辽宁省药品生产企业无菌检验实验室.doc

附件：辽宁省药品生产企业无菌检验实验室调研情况总结根据国家食品药品监督管理局药品认证管理中心文件关于组织对无菌检验实验室调研的通知（药认【2010】33号）的要求，我中心于2010年6月29日至7月9日对全省10家药品生产企业的无菌检验实验室进行了现场调研（各企业的调研报告附后），调研情况总结如下：一、调研的工作安排（一）拟调研企业选取原则在我省现有的59家无菌制剂生产企业中，按企业规模的大中小分三个层次选取；覆盖疫苗、生物制品、大容量注射剂、冻干粉针剂、小容量注射剂等需进行无菌检验的制剂类型。（二）调研的方式和程序向拟调研企业发放关于无菌药品生产企业的无菌检验实验室调研情况的通知，详细制定无菌检验实验室调研方案企业申报资料清单，请相关企业于2010年7月5日前按要求准备申报资料。调研的现场检查程序参照药品GMP认证现场检查程序进行。采用组长负责制的原则，检查组成员按照GMP认证现场检查派出模式，抽取检查员库中业务骨干参与调研现场检查，原则上为2-3人，调研时间为1天。（三）调研的内容按照无菌检验实验室调研方案检查清单中所列的人员和培训、培养基、菌种、实验室的布局和运行、设备、文件、实验操作等七个方面开展调查工作，根据以上内容制定无菌检验实验室调研检查表，由检查组结合企业申报的资料以及现场检查情况填写，检查组对企业无菌检验实验室的管理情况提出综合评价意见，并形成无菌检验实验室现场调研报告。（四）调研评定标准根据药品生产质量管理规范、国家食品药品监督管理局（以下简称国家局）制定的药品GMP认证检查评定标准、以及2010版中国药典附录 Q药品微生物实验室规范指导原则实施调研。（五）结果处理中心将各企业的无菌检验实验室现场调研报告进行横向对比评估，对企业无菌实验室管理现状按无菌检验实验室调研方案中所列七个方面内容进行归纳总结，对企业无菌实验室管理中存在的缺陷进行分析，并评估其在制剂的质量控制中存在的风险，形成综合评估报告。二、调研总结及评估（一）人员和培训1、实验室的人员总数占所有直接从事药品生产人员总数的比例为9%-18.9%，从事无菌检查检验人员占实验室人员总数的比例为8%-43%。2、所查企业从事无菌检查检验人员的教育背景为药学和微生物学、生物工程、医学检验等专业中专至本科学历，经过辽宁省食品药品检验所、各市局、企业内部组织的培训，培训内容涉及GMP管理知识、微生物知识、无菌检查法、菌种管理及操作培训、培养基配制及灭菌等内容，基本能满足微生物实验工作的要求。3、所查企业均建立了培训管理制度，制定了培训计划，能按计划要求对各级检验人员进行培训，并进行考核，建立个人培训档案。但部分药品生产企业培训的针对性不强，对检验人员从事无菌检验工作的实际操作技能缺少再次的确认和考核。4、从事无菌检验的管理人员的从业年限在6年至24年之间，各企业相关管理人员在微生物检验及菌种传代、菌种管理方面工作经验较丰富；接受过药品GMP相关法规、企业质量管理、实验室安全、实验结果评估和数据偏差处理等方面的培训并具备处理实际问题的能力。但是个别管理人员对于偏差调查分析的掌握还需强化。5、检验人员在接受了微生物学基础知识、无菌试验及无菌技术、实验室安全试验等方面的培训后，基本能够按照企业制定的实验操作规程进行实验，并如实记录原始数据。6、质量保证人员能够根据实验报告确认试验结果是否符合标准，批准物料放行，对实验数据进行审批。但仍然存在部分质量保证人员对于无菌检测知识掌握不全面的现象。（二）培养基1、企业使用的培养基种类：大部分企业无菌检验使用的培养基为硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基。2、培养基供应商审计方面：存在问题：大部分企业对培养基的供应商审计工作有不完善之处，体现在未对供应商进行质量评估、收集的供应商资质不全等方面。3、培养基配制、灭菌的管理和验证工作：企业能够按照培养基的使用说明书和验证结果制定培养基配制及灭菌的操作规程，详细规定培养基的灭菌温度和灭菌时间，并有相应记录显示操作过程。大部分企业培养基灭菌的验证工作是随灭菌设备一同进行。仍存在以下问题：（1）大部分企业未对不同灭菌条件下的培养基灭菌程序进行考察，以得到培养基最佳的灭菌条件。一般仅考察了一个灭菌条件。发现一家企业未进行培养基灭菌程序的验证工作。（2）培养基配制过程中，为使培养基能完全溶解于水中，有的企业采用先预热注射用水（纯化水），再加入培养基干粉，但企业未对预热过程进行考察，比如预热时间，预热温度，预热用的热源等，尤其是预热用的热源，有的企业采用电加热器直接加热，有可能因为预热容器局部过热而影响培养基的促生长质量。 （3）有的企业对配制灭菌后的培养基管理不完善，将其存放于物流通道；培养基外包装的标记信息不全面，存在发生混淆的风险。4、大部分企业的脱水培养基能按照说明书中的贮藏条件储存。较好的企业将脱水培养基存放在培养基专用恒温储存柜里（15-20），并定期监测温湿度情况。但仍有一家企业存在未按规定条件贮藏，存放于无温湿度控制的实验室内(应在阴凉干燥处储存)。5、必要的培养基灭菌后pH值的测定工作未被企业所重视，在培养基灭菌后测定pH值的企业中部分企业仅用pH试纸粗测。对于固体培养基而言，pH试纸测定的准确性较低，大部分企业未配备测定固体培养基的针式pH计。6、培养基配制用水为注射用水或者纯化水。7、大部分企业能对每批制备好的培养基进行灵敏度检查，已制备好的培养基在规定温度下预培养，合格后使用。有两家企业仅对干粉培养基做灵敏度检查，不检查配制后的培养基灵敏度。（三）菌种1、各企业进行无菌检验试验用菌种基本来源于中国药品生物制品检定所。但均无法提供菌种的来源证明，仅能提供菌种的购买发票或销售单。2、各企业均不同程度地建立了有关菌种管理的程序文件，并能按其进行菌种的管理，但仍有以下方面不尽完善：（1）菌种传代时未进行纯度、特性等关键指标的确认、鉴定，没有相应记录；（2）生孢梭菌工作菌株的保存方式不正确，未使用厌氧保存培养基保存；（3）一家企业的菌种管理制度中未包含标准菌株申购的相关内容，从标准菌株传代至工作菌株的操作过程未严格按照相应SOP进行操作和记录，代次划分不正确；一家企业菌种管理制度中缺少从标准菌株到工作菌株操作程序的规定以及菌株确认程序，缺少菌种生长的培养基种类和培养条件的规定；（4）有两家企业在现场仅见到日常检验用的菌株：金黄色葡萄球菌，缺少培养基灵敏度试验用的标准菌株；（5）一家企业未单独制定菌种管理制度，相关内容分散于无菌检查法操作规程以及抗生素微生物检查操作规程中。 3、各企业菌种的保存工作均较为完善，能够标注菌种名称、标准号、接种日期、传代数，并按规定方式和条件保存。（四）实验室的布局和运行1、各企业的实验室区域划分基本合理，能够防止微生物污染，符合生物安全的要求。有的企业无菌检验室将人流进入通道与退出通道分别设置，更大程度地防止了交叉污染。详见附表5。2、企业无菌检查试验室的人流、物流通道能够严格区分，并制定相应控制程序，能够防止了交叉污染。3、调研企业当中，除一家空调净化系统连续开启外，其他企业洁净区的空调净化系统均不连续开启，企业均能对无菌检验室的空调净化系统进行验证，包括对尘埃粒子、沉降菌、风速、换气次数、静压差、温湿度等进行监测并汇总分析，能够制定洁净区管理规程，包括洁净区的清洁、消毒、维护和检测的程序。存在以下问题：洁净区使用不连续开启空调净化方式的无菌室空调净化系统验证中缺少对自净时间的验证。4、企业使用的消毒剂有乙醇、新洁尔灭等，能够定期更换使用，空气消毒使用丙二醇等，大部分企业未注意到应将消毒剂过滤除菌后使用。5、个别企业阳性对照室内的生物安全柜排风口位于房间内，容易形成空气涡流，存在一定生物安全方面的风险。6、个别企业阳性对照室距离无菌检验室、培养基培养区较远（分别位于两个建筑物内），培养基及供试液在传递过程中有受到污染的风险。（五）设备所查企业基本能配备与检验能力和工作量相适应的仪器设备，并能按要求定期对仪器、仪表设备进行检定、校准，有相应的设备操作、维护、保养规程及记录。检验用设备的验证情况：1、大部分企业培养基的灭菌设备、培养设备、培养室均进行了验证，但仍存在以下问题：（1）有的企业培养室和培养箱未做温度分布均匀性验证。（2）有五家企业未进行培养箱的验证工作。2、各企业的培养基灭菌设备有自动温度控制系统，其中有6家企业的培养基灭菌设备具备自动记录功能。3、各企业的培养基的配制、培养等设施均能与检验工作量相匹配，其中有2家企业设置培养室。（六）文件1、各企业均能按规定对产品的无菌检验方法进行验证，并按验证结果制定无菌检验的操作规程。但仍存在以下问题：（1）由于2005版中华人民共和国药典三部未明确要求疫苗、生物制品需进行产品的无菌检验方法验证，各相关生产企业均未开展此项工作，但为了满足2010版中华人民共和国药典的要求，企业已经着手开展相关验证工作。（2）1家企业虽然进行了产品的无菌检验方法验证，但未将验证结果作为该产品无菌检验操作文件的基础，验证工作失去指导实际检验操作的意义。（3）1家企业虽进行了产品无菌检验方法学验证，但验证中的样品取样量不正确，依此验证结果制定产品的无菌检验操作文件，可靠性差。2、大部分企业产品的无菌检验记录及时，记录的内容能包含关键的实验细节，能确认数据的完整性。有数据偏差的调查规程和相应记录。但个别企业仍存在如：检验记录中缺少阳性菌种类及加入量的描述，缺少使用设备的型号描述，缺少偏差记录内容等问题。（七）实验操作1、各企业均能制定检验实验操作（包括无菌检验）相关的实验标准操作规程，现场检查各企业的实验人员（包括无菌检验人员）能够按照标准操作规程进行较为规范的操作。经检查，各企业产品无菌检验用的样品量均能符合药典的要求。2、企业均能针对试验中数据的偏离制定调查管理规程，但是记录显示，