痰脱落细胞学.doc

痰脱落细胞学检查的标准操作程序(SOP)实验室名称项 目编 号制定日期细胞室痰脱落细胞学检查*年*月*日【目的】指导痰脱落细胞学检查。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【检验的适应证】早期诊断支气管肺癌。【痰液的收集】目前痰液检查对肺癌的阳性确诊率约为6080，痰液检查的成败，关键在于痰液标本的采集。（1） 留痰最好在晨起进行，留痰前应漱口，祛除口水和鼻腔分泌物等，并应将储留在气管内的陈腐的痰先行咳出弃去。（2） 留痰时，应嘱患者从肺深部咳嗽，此时咳嗽的声音低沉。咳出的痰液一般较粘稠，常可牵拉成细长丝状。如在支气管镜检查时，以尼龙毛刷刷取支气管内分泌物检查，则阳性率更高。而且可根据取材部位准确定位。不是深咳嗽的痰，一般阳性率极低。（3） 每次送检痰液至少应有56口，总量不得少于5毫升。而且应连续送痰三次以上。（4） 痰液标本应在咳痰后1小时以内送检，以免痰内细菌及唾液酶破坏和溶解病变细胞。（5） 如患者痰液过少，或患者无自发性咳嗽，可考虑用下列方法留取痰液： 咳嗽前嘱患者稍事活动或进行数次深呼吸。 留痰前用祛痰剂23天。 既往有吸烟史者，留痰前可令患者吸烟12支，以刺激引起咳嗽。 【痰液涂片注意事项】 涂片亦为痰液检查成败关键之一。其注意要点为：（1） 应选痰液内白色或灰白色细丝状粘痰或白色颗粒涂片。（2） 如痰内有血，应取混于痰内的暗红色血丝涂片。陈旧血块处细胞学检查阳性率极低。（3） 黄色浓痰和咖啡色血痰时，应取分泌物较清淡及浅色者涂片。（4） 每次应取痰液的各部分制成4张以上的涂片，逐片检查，以防遗漏。【仪器与试剂】1.仪器：光学显微镜。2.试剂：瑞氏-姬姆萨复合染色液液：取瑞氏染粉1g、姬姆萨染粉0.3g，置洁净研钵中，加少量甲醇（分析纯）研磨片刻，吸出上层染液，再加少量甲醇继续研磨，如此连续几次，共用甲醇500ml，收集于棕色玻璃瓶中，每天早、晚各振摇3分钟，共5天，再存放一周即可使用。液：PH6.4-6.8磷酸盐缓冲液磷酸二氢钾（无水）6.64g磷酸氢二钠（无水）2.56g加少量蒸溜水溶解，用磷酸盐调整PH，加水至1000ml.【染色】1涂片编号、登记。2. 染色程序：1 涂片置染色架上。2 加液染液3-5滴于涂片上，静止1分钟（天热时间可缩短）。3 然后加液磷酸盐缓冲液3-10滴，使两液混匀，约10-15分钟。4 用水缓缓冲洗涂片，待干镜检。【观察方法】在机械移动器操纵下，先以低倍镜常规自左上角至右下角循序地逐个视野地进行观察，遇可疑处再换高倍镜仔细观察。【细胞学诊断】（1） 鳞状细胞癌:来源于支气管上皮细胞鳞状化生，多为非角化鳞癌，角化型较少。鳞癌细胞大小、形状各异，通常分散，也可成群。可见典型的蝌蚪状、长梭形细胞，多数仍为不规则圆形，边缘皱折或有双边。胞浆由于角化呈粉红折或橘红色。未角化细胞胞浆嗜碱性染蓝色。核大，大小不一，多为不规则圆形，核浓染，着色不均。偶可见癌珠、枭眼细胞、鬼影细胞（角化癌细胞核残影或仅见碎裂的残核）。（2） 腺癌：如细胞保存良好，具有腺癌的特征。呈腺样、栅栏状或乳头状排列。癌细胞大，圆形或不规则圆形。胞浆嗜碱性，有空泡。核呈圆形或卵圆形，偏心位。核染质浓密，常见核仁。未分化腺癌，癌细胞成团，分界不清，核可重叠。（3） 未分化型肺癌： 小圆细胞癌：癌细胞小，仅约大于淋巴细胞的一倍，紧密排列成片或镶嵌状。核作不规则圆形，核染质致密粒状，浓染。胞浆极少，似裸核。 燕麦细胞癌：来源于支气管粘膜未分化基底细胞，为支气管癌底一特殊类型。癌细胞呈梭形，酷似燕麦，故名。细胞成群平行排列或数行交错排列。核浓染，可见核分裂象。有的病例在同一标本中，可检出较大淡染、多边形细胞群，表明为癌细胞向鳞癌样转变。 大圆细胞型癌：癌细胞大，多呈圆形，但大小形状可不一样，疏散聚集成群。核特大浓染，有时可出现癌巨细胞。 【痰脱落细胞学诊断肺癌应注意的问题】1 对病人极端负责，切实注意每一环节，从标本采集至阅片发报告，每一步骤都要严守操作规程。2 认真阅片，防止漏诊。观察涂片应按一定方向上下移动，对有大量红细胞、中性粒细胞和坏死碎屑背景的涂片应加倍注意，仔细观察，其中的散在癌细胞或小细胞性未分化癌细胞易被误诊为巨噬细胞或淋巴细胞。凡镜下有排列紧密的细胞团，都要在高倍镜下仔细观察。3 对临床和影像学检查高度可疑