蝇各性状数量,利用卡方检验,计算2值,查2表得到P值,分析说明观察值与理论值是否无显著差异。2.实验结果表格 1 F1 A组合(正交)+ WY观察结果观察结果 数量红眼+白眼W红眼+白眼W观察值470530理论值470530观察结果 数量红眼+白眼W红眼+白眼W观察值20只16只42只0只理论值18只18只42只0只表格 2 F1 B组合(反交)WW +Y观察结果观察结果 数量红眼+白眼W红眼+白眼W观察值040460理论值040460表格3 F2 A组合(正交)数量情况表格 4 F2 B组合(反交)数量情况观察结果 数量红眼+白眼W红眼+白眼W观察值27只29只32只26只理论值28只28只29只29只理论结果为(1) A(正交)组合F1代均为红眼;F2代雌性均为红眼,雄性出现白眼,红白眼个体数目比例为红眼:白眼=1:1。(2) B(反交)组合F1代中雌蝇均为红眼,雄蝇均为白眼;F2代中雌雄蝇均出现白眼果蝇,红白果蝇比列均为1:1。3. 实验结果分析与讨论 3.1 卡方检验正交组合情况下表现型有3种,则n=3,自由度=n-1=22=(观察值-理论值)2/理论值,计算可得正交的2=0.444(保留小数点后三位)。反交组合情况下表现型有4种,则n=4,自由度=4-1=3,2=0.692(保留小数点后三位)。 查2表(见图2)。 图 2 卡方检验查询表格查表后可知,正交时,2=0.444,自由度=2,因0.4440.05;反交时,2=0.692,自由度=3,因0.6920.05 。无论正交还是反交,P值均远远大于0.05,可知实验所得数据与假设预期相符,果蝇眼色的伴性遗传规律得到验证。 3.2 分析与讨论在统计学中,卡方检验是常用的一种假设统计分析的手段,一般用于分析数据是否符合预期的分布2。在本次果蝇的伴性遗传实验中无论正交还是反交,计算查询所得
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