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DNA 重组技术的基本工具基因工程的诞生艾弗里在格里菲斯的实验基础（肺炎双球菌实验）上证明了DNA是遗传物质沃森（美国生物学家）和克里克（英国物理学家）发现了DNA分子的双螺旋结构DNA分子的双螺旋结构的特征： I. DNA分子是由两条链组成的，这两条链按反向平行的方式盘旋成双螺旋结构II. DNA分子中的脱氧核糖与磷酸交替连接，排列在外侧，构成基本骨架，碱基排列在内侧III. 两条脸上的碱基通过氢键连接成碱基对 A(腺嘌呤)T（胸腺嘧啶） C（胞嘧啶）G（尿嘌呤） 碱基之间的这种一一对应的关系叫做碱基互补配对原则尼伦伯格等破译遗传密码这些为基因工程的创立做出了重要的理论铺垫。基因工程步骤：1提取目的基因2使目的基因与运载体连接3将目的基因导入宿主细胞4检验基因工程的概念基因工程是指：按照人们的意愿，进行严格设计，通过体外DNA重组和转基因技术等，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。NOTICE操作环境 生物体外操作对象 基因水平 DNA分子水平基因工程的工具1. 限制性核酸内切酶“分子手术刀”（1） 来源：主要是从原核生物中分离纯化来的，一般微生物，少数整合生物（2） 功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能使一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（3） 切割方式a. 在中心轴线两侧将DNA 切开，切口是黏性末端b. 沿着中心轴线讲DNA 切开，切口是平末端2. DNA连接酶“分子缝合针”（1） 种类：a. 从大肠杆菌中分离得到的，称为EcoliDNA 连接酶，只能连接黏性末端b. 从T4噬菌体中分离得到的，称为T4DNA连接酶，既能连接黏性末端，也能连接平末端，后者效率更低NOTICEDNA连接酶 DNA聚合酶相同点 都连接磷酸二酯键不同点 连接两个DNA片段 连接单个的核苷酸分子3. 基因进入受体细胞的载体“分子运输车”（1） 使用运载体的目的a. 用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去b. 利用它在宿主细胞（受体细胞）内对目的基因进行大量的复制（2） 运载体主要是质粒（主要存在于细菌或酵母菌中），它是一种裸露的，结构简单的，独立于细菌拟核DNA之外的，能够自我复制的双链环状DNA分子。还有其他的运载体如 入噬菌体的衍生物，动植物病毒等（3） 基因的运载体必须具备的条件a. 在宿主细胞中能
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