3 探究培养液中酵母菌数量的动态变化.doc

探究培养液中酵母菌数量的动态变化一、实验目的：1通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，尝试建构种群增长的数学模型。2用数学模型解释种群数量的变化。3学会使用血球计数板进行计数。二、实验原理：1在含糖的液体培养基（培养液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群，通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。2养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素。3酵母菌计数方法：抽样检测法。先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻，待细菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。注意：从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次。思考题1：从试管中吸取培养液进行计数之前，为什么要将试管轻轻振荡几下呢？ 三、方法步骤： 提出问题作出假设讨论探究思路制定计划实施计划按计划中确定的工作流程认真操作，做好实验记录分析结果，得出结论将记录的数据用曲线图表示出来。案例：（一）提出问题：酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？思考题2：你还能提出哪些有价值的问题？ （二）作出假设（三）制定计划:培养一个酵母菌种群通过显微镜观察，用“血球计数板”计数7天内10ml培养液中酵母菌的数量计算平均值画出“酵母菌种群数量的增长曲线”（四）实验操作：1配制无菌马铃薯培养液和酵母菌母液；2预先设计分装：先每次用10mL刻度吸管吸取10mL培养液到A组和B组试管，用另一支10mL刻度吸管吸取10mL无菌水到C组试管。待分装完毕，每支试管加塞后把试管扎成捆后，然后用记号笔注明培养基的名称、组别、日期。3灭菌：思考题3：如何灭菌？ 4接种菌种：用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每支试管中加入。（注意滴加量不要太多，避免初始菌数过多。）5培养：将 A、C试管置于 28的恒温箱中培养。将 B试管置于5的恒温箱中培养。（5的恒温箱可由某些型号冰箱保温室设定5时代替。）6计数和记录：每天取样时间大体一致，每次每组按序号取一支试管。计数过程中一定要遵守无菌操作规范，取样的吸管要干净且分开使用，每次取样前要试管振荡摇匀。显微镜下进行细胞计数，后立即将数据填到记录表格中。思考题4：本实验需要设计对照组吗？为什么？ 思考题5：本实验需要做重复实验吗？为什么？ 思考题6：如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？ 思考题7：对于压在小方格界线上的酵母菌，应当如何计数？ （五）分析结果，得出结论；将记录的数据用曲线图表示出来。思考题8：怎样记录结果？记录表怎样设计？结果分析：空间、食物等环境条件充裕的情况下，酵母菌种群数量呈现“J”型增长。在空间、食物等环境条件有限的情况下，刚接种到培养基上，种群数量增长缓慢；第二个阶段种群数量呈指数增长；第三个阶段种群数量达到最大并处于稳定状态，即达到K值；第四个阶段种群数量显著下降。答案思考题1：使酵母菌分布均匀思考题2：酵母菌种群的数量是怎样随温度变化的？酵母菌种群的数量是怎样随PH变化的？思考题3：高压蒸汽灭菌法思考题4：不需要另外设计对照组，本实验在时间上已经构成了自身前后对照思考题5：需要，为了提高实验数据的准确性思考题6：增加菌种培养液的稀释倍数思考题7：只计相邻两个边及其顶