IL-1β-511基因多态性与冠心病相关性研究.pdf

一种重要指标 8 9 胃癌多发生于增殖活跃的细胞 PCNA 呈过度表达 PCNA 高表达者提示细胞处于增殖 旺盛状态 肿瘤浸润转移机会大 预后差 本实验证实了 PCNA 和 NF Bp65 在胃癌中的 高表达 并在胃癌的发生 发展中可能有协同作用 两者的共同表达可能有助于判断胃癌的恶性转化 以及临床病理过程及预后 同时认为 NF B 是胃癌 发生 发展中的危险因素之一 在一定程度上能反映 胃癌的恶性程度 故通过抑制 NF B 的活性可能有 助于降低胃癌的增殖 转移及浸润 也将为胃癌的化 疗提供新的思路 参考文献 1 Long YM Ye S Rong J et al Nuclear Factor kappa B A mark of chemotherapy for human stage gastric carcinoma J World J Gastroenterol 2008 14 30 4739 4744 2 Lee BL Lee HS Jung J et al Nuclear factor kappaB activaion cor relates with better prognosis and Akt activation in human gastric cancer J Clin Cancer Res 2005 11 7 2518 2525 3 Petrova RD Reznick AZ Wasser SP et al Fungal metablites mod ulating NF KB activity an approach to cancer therapy and chemo prevention J Oncology Reports 2008 19 2 299 308 4 Baud V Karin M Is NF kappaB a good target for cancer therapy hopes and pitfalls J Nat Rev Drug Discov 2009 8 1 33 40 5 Rangan G Wang Y Harris D NF kappaB signalling in chronic kidney disease J Front Biosci 2009 14 3496 3522 6 Royuela M Rodr guez Berriguete G Fraile B et al TNT alpha l 1 NF kappaB transduction pathway in human cancer prostate cancer J Histol Histopathol 2008 23 10 1279 1290 7 刘 国红 王 波 抑制 剂二硫 代氨 基甲 酸 吡咯 烷 提高 卵 巢癌 细 胞 顺 铂化疗 的敏 感性 J 中 国肿瘤 生物 治疗杂 志 2008 15 4 356 360 8 Kehnan Z PCNA Structure functions and interaction J Onco gene 1997 14 6 629 640 9 贾 瑞萍 卫 建平 张晓 琴 p73 p53 p21 及 PCNA 在 胃 黏膜 不 同 病 变中 的表达 和 临 床 意 义 J 中 国 医 师 杂 志 2005 10 1 54 57 收稿日 期 2011 10 26 修 回日期 2011 12 29 编辑 潘 雪 IL 1 511基因多态性与冠心病相关性研究 李汉成 1 吴开毅 2 赵 锦 3 1 儋州市 第一 人民医 院心 内科 海南 儋州 571700 2 儋 州市第 一人民 医院 神经内 科 海南 儋 州 571700 3 四环医 药控 股集团 有限 公司 海口 570105 中 图分 类号 R541 4 文献标 识码 A 文章 编号 1006 2084 2012 07 1085 03 摘 要 目的 探讨 IL 1 511 基因 多态 性与冠 心病 发 病危 险 性 的 关 系 方法 应 用 聚合 酶 链 反 应 限制性 内切酶 片段 长度多 态性 法检测 160 例冠 心病 患者 冠 心病 组 IL 1 511 基 因多 态 性 选 择 同期 健康体 检合 格人群 160 例 作为 对照组 结果 冠 心病组 TC TT 和 CC基 因频 率分别 为61 25 23 75 和 15 00 对照 组分别 为 57 50 14 38 和 28 13 差 异有统 计学 意义 P 0 01 冠 心 病组 T 等 位基因 频率 54 38 高于对 照组 43 13 差异 有统 计学意 义 P 0 01 TT 基因 型 为 冠心病 发生的 危险 基因型 OR 为 2 51 携带 T 等位 基 因的 冠 心病 患 者 TC 6 10 0 87 mmol L 和 LDL C 4 01 mmol L 水平高 于携 带 C 等位 基因 患者 结论 IL 1 511 基因多 态性与 冠心 病发病 明 显相关 TT 基因型 可能 为冠心 病发 生的危 险基 因型 关 键词 IL 1 511 基因 多 态性 冠心 病 Research on Correlation between IL 1 511 Gene Polymorphism and Coronary Artery Heart Disease LI Han cheng1 WU Kai yi2 ZHAO Jin3 1 Department of Cardiology Hainan Province Danzhou First Peo ple s Hospital Danzhou 571700 China 2 Department of Neurology Hainan Province Danzhou First People s Hospital Danzhou 571700 China 3 Sihuan Pharmaceutical Holdings Group Limited Haikou 570105 China Abstract Objective To explore the correlation between IL 1 511 gene polymorphism and coronary heart disease CHD Methods 160 patients with CHD were treated as CHD group and subjected to detect nucleotide polymorphism of IL 1 511 SNP by using polymerase chain reactions restriction fragment length polymorphism PCR RFLP techniques and 160 healthy people were selected as the normal control group Results The frequency of genotypes TC TT CC were 61 25 23 75 and 15 00 respectively in CHD group while 57 50 14 38 and 28 13 in control group P 0 01 The frequencies of mutant alleles T inCHD group 54 38 were higher than that in control group 43 13 P 0 01 TT was a risk gen otype for the development of CHD OR 2 51 The levels of TC and LDL C among patients with mutant al leles T were 6 10 0 87 mmol L and 4 01 mmol L respectively which were higher than those among C patients with mutant alleles C Conclusion There is significant correlation between IL 1 511 gene poly morphism and the development of CHD TT may be a genotype of higher risk for the development of CHD Key words IL 1 511 Gene Polymorphism Coronary heart disease 冠状动脉粥样硬化性心脏病 简称 冠心病 是 一种多因素导致的疾病 其发生 发展受环境因素和 遗传因素共同影响 研究显示 炎性反应贯穿于冠 心病发生 发展的整个过程 其中促炎性细胞因子白细胞 介 素 1 interleukin 1 IL 1 通过多种方式参与冠心病的 发病机制 IL 1 基因多态性 是冠心病的一项重要危险因 素 关 于 IL 1 启 动 子 区 的 511 基因多态性与冠心病 关系的研究较多 不同研究 结果间差异较多 1 3 本研 究探讨了 IL 1 511 基因多 态性与冠心病发生 发展的 关系 现将结果报道如下 1 对象和方法 1 1 研究对象 选择 2009 年 1 月至 2010 年 12 月来本 院心血管内科就诊的患者共 160 例作为研究对象 男 106 例 女 54 例 年龄 35 78 51 8 12 5 岁 其中急 性心肌梗死 56 例 不稳定性心绞痛 45 例 稳定劳累 性心绞痛 59 例 160 例研究对象中有高血压 冠心 5801 医学综 述 2012 年 4 月 第 18 卷第 7 期 Medical Recapitulate Apr 2012 Vol 18 No 7 病和糖尿病家族史者分别为 65 例 39 例和 27 例 选择同期来我院进行健康查体的 160 例研究对象作 为对照组 两组研究人群在性别 年龄等方面具有均 衡性 P 0 01 入院后抽取两组人群静脉血检测 空腹血糖 fasting blood glucose FBG 三酰甘油 tri glyceride TG 高 密 度 脂蛋 白 胆 固 醇 high density lipoprotein cholesterol HDL C 低密度脂蛋白胆固醇 low density lipoprotein cholesterol LDL C 和总胆固 醇 total cholesterol TC 并 测 量 收 缩 压 systolic blood pressure SBP 和 舒 张压 diastolic blood pres sure DBP 1 2 方法 1 2 1 标本采集 用无菌棉签采集双侧颊黏膜拭 子 在 室 温 下 自 然 干 燥 保 存 于 无 菌 密 闭 容 器 中 待检 1 2 2 主要试剂和设备 主要设备包括 高速台式 离心机 恒温水浴箱 聚合酶链反应 polymerase chain reaction PCR 扩增仪 水平电泳槽 电泳仪 凝胶成 像仪 主要试剂包括自制的无菌去离子纯净水 蛋白 酶 K 5 Chelex 100 dNTP Taq DNA 聚合酶 PCR 缓 冲液 一对引物 1 2 3 DNA 提取 剥取颊黏膜拭子表层 于 Chelex 100 150 mL 中浸泡 再加入 4 mL 蛋白酶 K 20 g L 混匀 置入 38 水浴锅中过夜 煮沸 10 min 接着 冰上冷却 3 min 14000 r min 离心 2 min 然后取上清 液 20 保存 1 2 4 基因型测定 采用聚合酶链反应 限制性内 切酶片段长度多态性法 PCR RFLP 所用引物为 E 5 TGGCATTGATCTGGT TCATC 3 F 5 GTTTAG GAATCT TCCCACTT 3 反 应 体 系 包 括 模 板 DNA 5 L 10 PCR 缓冲液 2 L Taq DNA 聚合酶 2U dNTP 0 4 L 10 mmol L MgCl2溶 液 1 5 L 25 mmol L 引物 E F 各 0 5 L 20 mol L 剩 余采用无菌去离子水补足总体积至 20 L 扩增程 序为 94 预变性反应 5 min 接着 94 40 s 61 35 s 72 55 s 共 30 个循环 然后 72 延长 5 min 最后 4 保存 PCR 扩增产 物共 304 bp 取 5 L PCR 扩增产物 10 酶切缓冲液和 3 L ava I 限制性 内切酶 剩 余 采 用 无 菌 去 离 子 水 补 足 总 体 积 至 10 L 混匀 置入 38 水浴锅中过夜 酶切产物经 2 琼脂糖凝胶电泳 凝胶电泳成像仪下直接读取基 因型结果 1 3 统计学方法 采用 SPSS 13 0 和 Excel 2003 进 行数 据 统 计 和 分 析 计 量 资 料 用 均 数 标 准 差 珋x s 表示 用基因计数法计算各组的基因型和等 位基因型 组间基因型或等位基因频率的比较采用 2 检验 用 Logistic 回归分析探讨基因多态性与冠心 病发病的关系 P 0 05 为差异有统计学意义 2 结 果 2 1 PCR 扩增结果及 IL 1 511 基因型分析 对扩增 产物进行琼脂糖凝胶电泳后 IL 1 511 等位基因 C 在 190 bp 和 114 bp 处分别出现一个条带 为 CC 基因型 等位基因 T在 304 bp 处出现一个条带 为 TT基因型 在 304 bp 和 190 bp 处分别出现一个条带为 CT杂合子 经 2 检验 IL 1 511 基因型分布符合 HarDY Weinberg 遗传平衡定律 说明患者来自同一群体 图 1 图 1 IL 1 511 位 点 PCR 及 酶切 产物电 泳结 果 2 2 冠心病组和对照组 IL 1 511 基因型及等位基 因型分析 冠心病组 TC TT 和 CC 基因型频率分别 为 61 25 23 75 和 15 00 其 T 等位基因频率 和 C 等位基因频率分别为 54 38 和 45 63 均高 于对照组 表 1 表 1 两组 人群 IL 1 511 基因 型及 等位基 因型 分析 分 组例数 基 因型 T CT TC C 等 位基因 频率 TC 冠心 病组16098 61 25 38 23 75 24 15 00 174 54 38 146 45 63 对照 组 16092 57 50 23 14 38 45 28 13 138 43 13 182 56 88 2 10 417 66 P 0 05 0 05 2 3 基因型与冠心病发生危险性的 Logistic 回归分 析 以是否发生冠心病作为 因变量 以 CC TT TC 基因型作为自变量 拟合二分类 Logistic 回归模型 结果显示 TT 基因型为冠心病发生的危险基因型 OR为 2 51 表 2 表 2 不同基 因型 与冠心 病发生 危险 性的 Logistic回 归分 析结果 基因型 Wald 2 POR95 CI CC1 00 TT1 5712 340 051 080 86 1 37 2 4 冠心病组各基因型间实验室检测结果比较 携带 T等位基因的冠心病患者 TC 和 LDL C 分别为 6 10 0 87 mmol L 和 4 01 0 94 mmol L 高于 6801 医学综 述 2012 年 4 月 第 18 卷第 7 期 Medical Recapitulate Apr 2012 Vol 18 No 7 携带 C 等 位 基因 患 者的 5 21 0 53 mmol L 和 2 84 0 69 mmol L 差异有统计学意义 P 0 05 0 05 0 050 05 0 05 0 05 3 讨 论 冠心病的发生 发展受环境因素和遗传因素共 同影响 环境因素在诱导疾病发生 发展的过程中受 到遗传基因的调控 易感基因决定着疾病的病理改 变和临床表现 并对疾病的发展起着抑制或促进作 用 因此 遗传因素参与致病可以通过参与调控疾 病的发生 发展和作为疾病易感基因两方面实现 4 IL 1 家族基因位于人类染色体 2q14 区 包括三 个基因位点 分布编码 IL 1 IL 1 和他们的内源性 受体拮抗剂 冠状 动脉粥 样硬 化是一 种炎 症性疾 病 炎症在粥样斑块的形成中起重要作用 IL 1 是 参与冠心病炎性反应的一个重要细胞因子 IL 基因 具有高度多态性 可以调控 IL 1 与 IL 1RA 的平衡 从而调控炎症的发生 发展 Kornman等 5 研究亦发 现 该基因多态性与动脉粥样硬化的斑块的形成有 关 Momiyama 等 6 研究表明 IL 1 511 基因多态性 与冠心病尤其是心肌梗死相关 本研究显示 IL 1 511 基因多态性是冠心病的 发病的危险因素 T基因型为其发病的易感基因 而 张源明等 7 研究结果认为 IL 1 511 并不是冠心病 的易感基因 不同研究结果间的差异可能与研究方 法 研究对象选择等不同有关 本研究还发现 携带 T等位基因的冠心病患者 TC 和 LDL C 水平高于携 带 C 等位基因患者 这与张源明等 7 研究结果相符 目前多数研究认为 IL 1 511 基因多态性与急性冠 脉综合征 经皮冠状动脉血管成形术后再狭窄等有 关 6 8 虽然有关 IL 1 511 基因多态性与冠心病发 病危险性间的关系尚无定论 但陈凡等 9 进行的一 项 meta 分析提示 IL 1 511 更可能是作为一个调控 因素参与影响冠心病的发展和不同临床表型 而不 是作为易感基因导致冠心病的发生 本研究仍有一些不足 比如样本量较小 研究类 型为病例对照研究 不能完全区分 IL 1 511 基因多 态性在冠心病发病不同环节中所起的作用等 有关 IL 1 511 基因多态性与冠心病发病关 系尚需通过 更多的大样本 前瞻性研究进行证实 参考文献 1 Arman A Soylu O Yildirim A et al Interleukin 1 receptor antago nist gene VNTR polymorphism is associated with coronary artery disease J Arq Bras Cardiol 2008 91 5 268 273 2 Miranda Malpica E Martinez Rios MA Fragoso JM et al The in terleukin 1B 511 polymorphism is associated with the risk of devel oping restenosis after coronary stenting in Mexican patients J Hum Immunol 2008 69 2 116 121 3 Geismar K Enevold C Sorensen LK et al Involvement of interleu kin 1 genotypes in the association of coronary heart disease with periodontitis J J Periodontol 2008 79 12 2322 2330 4 Duff GW Evidence for genetic variation as a factor in maintaining health J Am J Clin Nutr 2006 83 Suppl 431S 435S 5 Kornman KS Pankow J Offenbacher S et al Interleukin1 geno types and the association between periodontitis and cardiovascular disease J J Periodontal Res 1999 34 7 353 357 6 Momiyama Y Hirano R Taniguchi H et al Effects of interleukin 1 gene polymorphisms on the development of coronary artery disease associated