实验八-丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用.doc_第1页
实验八-丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用.doc_第2页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

实验八丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用【目的】验证丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。【原理】琥珀酸在琥珀酸脱氢酶催化下脱氢生成延胡索酸,脱下的氢被受氢体接受。本实验用亚甲蓝(MB)作为受氢体,亚甲蓝接受琥珀酸脱下的氢由蓝色还原成无色的甲烯白(MBH2)。丙二酸与琥珀酸分子结构相似,能竞争性抑制琥珀酸脱氢酶。通过观察亚甲蓝颜色消退的程度,可以判断丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制程度。【器材】试管及试管架、滴管、剪刀、研钵或20ml匀浆器、电热恒温水浴箱。【试剂】1. 0.1mol/L磷酸缓冲液(PH7.4)取0.1mol/L Na2HPO4溶液19ml和0.1mol/L NaH2PO4溶液81ml混合即可。2. 1.5% 琥珀酸钠溶液3. 1% 丙二酸钠溶液4. 0.02% 亚甲蓝溶液5.液状石蜡【操作】1. 取新鲜动物肌肉或肝5g左右,放入研钵,用剪刀将组织剪碎,然后加入10ml在冰箱中保存的PH7.4的磷酸缓冲液充分研磨均匀(或在匀浆器内进行匀浆,制备成20%匀浆液)。2. 取4支试管,编号,按下表操作:表3-11 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用加入物(滴)1234匀浆1010101.5%琥珀酸钠溶液101010201%丙二酸钠溶液101010蒸馏水2010200.02%亚甲蓝溶液101010103. 各管混匀后,各加少量液状石蜡覆盖在液体上,置37水浴中保温,随时观察各管颜色变化,并记录各管亚甲蓝褪色时间。【结果及分析】比较各管亚甲蓝褪色情况,并对实验结果进行分析。【思考题】1. 什么是竞争性抑制作用,

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论