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文档简介

实验六血液葡萄糖的测定 福林 吴宪氏法 一 实验目的 1 掌握采用福林 吴宪氏法测定血液中葡萄糖的原理 2 熟悉分光光度计的使用 二 实验原理 磷钼酸 钼蓝 蓝色 C6H12O6 2Cu OH 2 C5H11O5COOH Cu2O 3Cu2O 3H3PO4 2MoO3 12H2O 6CuO 3H3PO4 Mo2O3 12H2O Na2CO3 H2O NaOH NaHCO3NaOH CuSO4 Cu OH 2 Na2SO4 碱性铜试剂 钼蓝溶液显蓝色 其蓝色的深浅与血滤液中葡萄糖的浓度成正比 选用颜色深浅较接近于测定管的标准管一同比色 即可求出测定管中葡萄糖的含量 血糖管的使用 血糖管下部的管径较细 以避免还原生成的氧化亚铜被空气中的氧再氧化 降低实际结果 三 实验步骤 1 全血无蛋白滤液的制备 抗凝血1ml 蒸馏水7ml 混匀 1 3mol L硫酸1ml 振摇 10 钨酸纳1ml 振摇 过滤 放置5min 无蛋白血滤液 2 按表操作 混匀 置沸水浴中煮8min 取出用流动自来水冷却3min 无蛋白血滤液 蒸馏水 标准葡萄糖应用液 碱性铜试剂 空白管 标准管 测定管 1 0 2 0 1 0 1 0 1 0 2 0 2 0 2 0 血糖管 试剂ml 磷钼酸试剂 2 0 2 0 2 0 1 4磷钼酸溶液加至 混匀后放置2min 12 5 12 5 12 5 3 比色测定 将各管颠倒混匀后 用空白管调零 在420nm处测定吸收度 四 操作注意 1 等水沸腾后 才能放入血糖管 加热要准确8分钟 2 冷却时切不可摇动血糖管 以免还原的氧化亚铜被空气中的氧再氧化 降低实际结果 3 加入磷钼酸后迅速比色 4 分光光度计的使用 分光光度计的使用 1 接通电源 打开比色皿盖 预热20 30分钟后 调节波长至所需波长 2 将盛有空白溶液的比色皿放在比色架的第一格 其余放测定溶液 将比色皿盖盖上 此时空白溶液在光路上 将光点调到 T 调节T为100 3 将光点调到 A 轻轻拉动比色架固定拉杆 使第二个比色皿溶液处在光路中 此时读数即为该溶液的吸收度 4 依次拉出第三 第四个比色皿 分别读取吸收度 5 测定完毕 先打开比色皿盖 再断电源 五 结
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