B细胞淋巴瘤白血病2在子宫腺肌病中的表达及意义.doc

B细胞淋巴瘤/白血病2在子宫腺肌病中的表达及意义作者：刘素巧单位：石家庄市第二医院妇产科【摘要】目的研究B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl2)在子宫腺肌病远肌层内膜、子宫内膜—肌层界面(EMI)处和异位灶内膜中的表达情况。方法应用免疫组织化学SP法测定40例腺肌病子宫(增生期20例、分泌期20例)的远肌层内膜、EMI处和异位灶内膜中Bcl2的表达。结果 从增生早期至分泌早期，Bcl2在EMI处腺上皮细胞的表达均呈阳性反应，增生中晚期Bcl2表达最强，至分泌中晚期则表达基本消失。EMI处、异位灶腺上皮细胞的表达高于远肌层腺上皮(P0.05)，且增生期高于分泌期(P0.05)。EMI处与异位灶的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 异位灶腺上皮细胞Bcl2的表达与EMI处的表达相似，均高于远肌层内膜。 【关键词】 子宫内膜—肌层界面 子宫腺肌病 B细胞淋巴瘤/白血病2 免疫组织化学 The expression and significance of B cell lymphoma/leukemia2 in adenomyosis LIU Suqiao,HUO Yan,SHEN Liying,et al.Department of Obstetrics and Gynecology,the Second Hospital of Shijiazhuang,Hebei,Shijiazhuang 050051,China 【Abstract】 Objective To investigate the expression of B cell lymphoma/leukemia2 (Bcl2) in uterine endometria (functional layer),the endometrial myometrial interface(EMI) and ectopic endometrium of adenomyosis.Methods The expression of Bcl2 in functional laryer, EMI and ectopic endometrium was detected by immunohistochemistry streptavidin biotin peroxidase(SP) in 40 samples of endometria(and myometrial) with adenomyosis (20 samples at proliferative phase,20 samples at secretory phase).Results It showed that the expression of Bcl2 in EMI endometrial glandular cells was positive at prolifertive through early secretory stage and peaked at the end of proliferative stage,but negative at late secretory stage. The expression in EMI and ectopic foci were higher than that of functional layer (P0.05).The expression in EMI at proliferative stage was higher than that of secretory stage (P0.05).The expression of Bcl2 in glandular cells showed no difference between EMI and ectopic foci (P0.05).Conclusion The expression of Bcl2 in ectopic glandular cells was similar with that of EMI.It showed that ectopic glandular cells in adenomyosis probably originated from EMI. 【Key words】 Endometrialmyometrial interface;Adenomyosis;B cell lymphoma/leukemia2;Immunohistochemistry B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcell lymphoma/leukemia2,Bcl2)是一种抗凋亡蛋白。子宫腺肌病中病灶腺上皮的组织来源尚未完全阐明，Uduwela等1认为子宫不同于其他器官，子宫内膜与肌层之间缺乏黏膜下层，子宫内膜—肌层界面(endometrialmyometrial inferface，EMI)在子宫内是一重要区域，由基底层内膜和肌层连接带组成，其中基底层内膜厚约1 mm，肌层连接带即EMI肌层厚约4 mm，正常情况下，EMI肌层可见腺上皮，但不超过界面的2.5 mm。本文旨在观察子宫腺肌病异位灶内膜、EMI处内膜和远肌层内膜(指远离肌层靠近宫腔的功能层内膜，简称远肌层内膜)中Bcl2的表达情况。 1 材料与方法 1.1 标本来源 收集我院2005年10月—2006年11月因子宫腺肌病行子宫切除的40例子宫内膜(含部分肌层)和肌层异位灶的标本，根据病理HE染色结果和患者月经情况，将原位内膜分为增生期和分泌期各20例。异位灶内膜按原位内膜分期统计。患者年龄3851(44±5)岁。所有标本用10%福尔马林固定，石蜡包埋，5 μm切片，行HE染色和免疫组化染色。 1.2 抗体来源 鼠抗人Bcl2单克隆抗体、SP即用型试剂盒和DAB显色剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。稀释浓度采用1120，按试剂盒说明书进行。 1.3 实验方法 采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶连接法(SP法)检测Bcl2在子宫内膜和异位灶内膜的表达。 1.4 判断标准 Bcl2蛋白定位于细胞浆和细胞膜，棕黄色显色为阳性细胞。对每份样本随机选取5个高倍(400倍)视野进行观察。根据显色程度分为4级：(-)为无着色，(+)为淡黄色，(+)为黄色，(+)为棕黄色。 1.5 统计学方法 采用SPSS11.5统计软件，组间比较采用Ridit分析(参照单位分析)，P0.05为差异有统计学意义。 2 结 果 2.1 Bcl2在子宫内膜腺上皮的表达 EMI处腺上皮Bcl2的染色强度在增生期和分泌期均高于远肌层腺上皮(见表1)。增生期EMI处腺上皮细胞浆多表现为棕黄色或棕褐色颗粒。Bcl2表达在月经周期中存在着周期性变化，EMI处增生期明显高于分泌期(P0.05)，也高于远肌层腺上皮(P0.05)，增生中晚期Bcl2表达呈强阳性，到分泌中晚期则呈阴性，腺上皮细胞浆呈蓝色，见图13(封3)。 表1 Bcl2在子宫内膜及异位灶腺上皮的表达 注：与远肌层比较，P0.05；与分泌期比较，P0.05 2.2 Bcl2在异位灶腺上皮的表达 异位灶腺上皮的Bcl2表达在月经周期中存在周期性变化，显示增生期明显高于分泌期(P0.05)。见表2，图4(封3)。 2.3 异位灶与EMI处腺上皮中Bcl2的表达 增生期及分泌期子宫异位灶腺上皮与EMI处腺上皮Bcl2的表达，差异均无统计学意义(P0.05)。 3 讨 论 3.1 Bcl2与细胞凋亡 Bcl2首先在B细胞相关的恶性肿瘤中发现，是抑制细胞凋亡的原癌基因之一，不仅存在于淋巴造血组织，而且也存在于上皮细胞、子宫内膜及多种肿瘤细胞株中2,3，具有延长细胞生存时间的功能，是子宫内膜生理或病理凋亡中关键性的调节因子。 3.2 EMI的结构 胚胎学上EMI肌层与子宫内膜共同起源于苗勒管，而外周的子宫肌层为非苗勒管起源组织，二者的结构和功能不同。EMI与其他黏膜—肌层界面比较有其特殊性：(1)子宫内膜和肌层之间没有黏膜下层，故子宫内膜容易侵入肌层。(2)EMI肌层在结构和功能上都有别于外肌层，可以认为，EMI肌层是分化较低的子宫内膜。EMI肌层存在一个类似于子宫内膜的周期性雌、孕激素受体表达变化 ，外肌层则不存在这样的受体表达。显然，子宫内膜和EMI肌层共同形成了一个独立的功能单位，具有调节滋养细胞植入、提供营养、利于精子运输、月经期止血及局部免疫等功能1，对于维持子宫的生理功能具有重要意义。 3.3 Bcl2在子宫腺肌病中的表达 Bcl2在EMI处腺上皮和异位灶腺上皮的表达，均显示增生期强于分泌期。提示Bcl2的表达可能受卵巢甾体激素的调节。Bcl2在两处的表达，均高于远肌层腺上皮，说明Bcl2在不同部位的受控机制有差别，Bcl2的高表达参与了异位内膜的浸润与生长，也可能与病灶局部高雌激素对Bcl2的升调有关。金海燕等4研究表明，Bcl2在子宫腺肌病基底层内膜的表达与异位灶内膜的表达相似，均高于功能层内膜的表达，且异位灶腺上皮增生期强于分泌期，与本研究结果类似。张水蓉等5研究表明子宫腺肌病患者的异位内膜组织中，Bcl2的表达缺乏周期性改变，这可能与Bcl2表达受雌孕激素影响有关，因雌激素分泌存在2个峰值，分别在增生晚期和分泌中期，Bcl2表达的差异可能与患者月经周期的不同阶段有关。从EMI结构的特殊性和Bcl2在EMI处和异位灶腺上皮表达的类似性可推测：异位灶腺上皮可能来源于EMI处腺上皮；同时两处腺上皮Bcl2的高表达所致的细胞凋亡减弱，细胞生长周期延长，异位病灶得以长期发展，可能与子宫腺肌病的发生有关。在月经周期中，远肌层腺上皮Bcl2表达显著低于EMI处，此种弱表达促进远肌层腺上皮的凋亡，引起内膜脱落，因此，子宫内膜的周期脱落可能受Bcl2的调控。 对于肌层异位灶内膜的组织学来源的探究，有人在子宫腺肌病患者的子宫中作连续病理切片检查，证明子宫肌层中的内膜腺体与子宫内膜基底的腺体有连续关系。而且多次妊娠和刮宫均使子宫腺肌病发病率增高的报道，也提示EMI处的损伤可能使得某些组织损伤因子发生改变，进而促进子宫腺肌病的发生。 从本研究推测，降低EMI处和肌层异位灶内膜Bcl2的表达是治疗腺肌病可采用的方法，将能够降低EMI处Bcl2表达的药物附加在宫内节育器上将为预防子宫腺肌病提供有效方法。【参考文献】1 Uduwela AS，Perera MA，Aiqing L，et al.Endometrialmyometrial interface：relationship to adenomyosis and changes in pregnancyJ.Obstet Gynecol Surv，2000，55(6)：390400.2 黄凤英，林秋华，方小玲.Bcl2和bax蛋白在正常子宫内膜中的表达J.中华妇产科杂志,2000,35(3):183.3 Harada T,Taniquchi F,Izawa M,et