高效液相色谱法测定金银花连翘提取物中绿原酸、咖啡酸的含量.pdf

黑龙江医药 H e i l o n g j i a n g M e d i c i n e J o u rna l V o 1 2 4 N o 1 2 0 1 1 1 9 高效液相色谱法测定金银花连翘提取物中绿原酸 咖啡酸的含量 金智利 袁文婧 哈 药集 团三精制 药股份有 限公 司 摘要 目的 建立高效液相 色谱 法测定金银 花连翘提取物 中绿原酸 咖啡酸的的含量 方法 采用迪马 钻石 C B 2 5 0 ra m x 4 6 m m 5 p m 色谱 柱 流动相 为 甲醇 一水 一冰 乙酸 2 0 8 0 1 流速 1 0 mL m i n 检 测 波长 3 2 4 n m 结 果 金银花连 翘提取物 中绿原酸 咖啡 酸能达到有效分 离 绿原酸在 9 4 4 m l一1 4 1 6 0 1 g m l 范围 内 浓度 同峰 面 积呈 良好的线形 关系 仪 器精密度 R S D为 0 0 3 方法的重复性 R S D 0 2 4 咖啡 酸在 5 3 6 1 x g ml一 8 0 4 0 t g m l 范 围内 咖啡 酸峰 面积值 与浓度 有 良好的线性 关 系 仪 器精 密度 R S D为 0 0 3 方法的 重复性 R S D 0 3 3 结论 该方法 简便 准确 可行 可用 于金 银花连翘提 取物的质量控制 关键词 高效 液相 色谱 法 绿原酸 咖啡酸 含 量测 定 中图分类号 文献标识码 A 文章编号 1 0 0 6 2 8 8 2 2 0 1 1 J 0 1 0 1 9 0 3 De t e r mi n a t i o n o f C h l o r o g e n i c Ac i d a n d Co f f e i c Ac i d C o n t e n t i n Ho n e y s u c k l e a n d F o r s y t h i a Ex t r a c t s b y HP L C J i n Zhi l i e t al S a r an 9 P h a r ma c e u t i c a l C o L id Ha r b i n P h a r m G r o u p Ab s t r a c t 0b j e c t i v e T o e s t a b l i s h a HP L C m e t h o d f o r D e t e r m i n a t i o n o f C h l o r o g e n i c A c i d a n d C o fi e i c A c i d C o n t e n t i n Ho n e y s u c k l e a n d F o r s y t h i a Ex t r a c t s b y HP L C M e t h o d s Di a mo n s i l Cl 8 h i g h p e r f o rm a n c e l i q u i d c h r o ma t o g r a p h y c o l u mn 2 5 0 m m 4 6 m m 5 p m p r o d u c e d b y D i k ma t e c h n o l o g i e s w a s u s e d T h e mo b i l e p h a s e c o n s i s t e d o f Me t h y l a l c o h o l w a t e r l g l a c i a l a c e t i c a c i d 2 0 8 0 1 a n d t h e fl o w r a t e w a s 1 O m l m i n T h e d e t e c t i o n w a v e l e n g t h w a s 3 2 4 n m R e s u l t s C h l o r o g e n i c a c i d a n d C o i c a c i d i n Ho n e y s u c k l e a n d F o r s y t h i a E x t r a c t c o u l d b e s e p a r a t e d w e l 1 T h e c h l o r o g e n i e a c i d i n t h e r a n g e o f 9 4 4 1 41 6 0 L g ml t h e d e ns i t y s a me p e a k a r ea a s s u me s t h e g o o d l i ne ar r e l a t i o ns t h e i ns t r u me n t p r e c i s i o n RSD Was 0 03 Th e me t h o d p r e c i s i o n RSD Was 0 2 4 Co ffe i e a c i d i n t he r a ng e o f5 3 6 8 0 4 0l x g ml t h e de ns i t y s a me pe a k a r e a ass ume s t h e g o o d h n e a r r e l a t i o n s t h e i n s t rume n t p r e c i s i o n RS D W a s 0 0 3 T h e me t h od p r e c i s i o n RS D wa s 0 3 3 Co n c l u s i o n Th e me t h od s a p p e a r e d t o b e s i mp l e a c c u r a t e a n d r e p r od u c i b l e I t c a n b e u s e d t o c o n t r o l t h e q u a l i t y o f Ho n e y s u c kle a n d F o r s y t h i a Ex t r a c t s Ke y wo r d s HP L C C h l o r o g e n i c a c i d C o ff e i c a c i d a s s a y 1 仪器和试药 仪器型号 岛津 2 0 A型高效液相色谱仪 配有四元梯度 泵 在线脱气机 柱温箱 紫外检测器 自动进样器 色谱柱 D i a m o n s i l 钻石 C 1 8 5 1x m 2 5 0 4 6 mm 试剂 甲醇 D i k ma色谱纯 冰乙酸 天津 市科 密欧化 学试剂有限公司 优级纯 超纯水 对照品来源 中检所 绿原酸 编号 1 1 0 7 5 3 2 0 0 4 1 3 咖 啡酸 编 号 1 1 0 8 8 5 2 0 0 1 0 2 2方法 2 1 对照品溶液的制备 绿原酸 精密称取对照品约 1 0 m g 置 l O O m l 容量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 再精密 移取 1 0 ml 置 2 5 m l 量瓶中 水 表 5 稳定性试验结果 结论 该方法金银花连翘提取物中连翘苷能达到有效 分离 简便 准确 可行 可用 于金银花连 翘提取 物 的质 量 控 制 参考文献 1 国家药典委员会 中华人民共和国药典 一部 S 北京 化 学工业 出版社 2 0 0 5 收稿 日期 2 0 1 0 0 9 1 5 2 O 黑龙江医药 H e i l o n g j i a n g M e d i c i n e J o u rna l V o L 2 4 N o 1 2 0 1 1 稀释至刻度 摇匀即得 咖啡酸 精密称取对照品约 1 0 ra g 置 l O O m l 容量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 再精密移取 5 m l 置 2 5 m l 量瓶中 水 稀 释至刻度 摇 匀即得 2 2 供试 品溶液的制备 精密称取本 品 2 0 0 ra g 置 5 0 m l 量 瓶 中 加 水稀 释 至刻 度 摇匀用微孔滤膜 O 4 5 1 z m 滤过即得 2 3 线性范围的考察 绿原酸 取浓度为 9 4 4 0 p g m l 的对 照品溶液分别按进 样量 1 l 2 4 6 1 0 1 5 进样 记录色谱图 测定 其峰面积 并以峰面积值对绿原酸浓度绘制回归曲线方 程 见表 1 表 1 绿原酸对照品线性测定结果 线性方程为 Y 3 4 2 5 2 5 9 e 一 0 0 5 X 以上结果表 明 在 9 4 4 m l一1 4 1 6 0 jx g m l 范围 内 绿原酸峰面积值与浓度有 良好的线性关系 咖啡酸 取浓度 为 5 3 6 0 x g m l 的对照 品溶 液分别按进 样量 1 1 2 4 6 l 1 0 1 5 进样 记录色谱 图 测定 其峰面积 并 以峰面积值对咖啡酸浓度绘制回归曲线方 程 见表 2 表 2 绿原酸对 照品线性测定结果 线性方程为 Y 2 0 6 8 5 2 3 e 一 0 0 5 X 以上结果表 明 在 5 3 6 g m l一 8 0 4 O m l 范围内 咖 啡酸峰面积值与浓度有良好的线性关系 2 4 精密度试验 绿原酸 精密吸取浓度为 3 7 7 6 1 x g m l 的对照品溶液 1 0 重复进样 6次 表 3 精 密度试验结果 结果 显示绿 原酸 峰面积值 的 R S D 0 5 7 表 明该 法 精密度良好 咖啡 酸 精 密 吸取 浓度 为 2 1 4 4 p g m l 的对 照 品溶 液 1 O 重复进样 6次 表 4 精密度试验 结果 4 5 6 1 0 2 9 3 8 8 1 o 3 1 01 3 3 6 4 9 6 9 0 3 5 1 0 2 7 8 1 5 1 0 2 7 8 6 5 结果显示咖啡酸峰面积值的 R S D 0 3 5 表明该法 精密度 良好 2 5 重复性试验 取 同一批 号样 品按 含量测定 方法 分别 制备 6份样 品 供试液 测得峰面积值并计算含量 表 5 重现性试验结果 绿原酸 以上试验结果 R S D 0 2 4 表 明重现性 良好 表 6 重现性试验结果 f 咖啡酸 以上试验结果 R S D 0 3 3 表明重现性良好 2 6 回收率试验 绿原酸 把浓度为 9 4 4 0 1 z g m l 的绿 原酸对照 品溶液移 取5 0 m l 至2 0 O ra l 量瓶中加水稀释至刻度 作为回收率实验 对 照品溶液 备用 咖啡酸 把浓度为 5 3 6 O 的咖 啡酸对照 品溶液移 取 5 0 m l 至 1 0 0 m l 量瓶中加水 稀释至 刻度 作 为 回收率实验 对 照品溶液 备用 分 别 取 9份 已 知 含 量 绿 原 酸 6 2 8 m g g 咖 啡 酸 1 9 0 m g g 的样品各约 1 0 0 m g 置 5 0 m l 量瓶 中 再向量瓶 中 依次加人已稀释好 的绿原酸对 照溶液 1 5 ml 3份 2 5 m l 3 份 1 i m l 3份 在 已加 入绿原 酸 的量瓶 中再次 向量 瓶 中 加人已稀释好的咖啡酸对照溶液 4 m l 3份 7 m l 3 份 9 m l 3 份 加水稀释 至刻度 摇匀用 0 4 5 I z m微孔滤膜 滤过即得 按检验方法测定 计算回收率 得到平均回收 率为 9 7 3 1 表明此定量分析方法的准确度很高 表 7回收试验结果 一 mg mg c R SD 9 9 8 9 1 o o 1 9 9 8 7 6 9 9 8 6 9 9 41 o 6 2 7 3 0 3 5 4 0 0 9 6 6 91 9 5 9 4 0 6 2 9 2 0 3 5 4 0 0 9 6 58 4 9 5 1 O 0 6 2 0 2 0 3 5 4 0 0 9 6 6 08 9 7 7l 0 6 2 7 1 0 5 9 0 0 1 2 0 8 48 9 8 5 4 0 6 2 4 3 0 5 9 0 0 1 2 0 9 7 3 9 9 2 3 9 7 0 4 1 4 5 黑龙江医药 H e i l o n g j i a n g M e d i c i n e J o u rna l V o L 2 4 N o 1 2 0 1 1 2 l H P L C法测定葡萄糖注射液中 5一 羟 甲基糠醛的含量 姚 会敏 金焱 哈 药集团三精制 药股份有限公 司 摘要目的 建立葡萄糖注射液 中5一羟甲基糠醛的含量测定方法 方法 高效液相 色谱法 采用 D i a mo n s i l 钻石 C 8 2 5 0 4 6 m m 5 t x m 色谱柱 O 0 5 m o L磷酸二氢钾 一乙腈 8 0 2 0 为流动相 柱温3 0 流速 1 0 m l m i n 检测波长2 8 4 n m 结果 在0 4 2 0 1 m l 2 5 2 0 4 1 g m l 浓度范围内5一羟甲基糠醛的峰面积和浓度具有良好 的线性关系 R 1 0 0 0 0 0 平均回收率为 1 0 0 2 7 r t s o 0 5 5 结论 本方法准确 可靠 重复性好 可作为葡 萄糖 注射液质量控制方 法 关键词 葡萄糖注射液 5一羟甲基糠醛 高效液相色谱法 中图分类号 R 9 2 7 2 文献标识码 A 文章编号 1 0 0 6 2 8 8 2 2 0 1 1 O l o 2 1 0 3 D e t e r m i n a t i o n o f 5 H y d r o x y me t h y f u r f u r a l i n G l u c o s e I n j e c t i o n b y HP L C Yao Hui m i n e t al S a n j i n g P h a r ma c e u t i c a l C o L t d Ha r b i n G r o u p A b s t r a c t Ob j e c t i v e T o e s t a b l i s h a n a s s a y o f d e t e r mi n a t i o n o f 5一H y d r o x y me t h y f u r f u r a l i n G l u c o s e I n j e c t i o n b y H P L C Me t h o d s H P L C W as c a r r i e d o u t o n a D i a mo n s i t C l8 250 x 4 6 m m 5 1a m c o l u m n T h e m o b i l e p h ase c o n s i s t e d o f p o t ass i u m d i h y d r o g e n p h o s p h a t e a c e t o n i t r i l e 8 0 2 0 w i t h t h e fl o w r a t e o f 1 0 m l m i n T h e c o l u mn r e m a i n e d a t 3 0 C a n d t h e d e t e e t i o n w a v e l e n g