树突状细胞.doc

树突状细胞与肿瘤的研究进展 摘要树突状细胞(dendritic cell，Dc)是体内功能最强的抗原提呈细胞(APC)。它具有强大的T细胞激活能力，并能活化初始型T细胞、刺激B淋巴细胞增殖成熟、刺激Th细胞及NK细胞活性。能够诱导特异性抗肿瘤细胞毒T淋巴细胞(CTL)，引发机体产生抗肿瘤免疫应答。它不仅能够激活自体的抗肿瘤免疫，同样能够提高异体的抗肿瘤效应。因此，利用树突状细胞制备肿瘤疫苗可望提供一种有效的肿瘤免疫治疗方法。本文就肿瘤免疫治疗中树突状细胞疫苗予以综述。关键词树突细胞；肿瘤；免疫疗法树突状细胞(dendritic cell，DC)起源于骨髓，正常组织里面含量极微，高度表达MHC-I和 MHC-II，共刺激分子，因而可以高效提成抗原，并且能有效的刺激静息的T淋巴细胞诱发的初次免疫应答，因其胞膜向外伸出许多星状突起类似于神经细胞的树突，因而得名。DC首先由Steinman和Cohn【1】 于1973年从小鼠脾脏中分离出，是与巨噬细胞、粒细胞和淋巴细胞等白细胞形态、功能相异的重要免疫辅佐细胞 。DC是免疫应答中重要的免疫细胞，是目前所知功能最强的一种专职抗原提呈细胞(antigen presentingcells，APC)，也是体内唯一能激活初始型T细胞的抗原提呈细胞。对于维持正常机体免疫系统的自身稳态起着重要作用【2】同时，作为机体免疫的始动者，DC在抗病毒、抗肿瘤免疫反应及免疫缺陷方面，激活T细胞发挥着十分重要的作用49 。近年来，随着肿瘤免疫学和分子生物学的快速发展，人们对DC的认识不断深入，DC已成为生物医学界研究抗肿瘤免疫的热点之一。目前。DC疫苗已成为极具潜力的癌症及慢性感染性疾病的治疗性疫苗，已有多项疫苗进入I、期临床研究阶段。但由于缺少客观的临床疗效的证据，使DC疫苗还不能进入期临床实验3 但是近年来随着细胞生物学和分子生物学及基因工程技术的发展，DC对肿瘤细胞抗原处理、提呈以及识别的分子基础有了更深的认识，在临床应用研究方面取得了一些突破性的进展，为肿瘤患者的治疗及康复带来了新的希望。1 DC的生物学概括目前研究认为，按来源可将DC分为髓性树突状细胞(marrow dendritic ceil，MDC)和淋巴细胞性树突状细胞(1ymphocyte dendritic ceil，LDC)，其中，MDC来源于骨髓的CD34+ 细胞；LDC来源于胸腺。在人类，根据血液中的DC前体细胞，人们将DC系统分为Lin-DR+11C+ 123 mDC(myeloid dendritic cells)和Lin-DR+ 11C-123pDC(plasmacytoid dendritic cells)两大亚群 .4 以往人们认为mDC和pDC分别来源于淋系和髓系的造血祖细胞, 但近几年研究表明，B、T和NK细胞共同淋巴祖细胞(common lymphoid precursor for B，T and NK cells，CLP)和粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、红细胞和巨核细胞的共同髓系祖细胞(CMP)在体内外都能分化成DC各类亚群。5DC广泛分布于人体的多个部位，如血液以及肝脾、淋巴结、肺、肾、胃肠道等组织间质中，约占外周血单个核细胞总数的05% 10% ，能捕获、处理、提呈抗原，具有迁移能力，并参与淋巴细胞的激活、生长和分化，调节机体对抗原产生免疫应答的方式和类型。DC的免疫调节作用由不同的膜表面分子和分泌的细胞外因子共同担负。DC亚群的分类比较复杂，目前，国际上没有公认或统一的DC亚群的概念和分类标准。通常依其所分布的组织器官、细胞谱系来源、所诱导的T细胞应答(Thl或Th2)、导致免疫应答最终的结果(免疫性或耐受性)以及细胞表面所表达的分子及受体趋化因子受体及Toll样受体(TLR)等进行分类。其中依据成熟程度可分为成熟型DC与不成熟型DC，前者高表达主要组织相容性复合(MHC)I、类分子，黏附分子和共刺激分子，提呈抗原能力强，后者低表达上述分子，处理抗原能力强，而提呈抗原能力弱。在大多数组织中，DC 以不成熟形式存在，主要发挥着“哨卫”的作用，有强大的摄取抗原的功能。DC成熟后，其抗原捕获能力迅速下降，已捕获的抗原经其加工、处理后可迅速与其胞质内的MHC -II类分子结合形成MHCII肽复合体，表达于DC表面，同时表达高水平的协同刺激因子，如CD8O、CD86、CD40及肿瘤坏死因子(TNF)等。成熟DC能有效的内化、加工和提呈可溶性抗原，并能激活初始T细胞，启动T细胞介导的特异性免疫应答。另外，它能刺激B淋巴细胞增殖和分化，激活自然杀伤(NK)细胞，同时具有向局部淋巴结迁移的能力6。2.1制备疫苗的DC来源、生物学特性随着人们对DC的深入认识和DC的分离、纯化、培养技术的改进，现已能够从大多数组织中得到纯度较高的各具特异性的DC，通过体外培养与扩增的方法，获得大量DC以满足DC基础与临床研究的需要。目前一致认为，DC是具有典型树突状形状，膜表面高表达主要组织相溶性抗原复合体(MHC)类分子，能够移迁至淋巴器官和刺激初始型T细胞增殖活化，并具有一些相对特异性表面标志的一类细胞。DC的分化阶段经历从前体DC至非成熟DC再到成熟DC等的过程。非成熟DC具有摄取和加工处理抗原的功能，但其刺激初始型T细胞的能力弱。DC摄取抗原或接受到某些刺激因素，DC逐渐分化成熟，并表现出成熟DC的特征：细胞呈树突状形态；失去摄取抗原能力；能启动初始型T细胞反应等。有别于其他APC，DC最大的特点是能够显著刺激初始型T细胞(naive T cells)增值，而巨噬细胞、B细胞仅能刺激已活化的或记忆性T细胞，因此DC是机体免疫应答的始动者，在免疫应答的诱导中具有独特的地位。DC是肿瘤细胞免疫中主导力量T细胞增殖和应答的诱导者，能促进CTL和Th的生成，一个DC细胞能诱化1003 000个T细胞【7】 。近来研究发现，DC的功能还受许多生化因素调控，如DC缺乏NOX2氧化酶将会导致抗原提呈功能下降，如果E-Cadherin黏附分子缺失，在体内诱导一种完全不同的T细胞免疫，即CD8+ T细胞免疫耐受 。【8】肿瘤细胞对宿主免疫应答的逃逸是恶性肿瘤发生、发展的重要机制之一。在带瘤动物及肿瘤患者体内，都发现循环和局部浸润的DC存在功能上的缺陷。Fifis【9】等 的研究发现，肿瘤细胞能够通过一系列机制抑制机体的抗肿瘤免疫反应，激活特异的调节性CD 4+、CD8+ T细胞以下调细胞毒性T淋巴细胞的效应等。如果对DC进行肿瘤抗原修饰，再将负载肿瘤抗原的致敏DC回输机体，则可以解决因DC功能缺陷造成的肿瘤免疫逃逸，诱导机体产生有效的抗肿瘤免疫应答。而使用何种抗原及如何将肿瘤抗原在体外与DC结合以弥补其功能缺陷，则成了应用DC瘤苗进行免疫治疗的关键。有研究表明：DC除了存在成熟和未成熟状态外，还存在许多功能性状态，DC免疫原性的强弱受肿瘤微环境的调节。信号转导蛋白和转录激活子3(snal transducer and activator of transcription 3，STAT3)高度激活以及慢性炎症相关炎症介质诱导DC功能障碍，削弱了机体对肿瘤的免疫监督103.DC疫苗的制备3.1肿瘤抗原肽致敏的DC肿瘤疫苗在DC瘤苗抗肿瘤免疫方面最引人注目的研究工作是应用抗原或抗原多肽在体外冲击致敏DC，然后将负载肿瘤抗原的致敏DC回输或免疫接种亚荷瘤宿主，进行肿瘤免疫治疗。这种用肿瘤抗原冲击的DC瘤苗具有很好的靶向性，避免了不必要的免疫刺激，可以利用较大浓度的肿瘤抗原以更有效地促进T细胞的激活. 用肿瘤抗原冲击的DC瘤苗具有很好的靶向性，避免了不必要的免疫刺激，可以利用较大浓度的肿瘤抗原以更有效地促进T细胞的激活。Liu等11 利用CD40配体(CD 40L)转染的肿瘤细胞可以向DC同时传递肿瘤抗原和成熟刺激，这些激活的DC对能产生IFN-r 的CD8+ T细胞作用更为强大，从而更好地加工肿瘤抗原，促进特异性细胞毒性T细胞的增殖。Prestwich等46最近又发现，负载有感染呼肠病毒的人黑素瘤Me1888细胞的DC(DCMelReo)能通过细胞的直接接触诱导共培养的NK细胞产生IFN-r，通过腺病毒转染，同样可以刺激DC疫苗的产生。以肿瘤特异性抗原或肿瘤相关抗原多肽致敏DC回输体内后能诱导机体产生抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)，发挥免疫保护作用【12-15】。肿瘤抗原的获得可直接由肿瘤细胞提取纯化或经弱酸洗脱或人工合成，也可以由cDNA、mRNA通过基因工程的方法合成。该疫苗不足之处：(1)临床肿瘤组织来源较困难；(2)必须清楚肿瘤抗原表位；(3)应用时受MHC限制；(4)有诱发自身免疫性疾病的危险3.2应用肿瘤细胞的蛋白提取物刺激DC，与单一肿瘤抗原肽致敏DC相比，肿瘤细胞的蛋白提取物刺激DC能避免肿瘤抗原多肽刺激存在的某些不足，如无需明确的肿瘤抗原，可能有多种不同的肿瘤抗原冲击DC，从而诱导针对不同抗原决定簇的CTL克隆等。可以利用超声波破碎、反复冻融、诱导细胞凋亡的方法制备肿瘤抗原，这种抗原具有多种抗原表位，更有利于诱导DC对肿瘤细胞的免疫攻击肿瘤细胞的蛋白提取物刺激DC可克服肿瘤抗原或多肽冲击DC存在的某些不足。如无需明确肿瘤抗原，可能有多种不同的肿瘤抗原刺激DC从而诱导针对不同抗原决定簇的CTL克隆等。Zhou等16 以肿瘤一睾丸抗原(CTA)家族中的XAGE一1b蛋白致敏DC刺激自体T淋巴细胞产生特异杀伤性和细胞毒性T细胞，体外研究证实其对有相应CTA表达的肺癌细胞可产生较好的杀伤效果。但是，肿瘤细胞蛋白提取物中包含的机体自身的正常抗原免疫机体后可能诱发自身免疫性疾病。3.3肿瘤抗原编码基因致敏DC疫苗将肿瘤抗原编码基因或某些细胞因子基因等导入DC使之持续有效表达肿瘤抗原，诱导抗肿瘤免疫反应。Gabrilovich等【17】 用野生型P53致敏的DC治疗22例小细胞肺癌患者得出此种疫苗安全并能产生特异性的免疫应答。Moran等【18】 将委内瑞拉马脑炎病毒复制子转染DCs细胞，用其免疫过表达neu原癌基因蛋白的荷瘤小鼠，结果转基因高水平表达，诱导活化neu特异性CD8+T细胞，产生抗NEU的IgG抗体。3.3 肿瘤全细胞抗原致敏的DC肿瘤疫苗由于目前肿瘤特异性抗原或肿瘤相关抗原多肽获得明确鉴定的较少，因此以全部肿瘤抗原信息致敏DC成为一种简便有实效的方法。肿瘤全细胞抗原可由以下途径获得：(1)肿瘤细胞裂解液。此法不要求获得新鲜的肿瘤组织或活肿瘤细胞，而是通过反复冻融或超声破碎肿瘤细胞，离心过滤即可获取肿瘤细胞的裂解上清液。Yi等【19】 采用同源肿瘤细胞溶解物片段，负载DC接种12B1荷瘤小鼠，结果表明，致敏的DC 能够在其细胞表面高表达CD40 、MHC-II分子，并产生更多IL-12，疫苗接种荷瘤小鼠后，小鼠生存期延长，肿瘤消退率达75% ，用该方法制备的DC疫苗已进入II期临床实验；(2)凋亡肿瘤细胞及产物。未成熟DC可以吞噬凋亡体并加工和提呈肿瘤抗原。Prahlad20等分别用神经胶质瘤细胞及其裂解产物、凋亡产物、肿瘤RNA以致敏DC，同时用星细胞瘤株和LAK敏感细胞株对照，通过细胞计数分析及HLA-II、CD-86、IL-12等抗体检测DC细胞诱导的抗肿瘤活性，发现用肿瘤细胞凋亡物制备的DC疫苗，在体外产生的肿瘤特异性淋巴细胞毒反应最强；(3)坏死或死亡的肿瘤细胞。通过反复冻融、加热、低渗透压休克处理、钼酸盐处理以及7线照射等方法可以获取坏死或死亡的肿瘤细胞及产物(如热休克蛋白HSP70)，Qiu等21将鼠未分化的结肠癌细胞(CT-26)进行热休克处理(42 ，lh)，发现热休克刺激的CT-26较未处理的CT-26可更高的表达HSP70，分别用热刺激后CT-26与CT一26裂解物致敏DC接种小鼠，测定诱导CTL分泌1FN一7的量，前者显著高于后者；(4)活肿瘤细胞；(5)肿瘤细胞与DC融合。实验表明DC-9瘤融合的杂交瘤苗，既保留了DC的生物学特性，又可避免繁杂而无效的TsA鉴定。Wei【22】 等将绿色荧光标记的树突状细胞与用红色荧光标记的自身肿瘤细胞融合，然后用即时发光细胞分选技术纯化该融合细胞，将该细胞作为疫苗，治疗转移黑色素瘤患者取得了较好效果。Imura等23用最新的电融合技术构建DC一肿瘤杂交细胞，在体外作为刺激细胞诱导肿瘤特异性细胞毒作用，通过测定细胞毒性及释放的IFN一r ，发现与肿瘤细胞共孵育过夜的DC相比，DC瘤杂交细胞能更有效地诱导肿瘤特异性CTLs增殖。Vujanovic等24 发现，腺病毒转染的DC(AdDC)经LPSIFN-r诱导成熟后能增加其表面跨膜型TNF(tmTNF)和transpresented(trans)IL-15的表达，二者能通过细胞间的直接接触协同促进NK细胞表面活化性标志CD69表达增加，IFNr 的分泌、细胞增殖以及抗肿瘤活性均得到增强.。34用肿瘤细胞的mRNA体外刺激DC以DC为基础的基因疫苗有：转染肿瘤抗原RNA 的DC疫苗、转染肿瘤抗原DNA 的DC疫苗及转染细胞因子和趋化因子基因的DC疫苗等。用于致敏的RNA可以是肿瘤细胞的总RNA或mRNA。通过PCR可从有效的肿瘤组织中扩增到足够数量的mRNA刺激DC。可通过差异筛选法获得肿瘤细胞特异性表达的肿瘤mRNA，用这种经差异筛选的肿瘤mRNA刺激DC，可避免自身抗原刺激DC诱发自身免疫疾病的危险。另外，RNA疫苗半衰期期短，只在宿主细胞的胞质中表达，不会整合到基因中。所以，RNA疫苗没有导致癌变的潜在危险性，有其独到的应用价值。转染肿瘤抗原体外抗原肽致敏DC回输后，可引起特异免疫保护作用，但并不持久，为诱导持久的抗肿瘤免疫作用，有研究报道25.26 ，从有限的肿瘤组织中扩增足量的有效刺激DC的mRNA，采用差异筛选方法获特异性表达的肿瘤特异性抗原mRNA 导入DC，制备RNA疫苗，或将肿瘤抗原基因以裸DNA方式导人DC，或以病毒为载体转染DC，使DC持续表达肿瘤抗原，可解决上述两种DC肿瘤疫苗因抗原解离、肿瘤来源有限、有诱发自身免疫性疾病危险等不足。也有报道27,28，用促进抗肿瘤免疫应答的细胞因子或趋化因子基因(GMCSF、IL一2，IL一12，TNF-a等)直接转染DC或转染肿瘤抗原修饰的DC；疫苗可促进DC成熟、提高DC活性以增强DC疫苗效能。近年已证明肿瘤来源的mRNA致敏DC也是一种诱导CTL和产生肿瘤免疫的有效途径。从肿瘤组织中扩增到足量用于刺激DCs的mRNA，并通过筛选获得特异表达的肿瘤mRNA，以此作为抗原冲击DCs制备疫苗。该疫苗可避免诱发自身免疫性疾病的，有更高的临床实用价值。Peng等【29】 使用此瘤苗有效地诱导出特异性细胞毒T细胞，杀伤肿瘤细胞。最近，也有学者将从肿瘤细胞提取的mRNA导入DC制备成疫苗用于前列腺癌的临床治疗取得了有效的治疗效果【30】35 DC分泌的细胞膜外小体肿瘤疫苗DC可分泌一种细胞外膜性小体(Dexosomes)，细胞外小体(exosomes)是直径为5090 nm的膜囊体，可为多种细胞所分泌。它富含MHC-I、MHC-II抗原递呈分子和CD1lb、CD86等黏附因子和共刺激因子。先前的研究表明，DC负载的细胞外小体在小鼠体内可以诱导抗肿瘤反应，Dexosomes浓缩了整套来源细胞的抗原成分，含有与自身细胞特殊功能相关的蛋白。最近研究表31-32Dexosomes具有抗原呈递能力和抗瘤作用：(1)可通过内含的MHC与TCR特异性结合，有效地向CD4+ 、CD8 +T细胞和NK 细胞提呈抗原，使之活化并增强其杀伤活性；(2)可将MHC-I MHC一类分子转运至幼稚DC，导致细胞免疫应答之间的放大效应；(3)能够诱导机体产生IFN-7、IL-12等效应性抗瘤细胞因子，从而发挥抗瘤免疫生物学作用。与DC相比，Dexosomes作为一种非细胞成分，具有可以冷冻储藏、抗原性稳定的优点，更重要的是Dexosoraes不被激活的CTL细胞所抑制，能够更为持久的发挥抗原提呈作用33。故DC来源的Dexosomes较DC细胞成分瘤苗存在诸多优势，有取代DC疫苗之趋势，其多靶点、多途径、高效能的抗瘤作用使之有望成为一种新型的肿瘤疫苗34 。36 负载肿瘤抗原的完全重组的酵母疫苗Andrewl35 等用小鼠淋巴瘤细胞表达的0VA抗原负载酵母在体外刺激DC，导致DC的成熟及MHCI、MHC一限制性的0VA特异性初始T细胞的激活。其中酵母具有免疫佐剂的作用，对DC提供强有力的刺激，导致共刺激分子、MHC分子和IL-12的上调，能更有效的将肿瘤抗原呈递给T细胞，发挥抗肿瘤的免疫反应。3.7 细胞因子的介导自然杀伤(NK)细胞和树突状细胞(DCs)是免疫系统中两种重要的细胞，它们在机体先天性和适应性免疫应答过程中都起着关键性作用，被认为是联系二者之间的关键因素。实验证实，将NK细胞与DCs细胞共培养时，可以提高NK细胞的杀伤能力，同时增强DCs的抗原提呈能力。NK细胞可以被DCs激活，DCs可以诱导NK细胞成熟。有研究表明，利用NK细胞和其分泌的细胞因子，可诱导DCs分化为一种新型疫苗DC1N 或aDCI，这种疫苗具有高迁移力、高免疫刺激能力、高水平分泌IL-12p720的特点。【47】在给予IL一12、ILl8以及用于维持存活的低剂量IL-15预先活化的基础上，NK细胞能被诱导分化为稳定的具有记忆功能的细胞亚群，当再次接受相同刺激时，该群细胞能以不依赖于细胞增殖的方式产生大量IFN-r从而间接刺激Dc的产生。另外，【48】TNF-a 能够显著增强外周血单个核细胞来源DC的分化和成熟，不同浓度TNF-a能不同程度地刺激DC功能成熟TNF-a 浓度为20ngml时刺激DC分化成熟的作用最强。山西医科大学任建林【25】研究表明TGF-b受体阻滞剂SB一431542对增强融合疫苗抗肿瘤效应有明显的增强作用4 DC的导入方式、剂量由于各位学者选择的治疗对象的不同，将DC注入人体的方式也各不相同，但总体上来讲都考虑到DC在进入人体后有一个迁移成熟的过程。就剂量而言，由于目前DC治疗尚处于实验阶段，故使用的细胞数量差异较大，但一般不低于106 。按导入方式的不同可分为以下几种。41 静脉注射Small等36的方案颇为正式，他们给体外负载抗原的DC命名为“Provenge”。治疗于门诊即可进行，细胞制剂应于制成后8小时内输入，且输入时间应30分钟。患者完成输入后需观察30分钟。由于个体差异的存在，每位患者输入的DC数量不同，最低为14106 ，最高为1276106 ，均值为123106 。作者并观察了不同细胞数量对疗效的影响：当输入细胞数 100106 时，出现病情进展的平均时间为31.7周；当输入细胞数10010时，出现病情进展的平均时间为121周。而Fong37等 采用的方案则是28天免疫1次，共2次，并认为当输入细胞数在107 109范围内时，剂量对免疫反应无影响。Patricia38 治疗的间隔时间为6周，共进行6次。Rains等39治疗有转移的结直肠癌时，共进行4次，每4周1次，其中第1，3次使用新鲜分离的DC，第2，4次则使用冻存的DC，并且剂量只有前者的一半。42 皮下注射Banchereau等40的方案如下，治疗于门诊进行，每两周1次，共4次。剂量分四种：01，025，05，1010 DCskg，皮下注射。部位则在双侧大腿和上臂(进行过放疗或通过外科手术清除了局部淋巴结的肢体除外)。各部位应间隔68 cm。John41等 在三角肌皮下注射以0102 m1生理盐水为载体的106 负载抗原的DC，每两周1次，共免疫3次。43 淋巴结内注射 除了皮下注射以外，Brossart42还尝试了腹股沟淋巴结注射治疗乳腺癌和卵巢癌，每次6510 6(均数)，每14天1次，共3次，如果有效则每28天治疗1次，直至出现病情进44 肿瘤局部多点注射 当有超过1 cm 的皮肤或皮下转移肿瘤时，Trozzi等43 选择了进行肿瘤局部多点注射，每处肿块共注入3107 DC，只免疫一次。结果发现DC能在注入部位存活至少6周且不会出现迁移，故只在局部有效。5DC疫苗的临床应用研究关于DC疫苗的临床治疗应用，目前主要限于肿瘤患者的临床实验及临床治疗。包括有淋巴瘤、黑色素瘤、前列腺癌、多发性骨髓瘤、肾癌、自血病、肺癌等。Kobayashi等【44】 对1例50岁诊断为期乳腺癌并双侧腋窝淋巴结转移的病例进行免疫治疗。用自体同源的肿瘤碎片冲击致敏DC并将此DC注射人右侧腋窝淋巴结，结果发现转移灶消退，组织学检查发现此淋巴结内有大量的CD45+T淋巴细胞聚集。从而得出结论，DC在晚期乳腺癌治疗中能产生安全有效的抗肿瘤作用。DC的肿瘤疫苗在肺癌治疗方面也有令人兴奋的发现。Chiappori等【45】在临床期研究中发现P53致敏的DC疫苗治疗继放疗后的大范围的非小细胞肺癌是安全的并可提高患者的生存质量。6 展望理想的肿瘤抗原DC疫苗应当能够诱导针对不同肿瘤抗原表位的多克隆反应，包括CD8+ 和CD4+ T细胞反应；不诱导自身免疫反应，没有安全隐患；不受受治者MHC型别的限制；易于制备和应用。但事实上无论用何种方法制备的DC疫苗都很难完全满足以上条件。尽管肿瘤DC疫苗在部分恶性肿瘤的治疗中显示出良好的效果，但也存在一些问题，如DC诱导的最佳途径及其成熟的调控，肿瘤抗原的种类及负载方法，DC疫苗接种的剂量、次数及注入途径等。肿瘤抗原种类及负载方法有多种，对于特定的某一种肿瘤，需要经过大量实验找到一种既能有效增加DC提呈功能又能降低其副作用的方法。早期的临床试验在DC疫苗质量、研究设计方案、疗效评价标准及患者适应证选择等方面仍存在一些问题， 建立统一的免疫治疗评价标准和对诱发出临床免疫应答的具体描述。目前大多数的临床研究尚处于论证其可行性阶段，或应用于I期、期临床。但我们相信，随着生物技术的迅速发展，DC疫苗终究会在人类与恶性肿瘤的抗争中发挥重要作用。参考文献1 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