《刺梨良种组培苗繁育技术规程》标准文本（征求意见稿）

DB52/T -200XXXX-XX-XX发布贵州省市场监督管理局 发布XXXX-XX-XX实施刺梨良种组培苗繁育技术规程Tissue Culture Seedling of Rosa roxburghii Fine Varieties Propagation Technical Regulation DB52/XXXX-XXXXDB52贵州省地方标准ICS 65.020.20B051前 言 本标准按照GB/T1.1-2009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写给出的规则起草。本标准附录A为资料性附录。请注意：本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由贵州省林业局提出。本标准由贵州省林业标准化化技术委员会归口。本标准起草单位：贵州省果树工程技术研究中心、国家林业和草原局刺梨工程技术研究中心、贵州省黔南州林业科技推广中心。本标准主要起草人：樊卫国、欧国腾、陈红、潘学军、牛涛、刘少轩。7刺梨良种组培苗繁育技术规程1 范围本标准规定了刺梨良种组织培养繁育过程中的良种选择、组培苗的繁育等方面的操作规程。本标准适用于刺梨良种组织培养繁殖苗木生产。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程NY/T 393-2013 绿色食品 农药使用准则3 术语和定义NY/T 2306界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1刺梨良种 fine varieties of Rosa roxburghii属于Rosa roxburghii Tratt 这一物种的、经人工定向选育的、具有稳定的遗传性状和丰产性及优良品质特征特性的、经省级或省级以上品种审定委员会审定通过的优良刺梨品种。 3.2 组培苗 tissue culture seedling利用刺梨良种组织、器官或细胞在特定培养基上培养再生成植株进一步培养的无性刺梨良种苗木。3.3 外植体 explant从自然生长的活体植物上获取的用于建立植物组培快繁体系的起始材料。3.4 消毒 disinfection通过物理、化学方法去除物体表面大部分有害病原微生物（孢子除外）的过程。3.5 灭菌 sterilization通过物理、化学及一些理化方法杀灭一切微生物（包括孢子等）的过程。3.6 接种inoculation将消毒后的外植体或干净培养材料在无菌条件下接入培养容器内培养基中的过程。3.7 培养基 medium根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求，人工配制的营养基质。3.8 初代培养 explant culture将植物体上分离下来的外植体进行最初培养的过程。3.9 增殖培养 multiplication culture将初代培养诱导产生的培养物重新分割，转移到新鲜培养基上继续培养的过程。3.10生根培养 rootingculture在组织培养中诱导无根组培苗生根、形成完整植株的过程。4 良种选择良种组培苗繁育的品种应是刺梨（Rosa roxburghii Tratt）这一物种的贵农1号、贵农2号、贵农5号、贵农7号刺梨等良种。5 组培苗的繁育5.1 外植体的选择剪切刺梨良种树体上30d 50d梢龄的、未木质化的带芽茎段作为外植体，外植体长度0.3cm 0.5cm。5.2 外植体消毒、灭菌将外植体用自来水冲洗5min 8min，移入75%的酒精中20秒 30秒，置入0.1%的升汞溶液中浸泡5min8min，再用无菌水反复冲洗3次5次。5.3 初代培养将消毒、灭菌好的外植体接种在1/2 MS+GA1.0mg/L+ 6-BA0.5mg/L + NAA 0.1mg/L 的培养基上进行初代培养，诱导腋芽萌发，获得初代芽丛。5.4 增殖培养将初代培养获得的萌芽切取后剪成单芽茎段，转接至MS（NH4NO3减半）+GA 1.0mg /L + 6-BA0.5mg /L 1.0mg /L + NAA 0.1mg /L的培养基上进行芽丛增殖培养。5.5 生根培养将2cm 3cm的增殖芽接种在1/2MS +6-BA0.3mg /L + NAA0.3mg /L + PP333（0.5mg /L0.7mg /L）的培养基上，进行20d 25d的诱导生根培养。5.6 炼苗5.6.1 组培室内幼苗炼苗对有2条3条根、且根长在2 cm以上、苗高3 cm 4 cm的生根组培苗，揭开培养容器的封口膜或瓶盖，继续在组织培养室培养3d。5.6.2 组培幼苗的移植炼苗5.6.2.1 移植的基质配方用蛭石加有机营养土配制，其比例为1:1。5.6.2.2 基质消毒处理用25%的多菌灵可湿性粉剂500倍液喷施幼苗移植炼苗的基质后，堆积7d以上。5.6.2.3 洗苗与移植将组培室内炼苗后的组培幼苗连同培养基一同取出，放在清水中轻轻振动，将附着在幼苗根上的培养基漂洗干净，再将幼苗移植于口径5cm 6cm、深8cm 10 cm的营养穴盘中。5.6.2.4 大棚炼苗将移植好的幼苗穴盘置于塑料大棚内，立即对穴盘基质喷透水，用透光率40%的遮阳网遮光3天后，再用透光率60%的遮阳网遮光5d，然后取消遮阳网继续炼苗10d以上。大棚的温度控制在25 30，适时适量喷水，保持穴盘基质湿润。5.7 露地移栽培养5.7.1 露地苗床准备选择土壤有机质含量达到5%以上、土质疏松、光照良好、不积水的土地作为苗床，深挖后将土整细，作宽80cm 90 cm的厢。5.7.2 移栽将穴盘小苗连同基质取出在苗床上移栽，株距15cm，行距20cm，然后立即浇足定根水，用透光率60%遮阳网遮盖5d 7d。5.7.3 移栽后的管理 适时对苗床进行喷水，雨季应及时排涝。拔除杂草。5.7.4 病虫防治5.7.4.1防治原则坚持绿色防控和农业综合防控相结合的原则，执行NY/T 393的农药使用规定。5.7.4.2主要病虫害白粉病、蚜虫、卷叶蛾、红蜘蛛等病虫害。5.7.4.3防治方法使用的农药及方法可参照本标准资料性附录A，并遵照NY/T 393-2013。附录A（资料性附录）表A. 刺梨良种组培苗繁育的主要病虫害防治方法主要防治对象农药名称剂型及含量施用量（稀释倍数）施用方法实施要点及说明尺蠖、卷叶蛾、蚜虫溴氰菊酯2.5乳油1 250倍液2 500倍液喷雾以其他农药更换使用蚜虫抗蚜威50可湿性粉剂1 000倍液2 000倍液喷雾以其他农药更换使用蚜虫、尺蠖、卷叶蛾、红蜘蛛阿维菌素5%乳