鸡腿菇菌株农艺性状比较及相关分析.doc

鸡腿菇菌株农艺性状比较及相关分析* 基金项目：南充市科技局项目（NC2007-005F）作者简介：邱慧兰（1984-），女，四川南充人，在读硕士研究生，从事食用菌遗传育种研究。邱慧兰 李林辉*通讯作者：李林辉，教授，硕士生导师，E-mail: * 陈真勇 刘雁英 谢富刚 彭正松（西华师范大学生命科学学院 四川南充 637009）摘要：以鸡腿菇的15个栽培菌株和1个野生菌株为试验材料, 对菌株进行了农艺性状比较及相关分析, 结果表明: 鸡腿菇菌株菌丝体日均长速在2.34 mmd-13.93 mmd-1之间，在菌丝体密度上有差异；菌株间子实体的菌帽长度和菌柄直径间也存在差异；生物学效率测试表明Co9、Co10、Co11、Co18、Co5为适宜于南充地区栽培的菌株，其生物学效率分别为117.55%、104.97%、113.07%、104.64%、100.49%、102.55%。经相关分析后，菌柄直径（x1）、菌柄长度（x4）、菌帽长度(x2)、菌帽厚度(x5)与单个子实体重量(Y)呈极显著的正相关。关键词：鸡腿菇, 形态学特征, 生物学效率, 差异性，相关分析Comparison of agronomic characters and correlation analysis on 16 strains of Coprinus comatusQiu Huilan, Li Linhui, Chen Zhenyong, Liu Yanying, Xie Fugang, Peng Zhengsong(College of Life Science, China West Normal University, Nanchong, Sichuan 637009)Abstract: The agronomic characters of 15 cultivation strains and 1 wild type strain of Coprinus comatus were researched.The results showed that the mycelium growth velocity were between 2.34mm/d and 3.93mm d, and their clone density was difference.There were difference in cap Length and stipe diameter among 16 Coprinus comatus strains. The biological efficiency test showed strains Co9、Co10、Co11、Co18、Co5 suited to be cultivated in Nanchong, and reached to 117.55%, 104.97%, 113.07%, 104.64%, 100.49%, 102.55% respectively. The correlation between single fruitbody weight, stipe diameter, stipe length, cap length and thickness were significantly positively.Key words: Coprinus comatus, morphological characters, biological efficiency, variability, correlation analysis. 鸡腿菇(Coprinus comatus)栽培原料广泛1-4，栽培方式粗放5-9，目前在我国已获得广泛栽培，创造了较佳的社会效益和经济效益10-12。然而目前的栽培品系多来源于对野生菇的分离以及对其后的选育，命名混杂，存在易名同种的现象，且随着多次继代，菌种性能退化。选育高产抗逆的鸡腿菇新品种，是育种工作者永恒的工作。虽然已有一些关于鸡腿菇品比的报道13-14，因所考察性状、研究材料、栽培环境等有所差异15-17, 所选育的优良品种各自的结论不尽相同18,19。因此，不能忽视选育更适于栽培地的优良品种的工作。南充已有多年栽培鸡腿菇的历史，目前的菌种均为外地购买，不同的生产单位购买的品种不同，生物学效率差异很大，这可能与所使用的菌种有密切的联系，为此，我们从各地引进了16个鸡腿菇菌株,对其菌丝体生长速度和密度、菌帽长度、生长发育速度、子实体形态及产量等方面进行了综合评价，选育出了适合南充环境高产的鸡腿菇栽培品种；同时进行了各农艺性状与单个子实体重量的相关分析，以期摸索出各农艺性状与单个子实体重量的关系，为育种提供理论依据。1.材料与方法1.1 材料1.1.1供试菌株供试菌株及来源见表1。表1 供试菌株及来源Table 1 The strains tested and their sources菌株编号Strain No.原名Original name来源Original sourceCo1泌阳小河南泌阳县真菌研究所Co2华中农大3号华中农业大学菌种实验中心Co3CC900江苏省江都市天达食用菌研究所Co4978江苏省江都市天达食用菌研究所Co5H38江苏省江都市天达食用菌研究所Co6泌阳大河南泌阳县真菌研究所Co7CC43江苏宝应食用菌生物所Co82004江苏省江都市天达食用菌研究所Co9北京福建三明市真菌研究所Co10东北黑龙江五常市山河镇东北食（药）真菌研究所Co119201江苏省江都市天达食用菌研究所Co13南充中坝野南充中坝野生菌分离Co14广西学生带回Co16江苏南充市绿宝菌业公司Co17九湖福建龙海市九湖食菌研究所Co18成都四川农业科学研究院1.1.2培养基母种培养基（PDA）；原种培养基（麦粒98%、石膏1%、石灰1%）；栽培培养基（稻草78%、玉米粉7%，菜籽饼7%、麸皮6%、石膏1%、石灰1%）。1.2 方法1.2.1 菌丝体生长情况在9cm装有30ml的PDA平板中心接种供试母种以活化菌丝体，待菌落长到培养皿2/3时，用孔径6mm的无菌打孔器径向等距离切取一块菌丝培养物，接种于9cm装有30ml的PDA平板中心，设5个重复。置于251恒温培养箱中培养。当其中1个供试菌株菌丝体长至培养皿边缘时，立即记录其余供试菌丝体的菌落半径、生长时间及菌丝密度6，按下式计算菌丝的生长速度。 菌丝体日均长速（mm.d-1）=菌落半径（mm）生长天数（d）1.2.2 菌株农艺性状分析按照栽培培养基配方, 备料混合，调足水分，堆制发酵2d后，装17cm (20-23)cm0.03cm聚丙烯袋，每袋干料重75g(湿重250g),橡皮筋扎好袋口，常压灭菌，维持10015h-18h。待培养料冷却至25左右时接入原种，每个菌株接40袋，放置培养室培养，控制袋间温度低于28。菌丝长满袋后，移至出菇房，覆土进行出菇，每个菌株随机抽取10袋子实体比较其农艺性状。当每个菌株的子实体发育至菌帽即将松动时，采摘子实体，测量单个子实体的全长、菌柄直径（按以中间部分计）、菌帽长度、菌帽直径。 菌株生长发育以接入原种于栽培料当日开始，当菌丝体长满培养料时，覆土，观察肉眼可见小菇蕾的初现时间以及始采菇时间。 子实体形态 在a=0.05水平下，对不同菌株的菌柄直径、菇体长、菌帽直径以及菌帽长度进行单因素方差分析。把菌株菌柄平均直径大于20cm的菇定为粗柄型菌株；小于13cm的菇定为一般柄型菌株。根据子实体长平均值标准误范围内的菌株占该菌株所测总株数的百分比，观察各菌株的均匀程度。根据子实体菌帽上鳞片的多少分为多鳞型和光滑型。 子实体产量.1 产量比较当每个菌株的单个子实体发育至菌帽即将松动时，即采集称重，两潮菇采集完毕后，累计各袋的总产量并计算生物学效率，利用SPSS软件进行单因素方差分析，并进行LSD比较。.1 单个子实体重量的相关分析每个菌株随机取样30株, 考察菌柄直径（x1）菌帽长度(x2) 菌帽直径(x3)、菌柄长度（x4）菌帽厚度(x5)、单个子实体重量(Y)6个性状，以平均值进行统计分析，数据处理采用DPS 软件27 和Excel 软件。2 结果2.1 菌丝体生长速度和密度比较在同种平板培养基上，不同菌株的菌丝生长速度和密度有一定差异。16个菌株的菌丝体长速为2.34 mmd-13.93 mmd-1。在菌丝体生长速度上存在差异，菌丝生长速度由快到慢的顺序为Co9Co1Co4Co17Co3Co2Co11Co6Co8Co5 Co16Co14Co18Co10Co7 Co13。Co16、Co18和Co17菌丝体浓密、整齐；Co13和Co4菌丝体生长稀疏；Co9及其它菌株菌丝体较浓密（表2）。表2 16 个鸡腿菇菌株菌丝体生长速度比较Table 2 Comparison of the mycelium growth velocity of 16 Coprinus comatus strains菌株Strain菌丝体日均长速度/ (mmd-1)Average growthrate of the mycelium菌落密度Clone densityCo93.930.15+ +Co13.910.21+ +Co43.830.07+Co173.760.04+ + +Co33.700.13+ +Co23.670.11+ +Co113.660.25+ +Co63.620.11+ +Co83.520.27+ +Co53.440.07+ +Co163.380.05+ + +Co143.260.10+ +Co183.060.26+ + +Co102.980.28+ +Co72.920.13+ +Co132.340.06+2.2 菌株发育速度比较所有菌株的菌丝体几乎均在接种25后长满袋，覆土后菌株的现蕾及始采菇时间存在差异。Co1、Co2、Co3、Co4、Co5、Co6、Co7、Co8、Co9、Co10、Co11、Co13、Co14、Co16、Co17、Co18的菇蕾初现时间分别为覆土后7、9、9、9、9、11、9、9、9、9、9、22、9、9、9、11天，而始采菇时间分别为覆土后15、15、18、15、15、18、18、15、15、15、15、27、15、18、15、15天。图1 鸡腿菇菌株菌帽长度比较Fig 1 Cap length comparison of Coprinus comatus2.2 子实体形态比较16个参试菌株经单因素方差分析后，菌柄直径、菌柄长度、菌帽直径差异不显著。菌株菌帽长度方差检验F=3.297，对应的相伴概率(Sig.)为0.000,小于显著性水平0.05，菌株间存在差异。为比较16个参试菌株菌帽长度，将其作图可以直观地看出菌株之间菌帽的相对长度。图1 Co4（44.95cm）、Co17（44.27cm）和Co5（44.19cm）菌株的菌帽长度大于其他菌株，与Co6(38.06cm)、Co13(32.75cm)和Co16(33.13cm)菌株差异比较大。Co4菌帽长度最长，而Co13的菌帽长度为最短。经方差分析（F=30.092，sig.为0.000）后，将16个鸡腿菇菌株菌柄粗度分为两类：粗柄型菌株为来自江苏的Co16（21.62cm），其菌柄平均直径超过20cm；Co5（12.05cm）及其他菌株属于一般柄型。Co13、Co14、Co18菌株子实体长平均值标准误范围内的菌株占该菌株所测总株数的百分比例较高，分别为30%、24%、19%，均匀度较高，而Co9、Co10、Co11子实体长平均值标准误范围内的菌株占该菌株所测总株数的百分比低，分别为4%、2%、2%，均匀度相当低。不同菌株采收时子实体鳞片情况：Co13子实体鳞片较多属于多鳞型菌株；其它菌株鳞片极少或无大致分属于光滑型。2.3 子实体产量2.3.1 产量比较16个鸡腿菇菌株子实体产量为平均每袋42.60g88.16g，生物学效率为56.80%117.55%。菌株产量方差检验F=8.451，对应的相伴概率（Sig.）为0.000，小于显著性水平0.05，不同品种间存在差异。Co9单产最高，平均单产88.13 g，与Co10（78.73g）、Co11(84.80g)、Co18(78.48g)差异不显著，与Co14(76.91g) 、Co1(70.596g)及其它菌株呈显著，或极显著差异；Co9、Co10、Co11和Co18菌株产量与Co8(64.79g)、Co3(61.71g)、Co6(58.75g)差异极显著；Co13平均单袋产量最低，重量为42.61g，与其他菌株差异极显著（表3）。表316 个鸡腿菇菌株子实体产量比较Table 3. Comparison of the yield of the 16 Coprinus comatus strainsCo1Co2Co3Co4Co5Co6Co7Co8Co9Co10Co11Co16Co17Co18Co14Co13Co1Co20.494 Co30.074 0.015*Co40.710 0.297 0.159 Co50.334 0.792 0.006 *0.183 Co60.017* 0.002* 0.551 0.044* 0.001* Co70.920 0.561 0.061 0.639 0.390 0.013* Co80.243 0.068 0.538 0.428 0.034* 0.224 0.207 Co90.000*0.005* 0.000* 0.000* 0.009* 0.000* 0.001*0.000*Co100.107 0.361 0.001* 0.049* 0.505 0.000* 0.132 0.006* 0.060 Co110.004*0.033* 0.000* 0.001* 0.056 0.000* 0.006* 0.000* 0.494 0.228Co160.936 0.454 0.094 0.776 0.304 0.023* 0.859 0.286 0.000* 0.097 0.004* Co170.809 0.658 0.044* 0.542 0.472 0.009* 0.888 0.161 0.001* 0.172 0.009* 0.752 Co180.113 0.381 0.001* 0.052 0.531 0.000* 0.140 0.006* 0.050 0.961 0.204 0.102 0.182 Co140.201 0.569 0.002* 0.101 0.755 0.000* 0.242 0.015* 0.022* 0.718 0.110 0.182 0.303 0.752 Co130.000* 0.000* 0.000* 0.000* 0.000* 0.003* 0.000* 0.000* 0.000* 0.000* 0.000* 0.000* 0.000* 0.000* 0.000* *、* 分别表示5% 和1% 显著水平, 下表同*、* indicated significant level at 5% and 1% , respectively, following tables are the same2.3.2 影响单个子实体重量的因素由表4知,其他性状与单个子实体重量的相关系数由大到小依次为：菌柄直径菌柄长度菌帽长度菌帽厚度菌帽直径。在各性状中，菌柄直径、菌柄长度、菌帽长度、菌帽厚度与单个子实体重量呈极显著的正相关，菌帽直径与单个子实体重量相关性不显著。菌柄直径与菌帽长度、菌柄长度、菌帽厚度呈显著正相关。菌帽长度与菌柄直径、菌柄长度、菌帽厚度呈显著或极显著的正相关。菌帽直径与其他性状相关性不显著。表4 鸡腿菇主要农艺性状间的相关分析Table 4Correlation analysis on main agronomic characters of Coprinus comatus性状x1 X2X3 X4 X5 X2 0.36* X30.110.26X40.36* 0.79* 0.06X50.33* 0.91* 0.120.76* Y0.85* 0.64* 0.090.67* 0.58* 3 讨论菌丝体的生长速度与鸡腿菇的生物学效率相关性不显著。对于食用菌, 一般地说, 菌丝生长旺盛是获得高产的基础, 但生长旺盛的菌株并不一定高产20-22，我们的结果也证实了这一现象。如鸡腿菇菌株Co10、Co18在PDA培养基上菌丝体生长较慢，但生物学效率供试菌株前茅，而菌株Co3菌丝体在PDA培养基上生长较快，但生物学效率并不太高(表3)。因此，不能用母种菌丝体生长速度预测总产量20。但生产上应选择菌丝体生长快的菌株,这样有利于缩短菌种的生长周期,提高成品率23。统计结果看,多数菌株子实体产量高低与结实性早晚有一定的相关性。从始采菇时期看， Co10、Co9、Co11和Co18等菌株在覆土后15天开始采菇，属采收期较早的菌株，其产量较高，而Co3、Co6、Co16和Co13分别在覆土后18天、27天采菇，属采收期较晚的菌株，其产量较低（表3），这与陈文良报道类似24。16个鸡腿菇菌株中，栽培地理环境的改变可能影响其生长发育及产量。Co11菌株能在南充和河南周口地区很好地生长发育，获得高产13，14，21；而自河南泌阳的Co1和Co6，在当地具有子实体形态大小之分，在南充栽培后，它们之间子实体形态大小差异不显著而产量差异极显著（表3），这可能与结实性早晚、菌株的子实体总朵数有关，而具体的相关性情况需要进一步研究。野生菌株Co13的生物学效率不如其他栽培菌株高，可能与下列因素有关。第一，本实验栽培出菇基质碳氮比可能不太适合该菌株，使得其并没有表现出最佳产出率，这需要进一步验证，类似的现象在食用菌中较普遍25-27。第二，可能与Co13的最佳出菇时间有关。该菌株在野生状态的出菇时间为3-5月，而室内栽培时，出菇时间为5-6月，可能气温偏高，影响其发育，导致生物学效率低下。而Co13产量虽不理想，但可作为一个野生种植资源，与其他菌株进行杂交,获得性状优良的菌株23。相关分析是研究相关变量间关系的工具,通过计算相关系数可研究相关变量间平行关系的联系性质和程度。从平均菇重、菇数、菇峰期层次上，林芳灿对香菇的三个性状进行了相关分析，证实了平均菇重及菇数与产量呈正相关，菇峰期与产量呈极显著的负相关28。陈文良也有类似的报道，影响香菇各品种生物学效率高低的因子主要与总朵数、平均单朵重有关24。本试验从影响单个子实体重量的角度出发，对菌柄直径、菌柄长度、菌帽长度、菌帽厚度、菌帽直径与单个子实体重量之间进行相关分析。两个变量间的关系构成单个子实体重量的主要因素是菌柄直径、菌柄长度、菌帽长度、菌帽厚度，他们与单个子实体重量均呈显著正相关关系，菌帽直径与单个子实体重量相关性不显著，说明所得结果与实际相符。菌柄直径代表菌株子实体菌柄的粗度，菌柄越粗，长度越长，那么子实体单重越重；同样在菌柄粗度和长度一定的情况下，菌帽越长、越厚，那么单个子实体的重量也越重。由此可见，进行鸡腿菇高产新品种选育时，应针对子实体菌柄较粗又长与菌帽长而厚相结合的单个子实体选择是比较理想的。参考文献1郭延习,胡峰,郭延臣,等.菇类菌糠栽培鸡腿菇高产技术J.山东蔬菜,2007,(3):47.2彭秀,李常安.氨化甘蔗叶栽培鸡腿菇技术J.中国蔬菜,2009,(5):49-50.3李彪,陈明静,王娟.苎麻秸秆栽培鸡腿菇技术J.四川农业科技,2009,(2):21-22.4黄永红.花生壳栽培鸡腿菇研究初报J.广东农业科学,2009,(3):54-55.5陈牧野,王尚堃,袁逢杰.鸡腿菇夏季日光温室栽培技术J.中国食用菌,2007,26(3):24-26.6王尚堃,高金生,康卫华.鸡腿菇大田小拱棚栽培技术J.中国种业,2005,(3):56.7王尚堃,刘崇彬.鸡腿菇反季节高效栽培技术J.山东农业科学,2004,(5):42.8王尚堃,李民,陈凤霞.鸡腿菇无公害双膜覆盖栽培技术J.当代蔬菜,2005,25(12):25-26.9米青山,王尚堃.鸡腿菇栽培新模式试验研究J.安徽农学通报,2008,14(10):65-66.10刘剑华,冉四明.果树采摘园间作鸡腿菇的效益及栽培关键技术J.中国蔬菜,2008