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迈克试剂标准操作程序（SOP） 迈克试剂标准操作程序(SOP)试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） assay Reagent kit by Arsenazo method 适用于： 日立系列自动生化分析仪 四川省迈克科技有限责任公司 Sichuan MAKER Science Technology CO.,Ltd 四川省迈克科技有限责任公司编制试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪目 录1.临床意义1.1医学决定水平2.检测原理3.样品准备3.1样品3.2样品稳定性4试剂盒4.1试剂盒组成4.2试剂准备4.3试剂稳定性4.4 试剂盒订货指南5.操作步骤5.1检测参数设置5.2校准5.2.1校准物5.2.2校准物准备5.2.3校准物稳定性5.2.4校准间隔5.2.5校准物溯源性5.2.6校准物订货指南5.3质控5.3.1质控物5.3.2可接受性判定5.3.3质控物订货指南6.交叉污染7方法学特性7.1线性范围7.2精密度7.3灵敏度7.4抗干扰能力7.5抗凝剂的影响8.方法的可溯源性9.参考值范围10安全性和注意事项11技术服务12主要参考文献试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪1. 临床意义人体内的钙，约99以上存在于骨骼内。血液内的钙，全部存在于血清中。血清中的钙一部分为可扩散性钙,能进入组织间质和脑脊液，对神经和肌肉的兴奋性有影响。另一部分为非扩散性钙，能与血清中的蛋白质结合。血清钙的检测见于甲状旁腺功能亢进（伴低血磷）、甲状旁腺功能减退（伴高血磷）、骨肿瘤、大量应用维生素D治疗、婴儿手足搐溺症、维生素D缺乏症、引起血清白蛋白减少的疾病（恶性肿瘤、严重肝病等），慢性肾功能衰竭（伴高血磷）。1.1医学决定水平1.75mmolL 低于此值常发生痉孪。应根据血清白蛋白的浓度考虑所应采取的治疗措施。2.75mmolL 高于此值，应采取诊断措施，对高钙血症进行鉴别诊断，首先要考虑到甲状旁腺功能亢进。3.38mmolL 超过此水平，患者会出现中毒症状，出现高钙血症性昏迷。要采取有效的治疗措施。2. 检测原理钙+偶氮胂蓝色复合物在碱性条件下，样品中钙与偶氮胂作用生成蓝色复合物，其颜色深浅与钙浓度成正比，与经过同样处理的钙校准液进行比较，即可计算出样品中钙含量。3. 样本准备3.1样品本试剂盒用于体外检测血清或血浆中总钙（Ca）的含量。样品为空腹血清或血浆（0.1mg肝素可抗凝1.0ml血液）。样品应在低温条件下运输保存。3.1样品稳定性在2小时内分离血清/血浆，分离后的样品在室温避光密闭保存可稳定24小时，28避光密闭保存可稳定7天, -1520避光密闭保存可稳定6个月，但不可反复冻融。4. 试剂盒4.1试剂组成：R1： 检测试剂1Tris-HCl缓冲液 0.2mmol/LR2： 检测试剂28-羟基喹啉 4.0mmol/L偶氮胂 80mmol/LCal.： 钙校准液 2.50mmol/L4. 试剂准备：即用型液体双试剂,开瓶装载即可使用。4.3试剂稳定性： 试剂密闭避光贮存可稳定12个月，开瓶上机稳定30天。4.4试剂盒订货指南货号产品编码规格包装瓶型AE01G7010105001717R1 60ml2 R2 60ml27170瓶型AE01G6010105001706R1 90ml1 R2 90ml17060瓶型AE01H9010105001702R1 50ml3 R2 50ml37020瓶型AE01F0010105001200R1 100ml1 R2 100ml1通用瓶型试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪5.操作步骤5.1 标准检测参数设定： 5.1.1 日立7060分析仪检测参数TestCa & Test NameCa Unitmmol/LData ModeOn BoardReport NameCa Control Interval 1000Instrument Factor (Y=aX+b) a b Expected Value Expected Value Age(M)(F) 100 Y2.17-2.752.17-2.75 - 100 Y2.17-2.752.17-2.752.17-2.752.17-2.75Technical Limit 0.00 -5.00 - STDConc.Pos.SamplePre.Dil.Calib.Lot No.QualitativeNo (1)0.00W 2 0 0999000001 (1) 0 (2)2.50# 2 0 0 #000002 (2) 0 (3) 010 0 0000000000(3) 0 (4) 010 0 0000000000(4) 0 (5) 010 0 0000000000(5) 0 (6) 010 0 0000000000(6) 0 TestCa Assay Code2Point End 10 Wavelength(2nd/Primary) /660Assay Point 16- 31- 0- 0DiluentW S.Vol.(Normal) 3 0 0 S.Vol.(Decrease) 50 3 50 S.Vol.(Increase) 6 0 0 ABS. Limit21500 IncreaseProzone Limit UpperReagentT1225 0 & T2 0 0 T3225 0 & T4 0 0 Calibration TypeLinear 2 2 0 0 Auto Time OutBlank 0SD Limit999.9Span 0Duplicate Limit 250 2 Point 720Sensitivity Limit 0Full 0S1 ABS Limit 2000 6500Compensated Limit 注：“&”表示用户自定义通道号； “#”表示用户自定义校准液位置号试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2 日立7170分析仪检测参数 5.1.2.1 7170屏幕界面1试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2.2 7170屏幕界面2试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2.3 7170屏幕界面3 试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2.4 7170屏幕界面4注：“&”表示用户自定义通道号； “#”表示用户自定义校准液位置号试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.3 日立7020分析仪检测参数5.1.3.1 7020屏幕界面仪器菜单界面项目名称NO.界面项目Ca1Test Name Ca 2Assay Code (Mthd)2Point End3Assay Code (Test) 0 4Raction Time 10 5Assay Point 1 17 6Assay Point 2 34 7Assay Point 3 0 8Assay Point 4 0 9Wave Leng (SUB) 0 10Wave Leng (MAIN) 660 11Sample Volume 3.0 12R1 Volume 225 13R1 POS & 14R1 Bottle Size 大 15R2 Volume 16R2 POS 17R2 Bottle Size 18R3 Volume 225 19R3 POS & 20R3 Bottle Size 大 21Calib. Type 线性 22Calib. Type (Wght) 0 23Calib. Conc.1 0.00 24Calib. Pos. 1 99 25Calib. Conc.2 2.50 26Calib. Pos. 2 # 27Calib.Conc. 3 28Calib. Pos. 3 29Calib. Conc. 4 30Calib. Pos. 4 31Calib. Conc. 5 32Calib. Pos. 5 33Calib. Conc. 6 34Calib. Pos. 6 35S1ABS 36K Factor 37K2 Factor 38K3 Factor 试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪续上表39K4 Factor 40K5 Factor 41A Factor 42B Factor 43C Factor 44SD Limit 999.9 45Duplicate Limit 250 46Sens Limit 0 47SIABS Limit (L) 2000 48SIABS Limit (H) 6500 49ABS. Limit 0 50ABS. Limit (D/I) 增加 51Prz. Limit 52Prz. Limit(U/D) 53Prz.(End Point) 54Expect Value (L) 2.17 55Expect Value (H) 2.75 56Instr.Fact.(a) 57Instr.Fact.(b) 58Key setting 注：“&”表示用户自定义通道号； “#”表示用户自定义校准液位置号 试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪5.2校准5.2.1校准物 使用迈克科技有限责任公司的钙校准液（商品名为Calcium Calibration Liquid，Ca-CL）进行两点校准或使用迈克科技有限责任公司生产的多项液体校准血清（商品名为Muti-Calibration Serum，M-CS）进行两点校准。5.2.2校准物稳定性迈克科技有限责任公司的钙校准液，在28可密闭保存可稳定12个月；迈克科技有限责任公司的多项液体校准血清-15-20可稳定24个月，28可密闭保存可稳定5天。5.2.3校准物准备 钙校准液和多项液体校准血清置室温放置15分钟,混匀后即可使用，混匀时应避免气泡产生；用后及时冷藏保存。5.2.4校准间隔 迈克钙偶氮胂法检测试剂具有良好的开瓶稳定性,一批试剂间28贮存30天无瓶间差，我们推荐校准间隔为30天。当试剂批号更换、仪器维修或光源等配件更换后应重新进行校准。5.2.5校准物溯源性迈克钙校准液和多项液体校准血清是采用AMRESCO公司提供的钙原料，用万分之一电子天平准确称量，并用对特定生物缓冲液或经稳定化处理的人血清（来源同迈克液体质控血清）准确定容而成。钙的标示值是利用迈克科技有限责任公司的钙偶氮胂法检测试剂和国家一级标准物质：人血清无机成分分析标准物质GBW09135及迈克科技有限责任公司的钙偶氮胂法检测试剂在全自动生化分析仪上相比对所确认。5.2.6校准物订货指南品名货号产品编码规格包装瓶型Ca-CLBS12050102190120051ml5塑 料 瓶M-CSBS02150102190020153ml5塑料滴瓶5.3质控5.3.1质控物 使用迈克科技有限责任公司生产的液体生化质控血清（商品名为：Auto-Norm serum ，ANS、Auto-Pathology serum ，APS）。迈克液体生化质控血清来源于健康正常人血清，其中HIV、HCV、HBV传染性指标经国家食品和药品监督管理局（SDA）批准的方法检测，结果均为阴性，但不排除存在潜在感染的危险性，使用时应视病人样品同等对待。血清添加物为高纯度钙，反应特性接近临床新鲜血清，基质效应小。迈克液体生化质控血清采用活性物质稳定技术，确保钙的稳定性。血清中不含剧毒物质（如NaN3、硫柳汞等），对环境不造成污染,且不含蛋白酶水解抑制剂，确保血清活性成份的反应特性。钙的范围值是依据迈克钙偶氮胂法检测试剂和钙校准液，采用迈克试剂标准操作参数在全自动生化分析仪上对其进行检测,将检测结果进行统计学处理后确定。5.3.2可接受性判定质控血清的检测值应在给定质控范围或符合用户室内质控规则。5.3.3质控物订货指南品名货号产品编码规格包装瓶型ANSB003500102000030505ml10塑料滴瓶APSB004500102000040505ml10塑料滴瓶6.交叉污染本试剂具有良好的抗交叉污染能力。不对迈克其它试剂造成污染，且不受迈克其它试剂的污染。试剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪7.方法学特性7.1线性范围：0.005.00mmol/L。样品中的Ca超出线性范围，可采用减量操作，或用蒸馏水按比例稀释后检测。7.2精密度：对迈克液体生化质控血清1例、临床标本4例进行50次重复检测，检测结果如下。 批内精密度 批间精密度血清检测次数均 值（mmol/L）标准差变异系数（CV%）血清检测次数均 值（mmol/L）标准差变异系数（CV%）I501.980.052.52I501.780.073.93II502.120.052.35II502.250.073.11III502.530.041.58III502.570.062.33IV503.780.051.32IV503.890.071.79V504.920.051.01V504.970.081.607.3灵敏度：本试剂最低检测限为0.0mmol/L,计算是由零浓度的钙样品平行检测20次,取其均值加3个标准差而得来。7.4抗干扰能力：血红蛋白1g/L，维生素C30mmol/L,脂浊10%（以甘油三酯含量表示相当于20mmol/L）时对检测结果无影响。7.5抗凝剂的影响常规抗凝剂肝素不影响本法对钙的检测，但枸橼酸钠、EDTA-Na2、EDTA-K2、草酸盐、NaF类抗凝剂要影响本法对钙检测，应避免使用。8.方法学可溯性: 迈克钙偶氮胂法检测试剂（Y）与罗氏公司钙检测试剂（X）比对： 回归方程：r=0.99,Y=0.999X + 0.13, n=50检测范围：0.005.00mmol/L9.参考值范围2.17 2.75 mmol/L，建议各实验室建立自己的参考值范围。10.安全性和注意事项血清等样品可能含有乙肝等病毒,有被感染的危险性,采血时应采取防范措施；本试剂含有NaN3应避免与铅铜等金属接触；试剂反应后所产生的废液及使用后难降解的包装材料应集中收集后交当地环境废物处理站处理。11.技术服务有关产品技术咨询请与本公司技术开发部联系,电话:关产品质量投诉请与本公司质管部联系,电话:于新装机用户，本公司可提供技术支持，电话剂项目： 钙偶氮胂法检测试剂盒Calcium（Ca） Assay Reagent Kit by Arsenazo Method 适用于： 日立系列自动生化分析仪12.主要参考文献12.1 韩志钧，等. 临床化学常用项目自动化分析法. 辽宁科学技术出版社，1991年第一版：316.12.2 National Committee for Clinical Laboratory Standards, Precision Performance of Clinical Chemistry Devices, 2nd Edition; Tentative Guideline, NCCLS publication EP5-T2, Villanova, PA (1992).12.3 Baurer, P., Analytical Biochemistry 110:61-72 (1981).12.4 Michaylova, V., Anal. Chem. Acta 53:194-198 (1971).12.5 Thomas, M.V., Arsenazo III forms 2:1 Complexes with Calcium and 1:1 Complexes with Magnesium Under Physiological Conditions, Biophys. J. 25:541-548 (1979).12.6 Tietz, N. W., Specimen Collection and Processing; Sources of Biological Variation, Textbook of ClinicalChemistrJ4 2nd Edition, W. B. Saunders, Philadelphia, PA (1994).12.7 National Committee for Clinical Laboratory Standards, Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens; Approved Guideline, NCCLS publication H18-A, Villanova, PA (1990).12.8 National Committee for Clinical Laboratory Standards, Routine Urinalysis and Collection, Transportation and Preservation of Udne Specimens; Tentative Guideline, NCCLS publication GP16-T, Villanova, PA(1992).12.9 Tietz, N. W., Clinical Guide to Laboratory Tests, 2nd Edition, W. B. Saunders, Philadelphia, PA (1990).12.10 National Committee for Clinical Laboratory Standards, How to Define, Determine, and Utilize ReferenceIntervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline, NCCLS publication C28-A, Villanova, PA (1994).12.11 Henry, J. B., ed., Clinical Diagn