露水草中的植物甾酮类成分.doc

第 18 卷 第 4 期 沈 阳 药 科 大 学 学 报2 0 0 1 年 7 月 Journal of Shenyang Pharmaceutical University文章编号 : 1006 - 2858 (2001) 04 - 0263 - 03露水草中的植物甾酮类成分谭成玉 , 王金辉 , 李 霞 , 孟大利 , 李 铣( 沈阳药科大学中药学院 , 辽宁 沈阳 110016)摘要 : 为研究露水草 ( Cyanotis arachnoidea C. B. Clarke) 中的化学成分 ,将露水草的乙醇提取液经中性 Al2 O3 柱色谱 ,制备性薄层色谱 ,高效液相色谱分离得到 3 种植物甾酮类成分 ,根据理化常数和波谱数据分析进 行 结 构 鉴 定 ,3 个 化 合 物 分 别 为 罗 汉 松 甾 酮 C ( podecdysone C) ( 1 ) , 土 克 甾 酮, 2关键词 : 露水草 ; 罗汉松甾酮 C ; 土克甾酮中图分类号 : R 932 文献标识码 : A露水草 ( Cyanotis arachnoidea C. B. Clarke) , 微熔点 测 定 仪 测 定 ( 未 校 正 ) ; 薄 层 色 谱 用 硅 胶又名珍珠露水草 ,鸡冠参等 ,系鸭趾草科兰耳草属多年生草本植物 ,广泛分布于云南省 ,具有补虚 , Al2O3 (中性) 为上海新诚精细化工有限公司生产 ;除湿 , 舒筋活络之功效 1 。本实验通过 Al2O3 柱色谱 ,制备性薄层色谱 ,高效液相色谱 ,从露水草 色谱柱为 ODS (20 mm i. d. , 25 cm) 。的乙醇提取物中分离得到 3 种植物甾酮类成分 ,2 提取与分离COS Y、HMBC 、HMQC 鉴定分别为罗汉松甾酮 C(podecdysone C) (1) ,土克甾酮 (t urkesterone) (2) , 回收乙醇 ,得浓缩液 。用乙酸乙酯 、正丁醇萃取 ;取乙酸乙酯萃取物 ,行 Al2O3 ( 中性) 柱色谱 ,以氯分离得到 (结构见图 1) 。1 仪器与材料脱部分经 制 备 性 薄 层 色 谱 ( 固 定 相 : 硅 胶 GF254 ;甲醇洗脱部分经制备性高效液相色谱 ( ODS ,甲醇/ 水 = 31 69 , 242 nm 检 测 ) 分 离 得 化 合 物 2(5 mg) 。Fig. 1 The compounds isolated from cya notis a rachnoidea C. B. Clarke收稿日期 :2000 - 11 - 14 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. Vol118 No14J ul12001 p1263( Turkesterone) (2) 2蜕皮甾酮 (2ecdysone) (3) 。其中化合物 1 、 为从该植物中首次分离得到 。(2002300 目) 为 青 岛 海 洋 化 工 厂 生 产 ; 柱 色 谱 用HPL C 采用 Shimadzu SPD26A 高 效 液 相 色 谱 仪 ,经 UV 、 ESI2MS 、1 HNMR 、13 CNMR 、1 H21 H露水草 (215 kg) 用 75 %乙醇加热回流提取 ,2蜕皮甾酮 (3) ,其中 ( 1) 、( 2) 为从该植物中首次仿2甲醇梯度洗脱 ,氯仿2甲醇 ( 4 1) 洗脱部分经乙酸乙酯2甲醇重结晶 ,得化合物 3 (200 mg) ;31 洗谱 Shimadzu光光度计 ; 核磁 :BRU KER ARX 300 型 流动相 :氯仿2甲醇 = 5) 得化合物 1 (10 mg) ; 以核磁共振光谱仪 ( TMS 为内标) ; ESI2MS 质谱用L CQ2液质联用仪测定 ; 熔 点 用 Yanaco M P2S3 显264 沈 阳 药 科 大 学 学 报第 18 卷(75 M Hz ,C5D5N) :数据见表 1 。化 合 物 1 : 白 色 粉 末 , mp : 173 175 化 合 物 2 : 白 色 结 晶 , mp : 172 174 其具有甾体母核 ,UV 谱在242 nm处有最大吸收 。1物的分子式为 C27 H44O8 。氢谱中给出 5 个甲基单合其他碳 、 信号 ,推测该化合物为植物甾酮类成分 。将该化合物的碳谱 、氢谱数据与蜕皮甾酮的 键碳信号 。结合其他碳氢信号 ,推测该化合物为数据 2 比较 ,发现在1 HNMR中少了一个甲基单峰基 。将该 化 合 物 的 碳 谱 数 据 与 的 筋 骨 草 甾 酮 CC19的化学位移基本一致 ,说明化合物的甾体母核甾酮一致 。根据以上推测 ,确定化合物 2 的结构26 位 碳 信 号 , 综 上 , 推 断 化 合 物 的 结 构 为氢据与文献中 podecdysone C 的碳谱数据 3 比较基 与文献 中 土 克 甾 酮 ( t urkesterone) 的 数 据 2 比 较本一致 。因此鉴定其为 podecdysone C 。13 化 合 物 3 : 白 色 针 晶 ( EtOAc/ MeOH ) , mp :明其具有甾体母核 ,13 CNMR (75 M Hz ,C5D5N) 中Fig. 2 The HMBC correlation of compound 11合其他碳氢信号 ,推测该化合物为植物甾酮类成13中蜕皮甾 酮 的 13 CNMR 数 据 2 对 照 基 本 一 致 , 所 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. (2 H , s , H226 ) , 1147 ( 3 H , s , H227 ) 。13CNMR3 结构鉴定( MeOH) 。Liebermann2Burchard 反 应 阳 性 , 表 明 其具有甾体Liebermann2Burchard中给出准分表 明子峰 497 M + H + , 结合碳谱 、 谱 ,推测该化合HNMR中 , 高 场 区 共 给 出 4 个 甲 基 单 峰 信 号(1158 , 1147 , 1121 , 1106 ) , 一 个 烯 氢 质 子 信 号61其,70 有,68个 ,681CNMR个、给不,77和 ,761信 氢质子信号其中有1 个 ,br氧碳。碳谱84共给,771烯信号 (20315) 及双键碳信号 (16612 ,12117) ,结 7618 ,6915 ,6819 ,6814 ,6812) ,一个、 不饱和羰基碳信号 20319 ,以及 16413 和 12213 处的双植物甾酮 类 成 分 。由 6814 ,6812 的 2 个 连 氧且在 多出 碳区多了一个碳信号 推测可能是侧 碳信号 推测该化合物存在 的结构中存在2基羟链发生处1的 质 处的碳信号有远程相关,2488 7 ,3,11,14数,204R相 比R2发 现 该 化 合 物 的 基23的88 的氢信号为70有位碳上的氢信号 ,以推中为 皮甾酮的进行比较一致 同时将其碳谱数据与 蜕为 2,3,11,14,20 R , 22 R2六 羟 基2胆 甾272烯2podecdysone C 2,3one),20R该,22R合,262hepta谱 数 62cholest,3,11one) 将该化合 ,25的hepta2hydrox2基本一 致 , 故 鉴 定 该 化 合 物 为 土 克 甾 酮 ( t urkes2terone) 。1(HNMR(H300,)M Hz35 5DHN 32226 , 27H 。CNMR (75 M Hz ,C5D5N) :数据见表 1 。240 242 , Liebermann2Burchard 反 应 阳 性 , 表共给出 27 个碳信号 ,由 20315 的不饱和羰基碳信号和 16611 和 12117 处的双键碳信号 ,并结HNMR (300 M Hz , C5D5N ) : 4118 ( 1 H , m ,H22) ,4122 (1 H ,m ,H23) ,3101 (1 H ,dd ,H25) ,6125分 。将该化合物的1 HNMR 、 CNMR数据与文献(1 H ,br1s ,H27) ,3159 ( 1 H ,m , H29) ,3100 ( 1 H ,m ,H217) , 1158 ( 3 H , s , H221 ) , 1121 ( 3 H , s , H218 ) ,1106 ( 3 H , s , H219 ) , 3192 ( 1 H , dd , H222 ) , 3187 300 定Hz 化D合 物61 蜕 皮,br甾s酮H。 1 HNMR氢第 3 期谭成玉等 :露水草中的植物甾酮类成分 265C5D5N) :数据见表 1 。13No 1 2 3 No 1 2 31 152 163 174 185 196 207 218 229 2310 2411 2512 2613 2714mone activity from t he bark of Podocarpus elatus J .Experientia , 1973 ,27 (7) :782 - 784. 4 Jaroslav P , Milos B , Karel V , et al . Ecdysteroids fromt he roots of Leuza cart hamoides J . Phytochemistry ,ence and Technology Press , 1977. 2736. 2 果德安 ,楼之芩 ,高从云. 祁州漏芦蜕皮甾酮类化合物致谢 植 物 材 料 由 本 校 许春泉 高 级 工 程 师 鉴 定 , UV 、 3 Galbrait h M N , Horn D H S , Middleton E J , et al .noi dea C. B. Clarke( College of T raditional Chinese Medicines , S henyang Pharm aceutical U niversity , S henyang 110016 ,China)matography (including Al2O3 、terones were isolated and elucidated by UV NMR and chemical met hods. These were podecdysone C (1) ,for t he first time.Key words : Cyanotis arachnoidea C. B. Clarke ; podecdysone C ; t urkesterone 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. (3 H ,s ,H218 ) ,1107 (3 H ,s ,H219) ,1157 ( 3 H ,s , H221) , 1137 ( 6 H , s , H226 , 27 ) 。13 CNMR ( 75 M Hz ,Tab. 1 The CNMR data of compounds 1 、 in C5D5 N)2 3(3716 3915 3810 3210 3119 32106812 6814 6812 2115 2116 21156811 6812 6811 5012 5010 50113215 3219 3215 1719 1819 17195114 5215 5114 2416 2419 241520315 20319 20314 7619 7618 761912117 12213 12117 2117 2116 211716612 16413 16611 7717 7715 77163415 4218 3415 2618 2715 27153817 3919 3817 3810 4216 42172112 6819 2111 7216 6915 69163118 4412 3118 7019 3010 30104812 4812 4811 2415 3011 30118412 8413 8412Structure of Podecdysone C ,a steroid wit h molting har2参考文献 : 1 Jiangsu New Medicine College. The Dictionary of Tradi2tional Chinese Medicines M . Shanghai : Shanghai Sci21994 ,37 (3) :707 - 714.化学成分研究 J . 药学学报 , 1991 ,26 (6) :442 - 446.NMR 光谱由本校测试中心李文 、 沂代测 。Constituents of phytosterone in Cya