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家兔卵巢移植入自体角膜板层模型的建立【关键词】 兔关键词: 兔;角膜;卵巢;移植1 材料和方法 1.1 材料 雌家兔（本校实验动物中心提供）体质量2.02.5kg，双眼正常无病变，卵巢未排卵;试剂200g?L-1 乌拉坦，5g?L-1 丁卡因，绒毛膜促性腺激素（9911172，上海生物化学制药厂）;Alcon板层刀，裂隙灯照像显微镜为德国Opton公司生产. 1.2 方法 取卵巢皮质200g?L-1 乌拉坦麻醉，固定，常规消毒铺单，行剖腹术，取新鲜卵巢组织;同一只家兔用丁卡因滴眼作局部麻醉，在角巩缘内侧上方处用眼科弯剪刀切开结膜，约90，分离结膜及结膜下组织，做角膜板层分离，建立隧道接近瞳孔区，大小5mm4mm;取一小块卵巢皮质，大小2mm3mm，并将其置于角膜板层之间，缝合角膜切口及结膜;术后2.5g?L-1 氯霉素滴眼液点眼，3?d-1 ，po磺胺（0.5g，溶于饮用水中）.次日肌注绒毛膜促性腺激素（250u?kg-1 ）2wk，并于每日常规裂隙灯观察植入家兔角膜内卵巢皮质情况;实验结束后放血处死家兔，摘出实验眼眼球，100mL?L-1 福尔马林固定，常规石蜡切片厚5m，HE染色，OLYMPUS显微镜观察. 2 结果 术后1d结膜水肿，角膜透明，移植卵巢皮质清晰无变化（图1（略）;术后3d结膜水肿消退，植入的卵巢组织及角膜变化不大;术后7d角膜缝合处与组织间有新生血管形成;术后15d移植卵巢皮质表面有红点生成.显微镜下观察，可见角膜组织结构正常;植入卵巢皮质生长良好，未见较严重的组织坏死;卵泡形状规则，发育正常;未见明显免疫排斥反应.所观察到的卵泡大都处在初级卵泡发育阶段，视野中央为一初级卵泡，内部卵母细胞发育良好，其周由一层立方状或低柱状卵泡细胞包裹，卵泡外周可见数层结缔组织构成的卵泡膜（图2，3（略）. 3 讨论 评价药物对卵巢组织的影响通常是经由卵巢的组织学切片来确定的.利用家兔自体卵巢植入角膜，建立角膜培养卵巢皮质的动物模型在国内外文献中尚未见报道.我们的实验证实:卵巢自体移植入眼角膜内可以成活;使用雌激素后可直接观察到植入角膜基质内的卵巢组织出现红点;组织切片观察，证实植入卵巢组织形态结构正常，有的正处在初级卵泡发育阶段.但是未发现黄体，未找到移植卵巢已排过卵的形态学依据，这个问题有待于进一步探讨.本模型能直接观察药物对卵巢的效应，可作为一种较好的动物模型用于实验研究.作者简介: 刘利兵（1957-），男（汉族），山西省太原市人.博士，副教授，主任.Tel.（029）3374764 E （第四军医大学:1 基础部教学实验中心，2 学员旅五大队，3 西京医院眼科，4 西京医院病理科，陕
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