p16与细胞周期素D1蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及临床意义.doc

p16与细胞周期素D1蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及临床意义中华妇产科杂志 1999年第3期第0卷 论著摘要作者：王敏江森李冠群单位：110003 沈阳，中国医科大学第二临床学院妇产科(王敏)，病理科(李冠群)；山东医科大学附属医院妇产科(江森)近年来研究发现,细胞周期失控，是细胞增殖失控而导致癌变的重要原因。p16和细胞周期素蛋白(cyclin D1 protein, CD1P)是目前公认最重要的两种细胞周期调节因子,其在卵巢肿瘤中的表达目前存有争议2-5。本研究应用免疫组化法，对55份卵巢组织标本进行p16及CD1P蛋白检测,探索其相互关系及与卵巢浆液性肿瘤发生、发展的关系。一、材料与方法1.标本与来源:收集中国医科大学第一、二临床学院1996年4月至1997年9月，手术切除的55份新鲜组织标本,分为4组:(1)正常卵巢组织8份；(2)卵巢良性浆液性瘤组织10份；(3)卵巢交界性浆液性瘤组织4份；(4)卵巢浆液性癌组织33份，其中期5例、期2例、期22例、期4例。组织学分级1级8例、2级18例、3级7例。伴有腹水者17例，伴有癌瘤播散者25例,伴有淋巴结转移者8例。2.检测方法:冰冻切片进行免疫组化ABC染色,p16和CD1P抗体的免疫产物均采用3-氨基-9-乙基卞唑显色。鼠抗人CD1P单克隆抗体为美国Santa Cruz公司产品。3.结果判定及统计学处理:阳性染色为红色颗粒,按Shimizu等1的方法,综合染色强度和分布范围判定结果。率的比较采用四格表确切概率法。二、结果1.不同组织中p16、CD1P的表达:p16、CD1P阳性表达在卵巢浆液性癌与良性浆液性瘤及正常卵巢组织比较,差异均有显著性(P0.05),但在卵巢浆液性癌与交界性浆液性瘤,交界性浆液性瘤与良性浆液性瘤比较，差异均无显著性(P0.05)。见表1。表1不同卵巢组织标本中p16、CD1P的表达情况类别标本总数p16阳性CD1P阳性标本数百分率(%)标本数百分率(%)正常卵巢888/8*00*卵巢良性浆液性瘤10990.0*00*卵巢交界性浆液性瘤422/4*11/4*卵巢浆液性癌331442.41545.5注:*浆液性癌与良性浆液性瘤及正常卵巢比较，P0.05*浆液性癌与交界性浆液性瘤与交界性浆液性瘤与良性浆液性瘤比较，P0.05 例数少于10例，不计算百分率(表2，3同)2.卵巢浆液性癌组织中p16、CD1P表达与临床分期、病理分级关系:早期卵巢癌(、期)中，6例p16表达阳性高于晚期卵巢癌(、期)30.8%(8/26),差异有显著性(P0.05)。但CD1P的阳性表达率在早、晚期卵巢癌比较，差异无显著性(P0.05)。p16在卵巢浆液癌1级与2、3级中的阳性表达，差异有显著性(P0.05),CD1P在各级中的表达，差异则无显著性(P0.05)，见表2。表2卵巢浆液性癌组织标本中p16、CD1P表达与临床分期、病理分级的关系分类标本总数p16阳性CD1P阳性标本数百分率(%)标本数百分率(%)临床分期331442.41545.5、期766/7*22/7*、期26830.81350.0病理分级331442.41545.51级866/8*16/82级18738.9*844.4*3级711/766/7注:*、期与、期比较及1级与2、3级比较，P0.05*、期与、期比较及2级与3级比较，P0.053.卵巢浆液性癌组织中p16、CD1P表达与腹水、癌瘤播散及淋巴结转移3项指标的关系：p16、CD1P阳性表达，淋巴结转移者和无淋巴结转移者比较，差异均有显著性(P0.05);有腹水和无腹水比较，差异均无显著性(P0.05);癌瘤播散和无播散者p16阳性表达，差异也有显著性(P0.05),而CD1P阳性表达，差异则无显著性(P0.05)。见表3。表3卵巢浆液性癌p16、CD1P表达与腹水、癌瘤播散及淋巴结转移的关系类别标本总数p16阳性CD1P阳性标本数百分率(%)P值标本数百分率(%)P值腹水有17635.30.05847.10.05无16850.0743.8癌瘤播散有25728.00.051352.00.05无877/82/825.0淋巴结转移有800/80.0577/80.05无251456.0832.04.p16和CD1P协同表达情况：33例卵巢浆液性癌中,p16和CD1P均异常表达即协同表达12例,占36.4%。其中7例淋巴结转移,11例癌瘤播散,7例腹水,均为晚期癌及中、低分化癌。p16和CD1P均无异常表达11例,占33.3%。均无淋巴结转移,其中6例癌瘤播散,7例腹水,晚期癌7例。中、低分化癌6例。两组淋巴结转移率,1级与2、3级比较，差异均有显著性(P0.05)。三、讨论p16基因又称多肿瘤抑制基因1,CD1P由CyclinD1基因(又称CND1,BCL1,PRAD1或D11S128基因)编码,促进细胞生长和分裂。因此,无论是CD1P的过度表达还是p16的缺失，都将促使细胞恶变。1.p16、CD1P在卵巢上皮性浆液性肿瘤组织中的表达及意义：本研究根据p16、CD1P阳性表达及阴性表达，分别与卵巢浆液性癌的临床分期、病理分级、腹水、癌瘤播散及淋巴结转移多因素进行比较、分析,结果与杨红等2和Ichikawa等3在p16基因表达的研究结论一致。即p16基因表达的量与细胞的生物学行为有关,正常组织表达较高,恶性增生的表达较低。在卵巢浆液性癌中,p16阳性表达者生物学行为较好,转移率低,而表达阴性者则相反。CD1P表达也与癌瘤的恶性程度及其生物学行为有密切关系。随恶性程度的增加、淋巴结转移的出现,其表达率也明显增加,此结果与Barbieri等4和Worsley等5的报道一致。2.p16和CD1P协同表达及意义：现代研究证明，肿瘤的发生是多因素、多步骤、多阶段、多种癌基因和抑癌基因参与的复杂病理过程。本研究也支持上述观点，p16和CD1P在卵巢浆液性癌中的表达具有多样性。33例卵巢浆液性癌中,p16和CD1P协同异常表达者12例(36.4%),均正常表达者11例(33.3%),中、低分化癌前者12例,后者6例。提示，多种基因异常可预示卵巢浆液性癌的转移潜能和预后不良。 参考文献1Shimizu M,Saitch Y,Itoh H. Imm-unohistochemical staining of Ha-ras oncoge product in normal,benigh,and malignant human pancreatic tissues. Hum Pathol,1990,21:607-612.2杨红,郑维国,辛晓燕. 卵巢肿瘤中p16抑癌基因的表达及其意义. 第四军医大学学报,1996,17:287-288.3Ichikawa Y,Yoshidas S,Koyama Y,et al. Alteration of the p16 gene in differrent histological types and clinical stage of primary ovarian tumors. Int J Cancer,1996,69:466-470.4Barbieri F,Cagnoli M,Ragni N,et al.Expression of Cyclin D1 correlates with malignancy in human ovarian tumors. Br J Cancer,1997,7