应化07工业分析专业实验教材.doc

实验一 水及啤酒色度的检验一、实验目的1. 掌握目视比色的一般方法及测定色度的国家标准；2. 掌握生活用水、污水及普通食品色度测定方法。.3. 掌握标准色阶的配制及分光光度计的使用。二、实验原理1 饮料用水色度的测定纯洁的水是无色透明的。但一般的天然水中存在有各种溶解物质或不溶于水的粘土类细小悬浮物，使水呈现各种颜色。如含腐殖质或高铁较多的水，常呈黄色；含低铁化合物较高的水呈淡绿蓝色；硫化氢被氧化所析出的硫，能使水呈浅蓝色。水的颜色深浅反映了水质的好坏。有色的水，往往是受污染的水，测定结果是以色度来表示的。色度是指被测水样与特别制备的一组有色标准溶液的颜色比较值。洁净的天然水的色度一般在1525之间，自来水的色度多在510左右。水的色度有“真色”与“表色”之分。“真色”是指用澄清或离心等法出去悬浮物后的色度；“表色”是指溶于水样中物质的颜色和悬浮物颜色的总称。在分析报告中必须注明测定的是水样的真色还是表色。测定水的色度有铂钴比色法和铬钴比色法。两种方法的精密度和准确度相同。前者为测定水的色度的标准方法，此法操作简便，色度稳定，标准比色系列保存适宜，可长时间使用，但其中所用的氯铂酸钾太贵，大量使用时不经济。后者是以重铬酸钾代替氯铂酸钾，便宜而且宜保存，只是标准比色系列保存时间较短。（1） 铂钴比色法 原理将水样与已知浓度的标准比色系列进行目视比色以确定水的色度。标准比色系列是用氯铂酸钾和氯化钴试剂配制而成，规定每升水中含1mg 铂 以（PtCl6）2-形式存在 时所具有的颜色作为一个色度单位，以1表示。（2） 铬钴比色法 原理重铬酸钾和硫酸钴配制成与天然水黄色色调相同的标准比色系列，用目视比色法测定，单位与铂钴比色法相同。2 啤酒色度的测定（1） 原理将除气后的啤酒注入 比色管中，与铬钴标准色阶比较，目视比色，得出啤酒的色度。测定浓色或黑色啤酒时，需要将啤酒稀释至合适的色度范围，然后将实验结果乘以稀释倍数。液态物质色度的测定也可以采用分光光度法。该方法保留了原标准以“铂钴标准溶液”Hasen 值为色度计量单位的基本原则。3 污水色度的测定 污水、工业废水一般颜色较深，需要将它稀释至合适的色度范围，再与铬钴标准色阶比较，目视比色，得出稀释后的色度，然后将实验结果乘以稀释倍数。三、试剂与仪器1 试剂稀盐酸溶液:取1mL盐酸(20=1.19g/mL),加纯水至1000mL。重铬酸钾(K2Cr2O7)：分析纯硫酸钴(CoSO47H20) ：分析纯硫酸(20=1.84g/mL) ：分析纯2 仪器、设备 50mL成套高型具塞比色管；感量1/10000g 分析天平；比色管架；5ml 吸管；722型分光光度计 。四、实验步骤1. 铬钴标准溶液配制：称取0.0437g重铬酸钾(K2Cr2O7)和1.00g干燥的硫酸钴(CoSO47H20),溶于少量纯水中,加入0.50mL硫酸(20=1.84g/mL),搅匀,用纯水定容至500mL。 2. 铬钴标准色阶配制：取比色管11支,分别加入铬钴标准溶液0,0.50,1.00,1.50,2.00,2.50, 3.00,3.50,4.00,4.50和5.00mL,加纯水至刻度,摇匀。各管的铬钴色度依次为0,5,10,15,20, 25,30,35,40,45和50度。 3. 水样色度测定：取50mL透明水样于比色管中。如水样浑浊应先进行离心,取上清液测定。如水样色度过高,可少取水样,加纯水稀释后比色,将结果乘以稀释倍数。 4. 啤酒色度测定方法:同上。 5. 采用分光光度法测定啤酒的色度：选择适宜的仪器条件，测定铬钴标准色阶及啤酒样品的吸光值，计算出啤酒样品的色度。五、数据处理 计算 C=(m/V)500 式中: C水样的色度,度；m铬钴标准溶液的用量,mL； V水样体积；六、注意事项（1）铂钴和铬钴比色法适用于测定生活饮用水及其水源水的色度测定。浑浊的水样需先离心，然后取上清液测定。（2）水样要用清洁的玻璃瓶采集，并尽快进行测定。避免水样在贮存过程中发生生物变化或物理变化而影响水样的颜色。（3）水样的颜色通常随pH 值的升高而增加，因此，在测定水样色度的同时测定水样的pH 值，并在分析报告中注明。（4）液态物质色度的测定也可以采用分光光度法。该方法保留了原标准以“铂钴标准溶液”Hasen 值为色度计量单位的基本原则，参照国际照明委员会关于色觉三激值的科学观念，对原色度测定方法做了新的定量化的改进。七、参考文献1 张水华主编，食品分析，中国轻工业出版社，2008：3942.2 饮用天然矿泉水检验方法A， GB/T 8538-1995实验二 水质浊度检验一、实验目的1. 掌握水质浊度测定的一般方法；2. 了解水质浊度测定的国家标准；3. 掌握光电散射浊度计的使用。二、实验原理1 分光光度法，适用于饮用水、天然水及高浊度水，最低检测浊度为3度饮料用水。在适当温度下，硫酸肼与六次甲基四胺聚合，形成白色高分子聚合物，以此作为浊度标准液，在一定条件下与水样浊度相比较。2 目视比浊法，适用于饮用水和水源水等低浊度的水，最低检测浊度为1度。将水样与用硅藻土配制的浊度标准液进行比较，规定相当于1mg一定粒度的硅藻土在1000mL水中所产生的浊度为1度。三、试剂与仪器1 试剂除非另有说明，分析时均使用符合国家标准或专业标准分析纯试剂，去离子水或同等纯度的水。 （1）浊度标准液 浊度标准贮备液：称取10g通过0.1mm筛孔的硅藻土于研钵中，加入少许水调成糊状并研细，移至1000mL量简中，加水至标线。充分搅匀后，静置24h。用虹吸法仔细将上层800mL悬浮液移至第二个1000mL量简中，向其中加水至1000mL，充分搅拌，静置24h。吸出上层含较细颗粒的800mL悬浮液弃去，下部溶液加水稀释至1000mL。充分搅拌后，贮于具塞玻璃瓶中，其中含硅藻土颗粒直径大约为400m。 取50.0mL上述悬浊液置于恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干，于105烘箱中烘2h。置干燥器冷却30min，称重。重复以上操作，即烘1h，冷却，称重，直至恒重。求出1mL悬浊液含硅藻土的重量(mg)。 浊度250度的标准液：吸取含250mg硅藻土的悬浊液，置于1000mL容量瓶中，加水至标线，摇匀。此溶液浊度为250度。 浊度100度的标准液：吸取100mL浊度为250度的标准液(9.1.2)于250mL容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。此溶液浊度为100度。 于各标准液中分别加入氯化汞以防菌类生长。 注：氯化汞剧毒! 2仪器 一般实验室仪器和50mL具塞比色管。 比色管架；5ml 吸管； 光电散射浊度计四、实验步骤1浊度低于10度的水样：吸取浊度为100度的标准液(9.1.3)0，0.5，1.0；1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5及5.0mL于50mL比色管中，加水稀释至标线，混匀，配制成浊度为0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0，9.0和10.0度的标准液。 取50mL摇匀水样于50mL比色管中，与上述标液进行比较。可在黑色底板上由上向下垂直观察，选出与水样产生相近视觉效果的标液，记下其浊度值。 2浊度为10度以上的水样：吸取浊度为250度的标准液0，10，20，30，40，50，60，70，80，90及100mL置于250mL.容量瓶中，加水稀释至标线，混匀。即得浊度为0，10，20，30，40，50，60，70，80，90和100度的标准液，将其移入成套的250mL具塞玻璃瓶中，每瓶加入1g氯化汞，以防菌类生长。 取250mL摇匀水样置于成套的250mL具塞玻璃瓶中，瓶后放一有黑线的白纸板作为判别标志。从瓶前向后观察，根据目标的清晰程度选出与水样产生相近视觉效果的标准液，记下其浊度值。 水样浊度超过100度时，用纯水稀释后测定。 3、使用光电散射浊度仪测定标准溶液及待测溶液的吸光值，在京行结果计算。五、数据处理 水样浊度可直接读数。六、注意事项水中应无碎屑和易沉颗粒，如所用器皿不清洁，或水中有溶解的气泡和有色物质时干扰测定。七、参考文献 水质浊度的测定，GB1320091实验十六 蛋白质含量的测定 衡量食品的营养成分时，要测定蛋白质含量，但由于蛋白质组成及其性质的复杂性，在食品分析中，通常用食品的总氮量表示，蛋白质是食品含氮物质的主要形式，每一蛋白质都有其恒定的含氮量，用实验方法求得某样品中的含氮量后，通过一定的换算系数。即可计算该样品的蛋白质含量。 一般食品蛋白质含氮量为l0如肉、蛋、豌豆、玉米等，其换算系数为6.25，小麦取5.70，大米5.95、乳制品6.38、大豆5.17，动物胶5.55。 一、目的与要求： 掌握微量凯氏法测定蛋白质总氮量的原理及操作技术。包括样品的消化，蒸馏吸收及滴定与含氮量的计算。 二、原理： 凯氏定氮法：食品经加硫酸消化使蛋白质分解，其中氮素与硫酸化合成硫酸铵。然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸液吸收后，再用盐酸或硫酸滴定根据盐酸消耗量，再乘以一定的数值即为蛋白含量，其化学反应式如下。 ( 1 ) 2NH2(CH2)2COOH+13H2S04 (NH4)2S04+6C02+12S02+ 16H2 (2)(NH4)2SO4+2NAOH-2NH2+2H2O+NA2SO4 (3)2NH3+4H3BO3-(NH4)2B4O7+5H2O(4) (NH4)2B407+H2S04+5H20-(NH4)9SO4+4H2BO2三、试剂与仪器：1、硫酸钾2、硫酸铜 3、硫酸4、2硼酸溶液5、40氢氧化钠溶液6、混合指示剂：把溶解于95乙醇的0.l溴甲酚绿溶液10毫升和溶于95乙醇的0.l甲基红溶液2毫升混合而成 7、0.OINHCL标准溶液或001N硫酸标准溶液8、凯氏微量定氮仪一套（本实验采用KDN-08A定氮仪）。9、定氮瓶100m1或50ml一只。10、三角瓶150ml 3只。11、量筒50ml、l0ml、l00ml。12、吸量管10ml只。13、酸式滴定管1支。14、容量瓶100毫升1只。15、小漏斗1只。四、操作方法：1、 样品处理：精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品（约相当氮30-40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸铜，3g硫酸钾及20毫升硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5小时。取下放冷，小心加20ml水，放冷后，移入100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸铵同一方法做试剂空白试验。2、 按图装好定氮装置，于水蒸气发生器内装水约2/3处加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。3、 想接收瓶内加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示剂1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml样品消化液由小玻璃杯流入反应室，并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将10ml 40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其缓慢流入反应室，立即将玻璃盖塞紧，并加水于小玻璃杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏，蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏5min。移动接收瓶，使冷凝管下端离开液皿，再蒸馏1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.01N硫酸或0.01N盐酸标准溶液定至灰色或蓝紫色为终点。同时吸取10.0ml试剂空白消化液按3操作。 （V1-V2）*N*0.014X =- +F*100 m*（10/100） 计算： X：样品中蛋白质的含量，g；V1：样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml；V2：试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积，ml；N：硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度；0.014：1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数；m：样品的质量（体积），g（ml）；F：氮换算为蛋白质的系数。注：（1）样品应是均匀的，固体样品应预先研细混匀，液体样品应振摇或搅拌均匀。（2）样品放入定氮瓶内时，不要沾附颈上，万一沾附可用少量水冲下，以免被检样消化不完全，结果偏低。（3）消化时如不容易呈透明溶液，可将定氮瓶放冷后，慢慢加入30%过氧化氢2-3ml，促使氧化。（4）在整个消化过程中，不要用强火，保持和缓的沸腾，使火力集中在凯氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下。使氮有损失。（5）如硫酸缺少，过多的硫酸钾会引起氨的损失，这样会形成硫酸氢钾，而不与氨作用，因此当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时，要增加硫酸的量。（6）加入硫酸钾的作用为增加溶液的沸点，硫酸铜为催化剂，硫酸铜在蒸馏时作碱性反应的指示剂。（7）混合指示剂在碱性溶液中呈绿色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈红色。如果没有溴甲酚绿，可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液。（8）氨是否完全蒸馏出来，可用PH试纸试馏出液是否为碱性。（9）吸收叶也可以用0.01当量的酸代表硼酸，过剩的酸液用0.01N碱液滴定，计算时，A为试剂空白消耗碱液数，B为样品消耗碱液数，N为碱液浓度，其余均相同。（10）以硼酸为氨的吸收液，可省去标定碱液的操作，且硼酸的体积要求并不严格，亦可免去用移液管，操作比较简便。（11）向蒸馏瓶中加入浓碱时，往往出现褐色沉淀物，这是由于分解促进碱与加入的硫酸铜反应，生成氢氧化铜，经加热后又分解生成氧化铜的沉淀。有时铜离子与氨作用，生成深兰色的结合物Cu(NH3)4+实验十七 小香槟(汽酒)中总糖的测定一、目的与要求：1、掌握汽酒中总糖的测定方法二、原理： 样品经除去CO2后，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液，以次甲基蓝作指示剂根据样品液消耗体积，计算小香槟中总糖的量。 三、试剂1、碱性酒石酸铜甲液：称取15克硫酸铜(CuSO4.5H20)及0.05克次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000毫升。 2、碱性酒石酸铜乙液：称取50克酒石酸钾钠及75克氢氧化钠，溶于水中，再加入4克亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000毫升，贮于橡胶塞玻璃瓶内。 3、盐酸 4、葡萄糖标准溶液：精密称取1.000克经过98-100干燥至恒重的纯葡萄糖，加水溶解后，加5毫升盐酸，并以水稀释至1000毫升，此溶液每毫升相当于lmg葡萄糖。 5、6N盐酸：量取50毫升盐酗口水稀释至100毫升。 6、甲基红指示液：0.1乙醇溶液。 7、20氢氧化钠溶液。 四、操作方法： 1、样品处理：吸取样品10毫升，加水40毫升，在水浴上加热煮沸10分钟后，移入250毫升容量瓶中加水至刻度，混匀后备用。 取以上样液50毫升于l00毫升容量瓶中，加人5毫升6N盐酸，在68-70水浴中加热15分钟，冷却后，加2滴甲基红指示液，用20氢氧化钠溶液中和至红色褪去，加水至刻度混匀。 2、标定碱性酒石酸铜溶液；吸取碱性酒石酸铜甲、乙液各5.0毫升，置于150毫升锥形瓶中，加水20毫升，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9毫升葡萄糖标准溶液，控制在2分钟内加热至沸,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液兰色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积，同时平行操作三份，取其平均值，计算每：9毫升(甲乙液各5毫升)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg) 3、样品溶液预测：吸取碱性酒石酸铜甲、乙液各5.0毫升，置于160毫升锥形瓶中，加水20毫升，玻璃珠两粒，控制在2分钟内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，等溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液兰色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。 4、样品溶液测定：吸取碱性酒石酸铜甲、乙液各5.0毫升于150毫升锥形瓶中，加水20毫升，玻璃珠两粒，从滴定管滴加比预测体积少1毫升的样品溶液，使在2分钟内加热至沸，趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定直至溶液兰色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积，同法平行测定三份，得出平均值消耗体积。 m0.95计算：X=-100 V1V2 - 250X:样品中总糖含量(以蔗糖计)，；M:10毫升碱性酒石酸铜溶液(甲、乙液各5.0毫升相当于葡萄糖的质量，mg);V1:样品处理时吸取样品体积，毫升；V2:测定时平均消耗样品溶液体积，毫升；0.95:葡萄糖换算为蔗糖的系数。实验十八 肉制品中亚硝酸盐的测定 一、目的与要求： 1、明确亚硝酸盐的测定与控制成品质量的关系。 2、明确与掌握盐酸萘乙二胺法的基本原理与操作方法。 二、原理： 样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，生成的重氮化合物，再与萘基盐酸二氨乙烯偶联成紫红色的重氮染料，产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比，可以比色测定。反应式如下：三、试剂与仪器1、亚铁氰化钾溶液：称取106克亚铁氰化钾K4Fe9(CN)5.3H2O，溶于水后，稀释至1000毫升。 2、乙酸锌溶液：称取220克乙酸锌Zn(CH2C00)22H20，加30毫升冰乙酸溶于水，并稀释至1000毫升。 3、饱和硼砂溶液：称取5克硼酸钠(Na2B0710H20)，溶于100毫升热水中，冷却后备用。 4、0.4对氨基苯磺酸溶液：称取0.4克对氨基苯磺酸，溶于100毫升20的盐酸中，避光保存。 5、0.2盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2克盐酸萘乙二胺，溶于100毫升水中，避光保存。 6、亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠，加水溶解移入500毫升容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于200微克亚硝酸钠。 7、亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00毫升，置于200毫升容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。 8，小型绞肉机。 9、分光光度计。 四、操作方法： 1、样品处理：称取5.0克经绞碎混匀的样品，置于50毫升烧杯中，加工2.5毫升饱和溶液，搅拌均匀，以70左右的水约30毫升将样品全部洗入500毫升容量瓶中，置沸水浴中加热15分钟，取出后冷至室温，然后一面转动一面加入5毫升亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5毫升乙酸锌溶液以沉淀蛋白质，加水至刻度，混匀，放置0.5小时，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤弃去初滤液30毫升，滤液备用。 2、测定 吸取40毫升上述滤液于50毫升比色管中，另吸取0.00、0.20、040、060、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50毫升亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1、2、3、5、7、10、12.5微克亚硝酸钠)，分别置于50毫升比色管中，于标准与样品管中分别加入2毫升0.4对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3-5分钟后各加入1毫升0.2盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15分钟，用2厘米比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。 A1000计算： X=- 40 m - 1000 1000 500X：样品中亚硝酸盐的含量，gkg；m：样品质量，g；A：测定用样液中亚硝酸盐的含量，ug实验十九 酱油中山梨酸、苯甲酸的测定 一、目的与要求： 1、掌握酱油、水果汁、果酱中山梨酸、苯甲酸的测定原理及方法。 二、原理： 样品酸化后，用乙醚提取山梨酸，苯甲酸。将样品提取液浓缩，点于浆酰胺薄层板上，展开,显色后，根据薄层板上山梨酸，苯甲酸的比移值与标准比较定性，并可进行概略定量。 三、试剂与仪器：1、异丙醇2、正丁醇3、石油醚沸程：30-60。4、乙醚：不含过氧化物5、氨水6、6N盐酸：取100毫升盐酸7、无水乙醇。8、聚酰胺粉：200目。 9、山梨酸标准溶液：精密称取0.2000克山梨酸，用少量乙醇溶解后移入100毫升容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于200毫克山梨酸。 10、苯甲酸标准溶液：精密称取0.2000克苯甲酸，用少量乙醇溶解后移入100毫升容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于2毫克苯甲酸。 11、展开剂 (1)正丁醇-氨K-无水乙醇(7：1：2) (2)异丙醇-氨水-无水乙醇(7：1：2) 12、显色剂：O.04溴甲酚紫的50乙醇溶液，用0.1N氢氧化钠溶液调至PH=8。13、4氯化钠酸性溶液：于4的氯化钠溶液中加少量6N盐酸酸化。14、吹风机。15、层析缸。16、玻璃板：10 X 18cm17、微量注射器：10微升，100微升。18、喷雾器。四、操作方法1、样品提取 称取2.5克事先混合均匀的样品，置于25毫升带塞量筒中，加0.5毫升6N盐酸酸化，用15、10毫升乙醚提取两次，每次振摇1分钟，将上层醚提取液吸人另一个25毫升带塞量筒中，合并乙醚提取液。用3毫升4氯化钠酸性溶液洗涤两次，静止15分钟，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤人25毫升容量瓶中。加乙醚至刻度混匀，吸取l0.0毫升乙醚提取液分两次置于10毫升带塞离心管中，在约40 (2的水浴上挥发干，加入0.10毫升乙醇溶解残渣，备用。 2、测定 (1)聚酰胺粉板的制备：称取1.6克聚酰胺粉，加0.4克可溶性淀粉加约重5毫升，研磨3-5分钟，立即倒入涂布器内制成10 X 8cm、厚度0.3mm的薄层板两块，于室温干燥后保存，于80干燥1小时，取出，置于干燥器中保存。 (2)点样：在薄层板下端2cm的基线上，用微量注射器点1微升，2微升样品液，同时各点1微升、2微升山梨酸、苯甲酸标准溶液。 (3)展开与显色：将点样后的薄层板放人预先盛有展开剂(1)或(2)的展开槽内，展开槽周围贴有滤纸，待溶剂前沿上展至lOcm，取出挥干，喷显色剂、斑点成黄色，背景为蓝色。样品中所含有山梨酸、苯甲酸的量与标准斑点比较定量(山梨酸、苯甲酸的比移值依次为0.82，0.73)。 A1000计算： X=- 10 V2 m- - 1000 25 V1X：样品中山梨酸(苯甲酸)的含量，gkg；A：测定用样品液中山梨酸(苯甲酸)的含量，mg；M：样品质量，g；Vl：加入乙醇的体积，ml，V2：测定时点样的体积，ml； 10：测定时吸取乙醚提取液的体积，ml；25：样品乙醚提取液总体积，m1。注：此方法还可以同时测定果酱、果汁中的糖精。药物分析实验吉林化工学院化学与制药工程学院药学与制药工程实验中心2009年8月23实 验 须 知实验是药物分析课程教学的重要组成部分。按教学大纲规定，实验课教学应做到：一 认真验证实验教材指定的药物分析理论，加深对本学科专业知识的理解。二 正确掌握实验教材中各类代表性药物的分析方法，熟练各种分析方法的操作技术，培养独立开展药物分析工作的能力。三 全面了解药物分析工作的性质和内容，培养严肃认真、实事求是的科学态度和工作作风。为提高实验课教学质量，参加实验课学习者应努力做到：1 做好实验预习，明确每次实验的目的要求，弄懂原理和操作要点，预先安排好实验进程，估计实验中可能发生的问题及处理办法。每次实验课均应有准备地接受教师的提问。2 严格按实验规程操作，虚心接受教师的指导，认真掌握操作技术，细心观察实验现象。进行讲义指定内容以外的实验或重做实验需经教师批准。3 进入实验室要随带药物分析实验原始记录及报告。实验进程中应尊重实验事实，及时做好完整而确切的原始记录。要用钢笔或圆珠笔书写，字体端正。应直接记于药物分析实验原始记录及报告上，绝不允许记于纸条，手上或其他本子上，也不允许暂记在脑子里等下一个数据一起记录。原始记录是实验报告的一部分，尊重原始记录是必要的科学作风。记录本不准撕页，如记录有误，只能将写错处用双线划去（但要求仍能看清原来写错的数值），在其旁写上正确数据，千万不得涂改，涂改的原始记录无效。4 防止试剂、药品污染，取用时应仔细观察标签和取用工具上的标志，杜绝错盖瓶盖或不随手加盖的现象发生。当不慎发生试剂污染时，应及时报告教师。公用试剂、药品应在指定位置取用。此外，取出的试剂，药品不能再倒回原瓶。5 爱护仪器，小心使用，破损仪器应及时登记破损、补发。动用精密仪器，需经教师同意，用毕登记签名。6 实验时确保安全，时刻注意防火、防爆。发现事故苗头及时报告，不懂时不要擅自动手处理。7 清洁液一般只限于洗涤滴定管、吸量管、容量瓶等。使用时，应先用水冲洗仪器，沥至无滴水后，用清洁液浸洗；其他玻璃仪器一般用肥皂或去污粉刷洗。注意节约蒸馏水，清洗玻璃仪器应遵守少量多次的原则。8 爱护公物、节约水电、药品和试剂。可回收利用的废溶剂回收至指定的容器中，不可任意弃去。腐蚀性残液应倒入废液缸中，切勿倒进水槽。9 实验完毕应认真清理实验台，仪器洗净后放回原处，擦净台面，晾好抹布、毛刷、放齐凳子、锁好柜子，经教师同意后，方可离开。值日生还应负责整理公用试剂台，打扫地面卫生、清除垃圾及废液缸中污物，并检查水、电、门窗等安全事宜。10 认真总结实验结果，按指定格式填写实验报告，并按规定时间交出。实验一 葡萄糖杂质检查1 目的要求：掌握一般杂质检查的目的和原理，熟悉杂质检查的操作方法；2 操作步骤：2.1 酸度取本品2.0g，加水20ml溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）0.20ml，应显粉红色。2.2 溶液澄清度与颜色取本品5g，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10ml，溶液应澄清无色，如显浑浊，与1号浊度标准液（chp95，附录B）比较，不得更浓；如显色，与对照液（比色用氯化钴液3ml，比色用重铬酸钾液3ml与比色用硫酸铜液6ml，加水稀释成50ml）取1.0ml加水稀释至10ml比较，不得更深。2.3 氯化物取本品0.60g，加水溶解使成25ml（如显碱性可滴加硝酸使遇石蕊试纸显中性反应），再加稀硝酸10ml，溶液如不澄清，虑过。置50ml纳氏比色管中，加水适量使成约40ml，加硝酸银溶液1ml，用水稀释成50ml，摇匀，在暗处放置5分钟，如发生浑浊，与标准氯化钠溶液一定量制成得对照液【取标准氯化钠溶液（10gCl/ml）6.0ml置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，用水稀释使成约40ml后，加硝酸银试液1ml，再加水适量使成50ml，摇匀，在暗处放置5分钟】比较，不得更浓（0.010）2.4 硫酸盐取本品2.0g，加水溶解使成40ml（如显碱性，可滴加盐酸使遇石蕊试纸显中性反应）。溶液如不澄清，虑过，置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2ml，加25氯化钡溶液5ml，加水稀释使成50ml，摇匀，放置10分钟，如发生浑浊，与对照标准液【取标准硫酸（100gSO42+/ml）溶液2.0ml，置50ml纳氏比色管中，加水稀释使成40ml，加稀盐酸2ml，加25氯化钡溶液5ml，加水稀释使成50ml，摇匀，放置10分钟】比较，不得更浓（0.01）。2.5乙醇溶液的澄清度取本品1.0g，加90乙醇30ml，置水浴上加热回流约10分钟，溶液应澄清（1）。2.6 亚硫酸盐与可溶性淀粉取本品1.0g，加水10ml溶解后，加碘试液1滴，应即显黄色（2）。2.7 干燥失重取本品，在105干燥至衡重，减失重不得超过9.5。2.8炽灼残渣取本品12g置已炽灼至衡重的瓷坩锅重，精密称定，加硫酸0.51ml润湿，低温加热至硫酸蒸汽除尽，在700800炽灼使完全灰化。移至干燥器内，放冷，精密称定后，再在700800炽灼至衡重，所得炽灼残渣不得超过0.1。2.9 铁盐取本品2.0g，加水20ml溶解后，加硝酸3滴，缓缓煮沸5分钟，放冷，加水稀释使成45ml，加硫氰酸铵溶液（30 100）3ml，摇匀，如显色，与标准铁溶液2.0ml用同一方法制成得对照溶液比较，不得更深（0.001）。2.10 重金属取25ml比色管两支，一管加标准铅溶液（10gPb2+/ml）2.0ml，醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml，加水至25ml；另一管取本品4.0g，加水23ml溶解，加醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml（3），各管分别加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，供试液显出的颜色与标准铅溶液比较，不得更深，含重金属不得超过百万分之五（5ppm）。2.11 砷盐取本品2.0g，置检砷瓶中，加水5ml溶解后，加稀硫酸5ml与溴化钾试液0.5ml，置水浴上加热约20分钟，使保持稍过量的溴存在，必要时，再补加溴化钾试液适量，并随时补充蒸发的水分，放冷，加盐酸5ml与水适量使成28ml，加碘化钾试液5ml及酸性氯化亚锡试液5滴（4），在室温放置10分钟后，加锌粒（5）2g，迅速将瓶塞塞紧（瓶塞上已安放好装有醋酸铅棉及溴化汞试纸的检砷管），保持反应温度在2540（视反应快慢而定，但不应超过40）。45分钟后，取出溴化汞试纸，将生成的砷斑与标准砷溶液（1gAs/ml）一定量制成的标准砷斑比较，颜色不得更深（0.0001）。标准砷斑的制备：精密吸取标准砷溶液（1g/ml）2ml置另一检砷瓶中，按供试品依法炒作即可。2.12 蛋白质取本品1.0g，加水10ml溶解后，加磺基水杨酸溶液（1 5）3ml，不得发生沉淀。3 注解（1） 葡萄糖溶解，而淀粉和糊精等不溶。（2） 存在可溶性淀粉时呈蓝色，存在亚硫酸盐时碘液退色。（3） 在PH33.5时，PbS沉淀较完全。（4） 氯化亚锡与锌作用，在锌粒表明形成锌锡齐，起去极化作用，从而使氢气均匀而连续发生。（5） 如使用的锌粒较大时，用量得酌量增加。4 思考题4.1 葡萄糖杂质检查药典规定测十二项，是根据什么原则制定的？目的何在？4.2 重金属与砷盐的检查原理是什么？如何计算其限量？5 参考文献中国药典 95年版，845页。实验三 维生素AD胶丸中维生素A的含量测定本品系取合成维生素A和D，加精炼食用植物油（在0左右脱去固体脂肪）溶解和调整浓度后制成。每丸含维生素A应为标示量的90.0120.0。1 目的要求1.1 掌握紫外分光光度法测定VA含量的基本原理及校正公式的应用。1.2 学习和掌握胶丸制剂分析的基本操作。2 测定原理利用VA醋酸酯在环己烷中最大吸收波长为328nm，而其所含杂质的不相关吸收在316340nm之间为一条直线，因此采用三点校正法测其含量可消除杂质干扰。3 操作步骤3.1 胶丸内容物平均重量的测定取胶丸20粒，精密称定，用注射器将内容物抽出，再用刀片切开丸壳，用乙醚逐个洗涤丸壳三次，置50ml烧杯中，再用乙醚浸洗12次，置通风处，使乙醚挥散，精密称定，算出每丸内容物的平均重量。3.2 供试品溶液的制备与测定取维生素AD内容物，精密称定，加环己烷制成每1ml中含915个单位的溶液。按照分光光度法，测定其吸收峰的波长，并在下列各波长处测定吸收度。计算各吸收度与波长328nm处吸收度的比值和波长328nm处的E11cm值。波长（nm） 吸收度比值300 0.555316 0.907328 1.000340 0.811360 0.299如果吸收峰波长在326329nm之间，且所得各波长吸收度比值不超过表中规定的0.02，可用下式计算含量：每1g供试品中含维生素A的单位数E11cm（328nm）1900如果吸收峰波长在326329nm之间，但所测定的各波长吸收度比值超过表中规定的0.02，则按下式求出校正后的吸收度，然后再计算含量：A328（校正）3.52（2A328A316A340）如果校正吸收度与未校正吸收度相差不超过3.0，则不用校正吸收度，仍以未校正的吸收度计算含量。如果校正吸收度与未校正吸收度相差在15至3之间，则以校正吸收度计算含量。如果校正吸收度超过未校正吸收度的15或3，或者吸收峰波长不在326329nm之间，则供试品须按皂化提取法进行。请参照中国药典95年版，附录J第二法。4 注意事项4.1 维生素A遇光易氧化变质，故操作应在半暗室中快速进行，测定中所用的乙醚，必须不含过氧化物。4.2 选