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哈尔滨医科大学基础医学学院第十章 DNA的生物合成本章主要内容:1、中心法则:分子生物学的基本法则,是1958年由克里克(Crick)提出的遗传信息传递的规律,包括由DNA到DNA的复制、由DNA到RNA的转录和由RNA到蛋白质的翻译等过程。20世纪70年代逆转录酶的发现,表明还有由RNA逆转录形成DNA的机制,是对中心法则的补充和丰富。2、半保留复制:DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱基配对规律,合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。3、半不连续复制:领头链连续复制而随从链不连续复制,就是复制的半不连续性。 4、DNA聚合酶(重点):依赖DNA的DNA聚合酶,简写为 DNA-pol;、53 的聚合活性;、核酸外切酶活性。分类作用原核DNA-pol 对复制中的错误进行校读,对复制和修复中出现的空隙进行填补。DNA-pol 参与DNA损伤的应急状态修复。DNA-pol 是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶。真核DNA-pol a起始引发,有引物酶活性。DNA-pol g在线粒体DNA复制中起催化作用。DNA-pol d延长子链的主要酶,有解螺旋酶活性。DNA-pol e在复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用。5、拓扑异构酶(难点):既能水解 、又能连接磷酸二酯键。、拓扑异构酶:切断DNA双链中一股链,使DNA解链旋转不致打结;适当时候封闭切口,DNA变为松弛状态。反应不需ATP。、拓扑异构酶:切断DNA分子两股链,断端通过切口旋转使超螺旋松弛。利用ATP供能,连接断端, DNA分子进入负超螺旋状态。6、单链DNA结合蛋白(SSB):在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整。7、DNA连接酶:连接DNA链3-OH末端和相邻DNA链5-P末端,使二者生成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA链连接成一条完整的链。8、原核生物复制的过程:、复制起始:DNA解链,形成引发体;、复制的延长过程:领头链连续复制,随从链不连续复制;、复制的终止:切除引物、填补空缺、连接切口;过程 酶和蛋白 作用 复制的条件起始解链酶 解开DNA双链模板 拓扑异构酶 松驰超螺旋 SSB(DBP) 防止复性;防止被水解。引物酶 合成RNA引物 RNA引物 延长DNA-pol DNA链的延伸、校读 底物dNTP 终止DNA-pol 切除引物,填补空隙,校读 DNA连接酶 连接DNA片段 能源ATP 酶和蛋白 9、真核生物复制的特点:、真核生物每个染色体有多个起始点,是多复制子复制。复制有时序性,即复制子以分组方式激活而不是同步起动。、真核生物复制的延长发生DNA聚合酶/转换;10、真核生物与原核生物DNA复制的差异:、真核生物复制子多、冈崎片段短、复制叉前进速度慢等;、DNA复制从引发进入延伸阶段发生DNA聚合酶a/d转换;、切除冈崎片段RNA引物的是核酸酶RNAse H和FEN1等。 11、端粒:指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。(1)、端粒的结构特点:、由末端单链DNA序列和蛋白质构成。、末端DNA序列是多次重复的富含G、C碱基的短序列。(2)、端粒的功能:、维持染色体的稳定性;、维持DNA复制的完整性;12、端粒酶:端粒酶RNA (human telomerase RNA, hTR);端粒酶协同蛋白(human telomerase associated protein 1, hTP1);端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase, hTRT)一、选择题: D1.下列哪一方法技术用于证明了DNA半保留复制A.分光光度法 B.层析法 C.电镜技术 D.同位素与密度梯度离心 E.电泳技术C2.下列哪一关于DNA复制的说法不恰当A.半保留复制 B.半不连续复制 C.以一条链为模板的双向复制 D.保真性的复制 E.具校对功能的复制C3.在本书中使用N15 标记的NH4Cl是研究下列哪一内容A.转录 B.DNA损伤和修复 C.DNA复制方式 D.蛋白质生物合成 E.基因表达与调控 B4.关于DNA的复制规律,说法错误的是 A.半保留复制 B.全保留复制 C.半不连续复制 D.双向复制 E.高保真复制B5.原核生物的双向复制是指子A.在DNA聚合酶的两端同时复制 B.在一个起始点形成两个方向相反的复制叉 C.只有两个引物同时在复制 D.是滚环复制特有的规律 E.复制时,一条链从5至3方向,另一条链是3至5方向D6.若将1个完全被放射性标记的DNA分子在无放射性标记环境中复制三代,则无放射性标记的子代DNA分子数是A.1个 B.2个 C. 4个 D.6个 E.8个C7.冈崎片段是指A. DNA聚合酶合成的DNA片段 B.前导链上合成的DNA片段 C.随从链上合成的DNA片段 D.DNA连接酶合成的DNA片段 E.引物酶合成的RNA片断B8.冈崎片段产生的原因是A.复制速度太快 B.复制与解链方向不同 C.因有RNA引物 D.双向复制 E.DNA有缠绕、打结现象B9.连续进行复制,顺着解链方向生成的子链是A.随从链 B.领头链 C.编码连 D.冈崎片段 E.模板链D10.DNA复制时,不需要 A.DNA连接酶 B.解旋酶 C.拓扑异构酶 D.限制性内切酶 E.引物酶 E11.指出下列不能生成磷酸二酯键的酶A.原核生物DnaG蛋白 B.端粒酶 C.拓扑异构酶 D.DNA连接酶 E.解链酶A12.DNA聚合酶催化DNA合成的底物是 A.dNTP B.NTP C. NDP D.NMP E.dNMPC13.合成真核生物线粒体DNA的DNA-Pol是 A.DNA-Pol B.DNA-Pol C.DNA-Pol D.DNA-Pol E.DNA-PolC14.指出关于Klenow片断的不确正说法A.是不完整的原核生物DNA-Pol B.它是截短并留下N端的原核生物DNA-Pol C.它是截短并留下C端的原核生物DNA-Pol D.它目前已是商品 E.它仍保留DNA-Pol的活性A15.DNA聚合酶I在复制过程中的功能是A.校读和填补空隙 B.催化子链的延长 C.合成冈崎片 D.连接单链 E.有引物酶的活性B16.下列哪项描述为RNA聚合酶和DNA聚合酶所共有的性质A.3-5核酸外切酶活性 B.5-3聚合酶活性 C.5-3 核酸外切酶活性 D.需要RNA引物和3-OH末端 E.都参与半保留合成方式C17.与原核生物DNA复制无关的酶是A.解链酶 B.拓扑异构酶 C.端粒酶 D.DNA连接酶 E.DNA指导的DNA聚合酶B18.下列具有引物酶活性的是A.DNA-pol B.DNA-pol C.DNA-pol D.DNA-pol E.DNA-pol B19.DNA聚合酶在复制过程中的功能是 A.校读和填补空隙 B.催化子链的延长 C.合成冈崎片段 D.连接单链 E.有引物酶的活性C20.关于DNA复制中DNA聚合酶的说法错误的是 A.底物是dNTP B.必须有DNA模板 C.合成方向只能是5- 3 D.需要ATP和镁离子参与 E.使DNA双链解开 A21.在DNA复制过程中,单链DNA结合蛋白发挥下列哪种作用A.使模板DNA处于单链状态 B.连接两段相邻的DNA单链 C.使DNA处于超螺旋状态 D.使DNA双螺旋处于松弛结构 E.切断DNA双螺旋结构E22.DNA合成中拓扑异构酶的功能是A.解开DNA双链成为单链 B.稳定DNA的单链结构 C.促进引发体的生成D.使冈崎片段连成长链DNA E.解开DNA超螺旋成松弛的双螺旋结构 B23.下列不属于原核生物复制引发体组成的是 A.Dna A蛋白 B.Dna B蛋白 C.Dna C蛋白 D.引物酶 E.DNA的起始复制区域B24.识别大肠杆菌DNA复制起始区的蛋白质是A .DnaA蛋白 B.DnaB蛋白 C.DnaC蛋白 D.DnaE蛋白 E.DnaG蛋白C25.辨认DNA新链合成起始点主要依靠的酶是A.DNA聚合酶 B.DNA连接酶 C.引物酶 D.拓扑异构酶 E.解链酶B26.大肠杆菌复制需要DNA聚合酶III 解链酶 DNA聚合酶I引物酶DNA连接酶 拓扑异构酶,催化顺序是A. B. C. D. E. B27.在DNA复制过程中,DNA连接酶发挥下列哪种作用 A.使DNA解链 B.连接两段相邻的DNA单链 C.去除引物的作用 D.使DNA双螺旋处于松弛结构 E.切断DNA双螺旋 C28.关于DNA复制中连接酶的叙述错误的是 A.催化相邻的DNA片段以5,3-磷酸二酯键相连 B.连接反应需要ATP或 NAD+参与C.催化相邻的DNA片段以3,5 - 磷酸二酯键相连 D.参与随从链的生成E.催化反应中首先与ATP生成中间体B29.DNA 复制过程中,序5-TAGA-3将合成下列那种序列?A.5-ATCT-3 B.5-TCTA-3 C.5-UCUA-3 D.5-GCGA-3 E.5-TCTU-3D30.下列哪一作用与DNA聚合酶的校读功能相关A.5-3核酸外切酶的活性 B.3-5核酸外切酶的活性 C.沿核酸链进行性聚合的活性 D.生成磷酸二酯键的作用 E.切除RNA引物的作用D31.哺乳类动物DNA复制叙述错误的是 A.RNA引物较小 B.冈崎片段较小 C.DNA聚合酶和参与 D.单个染色体仅有一个复制起始点 E.片段连接时由ATP供给能量D32.端粒酶是一种 A.DNA-pol B.RNA-pol C.RNA水解酶 D.逆转录酶 E.DNA拓扑异构酶A33.端粒酶的作用是A.防止染色体中线性DNA分子末端缩短 B.促进染色体中线性DNA分子末端缩短 C.破坏染色体稳定性 D.促进细胞衰老、凋亡 E.促进细胞中染色体断端融合D34.下列同时具有DNA或RNA指导的DNA聚合反应与RNA水解三种功能的酶是A.DNA连接酶 B.拓扑异构酶 C.DNA聚合酶 D.逆转录酶 E.引物酶D35.下列能导致框移的突变是 A.A取代C B.G取代A C.缺失三个核苷酸 D.插入一个核苷酸 E.插入三个核苷酸 D36.紫外线照射引起DNA形成常见的嘧啶二聚体是 A.C-C B.C-T C.T-U D.T-T E.C-TB37.细胞内最重要和有效的修复方式是 A.光修复 B.切除修复 C.重组修复 D.SOS修复 E.错配修复C38.下列不参与DNA的切除修复过程的是A.DNA聚合酶I B.DNA聚合酶III C.核酸内切酶 D.DNA连接酶 E.解螺旋酶 B39.与修复过程缺陷有关的疾病是A.黄嘌呤尿症 B.着色性干皮病 C.卟啉病 D.痛风 E.黄疸 参考答案:15:DCCBB 610:DCBBD 1115:EACBA 1620:BCABE 2125:AEAAC 2630:BBABA 3135: DDADD 3639:DBBB二、名词解释:1.半保留复制:复制时,母链双链DNA解开成两股单链,各自作为模板指导子代合成新的互补链。子代细胞的DNA双链,其中一股链从亲代完整的接受过来,另一股单链则完全重新合成。由于碱基互补,两个子细胞的DNA双链,都和亲代母链DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。2.双向复制:原核生物复制时,DNA从起始点(origin)向两个方向解链,形成两个延伸方向相反的复制叉,称为双向复制。 3.半不连续复制:领头链连续复制而随从链不连续复制,就是复制的半不连续性。 4.领头链:DNA 复制时,顺着解链方向生成的子链,复制是连续进行的,这股链称为领头链(leading strand) 。5.随从连:复制的方向与解链方向相反,不能顺着解链方向连续延长,这股不连续复制的链称为随从链(lagging strand) 。6.冈崎片段:DNA复制时,随从链形成的不连续片段。7.Klenow片段:原核生物DNA-pol I经特异的蛋白酶水解后产生的大片段,具有 5-3 核酸外切酶活性和聚合活性,实验室合成DNA及分子生物学研究上,常用Klenow片段代替DNA聚合酶。8.复制子:是独立完成复制的功能单位,从一个DNA复制起始点起始的DNA复制区域称为复制子。9.引发体:复制起始时,原核生物由解链酶、DnaC 、DnaG结合到DNA复制起始区域形成的复合结构,称引发体。10.引物:是由引物酶催化合成的短链RNA分子。11端粒:指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。 由末端DNA序列和蛋白质构成。12.逆转录:以RNA为模板在逆转录酶的作用下合成双链DNA的过程。13.逆转录酶:催化以RNA 为模板合成双链DNA的酶。14框移突变:指由于核苷酸的插入或缺失突变引起三联体密码的阅读方式改变,造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变,其后果是翻译出的蛋白质可能完全不同。三问答题:1.拓扑异构酶功能是什么?说明其作用机制及拓扑异构酶I和拓扑异构酶II的区别。答:(1)、作用:拓扑异构酶改变DNA的拓扑构象,理顺DNA链来配合复制进程。(2)、作用机制:既能水解又能连接磷酸二酯键,使DNA松弛。(3)、区别:、拓扑异构酶:通过切断DNA的单链再连接,不消耗ATP;、拓扑异构酶:通过切断DNA双链然后再连接,需要水解ATP。二者均能实现复制中理顺DNA的功能。2.试述原核生物DNA聚合酶的种类和功能。答:(1)、种类:DNA聚合酶I(DNA-pol ) DNA聚合酶II(DNA-pol ) DNA聚合酶III(DNA-pol )(2)、功能:、DNA-pol :具有5,3聚合活性,同时具有5和3外切酶活性。在复制中填补空隙和校读。也常用做基因工程的工具酶。DNA聚合酶I的大片段具有3外切酶活性和5,3聚合活性,用于体外合成DNA。、DNA-pol :DNA聚合酶II突变,细菌依然存活,参与DNA损伤的应急状态修复。、DNA-pol :具有3外切酶活性和5,3聚合酶活性,且聚合活性高,是复制延长起催化作用的酶。3.试述DNA复制保真性需要依赖的三种机制。答:(1)遵守严格的碱基配对规律;(2)聚合酶在复制延长时对碱基的选择功能;(3)复制出错时DNA-pol的及时校读功能。4.端粒的结构特点有哪些?有何功能? 答:(1)、端粒的结构特点:端粒指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。由末端重复序列和蛋白质构成。重复序列是一条多次重复的富含 G、T碱基的短序列。(2)、端粒的功能:维持染色体的稳定性;维持DNA复制的完整性。5.端粒酶的分子组成有何特点?有什么功能?答:(1)、端粒酶的组成特点:端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的反转录酶。(2)、功能:它能在没有DNA模板的情况下,以自身RNA为模板,通过反转录作用,延伸端粒3末端的DNA,催化端粒合成,保证染色体复制的完整性。6.原核生物复制起始的相关蛋白质有哪些?各有何功能?答:蛋白质及其功能: DnaA辨认起始区 DnaB(解链酶)解开双链 DnaC协同DnaBDnaG(引物酶)催化引物生成 SSB稳定单链 拓扑酶理顺DNA链7.DNA损伤修复的方式有哪几种? 答:错配修复;光修复;切除修复;重组修复;SOS修复。8.什么是切除修复?写出其修复步骤。答:(1)、切除修复:切除修复是细胞内最重要的修复机制,主要由DNA聚合酶I和连接酶完成。(2)、修复步骤:修复蛋白识别损伤部位并切除之,DNA聚合酶I填补空隙,由连接酶连接缺口。第十一章 RNA的生物合成本章知识要点:1、转录的概念:是生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。2、原核生物的转录:答:(1)、结构基因、不对称转录:DNA分子上转录出RNA的区段,称为结构基因(structural gene)。转录的这种选择性称为不对称转录(asymmetric transcription),它有两方面含义:在DNA分子双链上,一股链用作模板指引转录,另一股链不转录;其二是模板链并非总是在同一单链上。(2)、RNA聚合酶、核心酶:DNA依赖的RNA聚合酶催化合成RNA。全酶:;核心酶:;(3)、转录过程:、转录起始需要RNA聚合酶全酶;a、RNA聚合酶全酶与模板结合,形成闭合转录复合体(closed transcription complex);b、DNA双链局部解开,形成开放转录复合体(open transcription complex);c、在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应,形成转录起始复合物:转录起始复合物: RNApol (a2sbb) - DNA - pppGpN- OH 3;、原核生物的转录延长时蛋白质的翻译也同时进行:a、s亚基脱落,RNApol聚合酶核心酶变构,与模板结合松弛,沿着DNA模板前移;b、在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长。(NMP) n + NTP (NMP) n+1 + PPi、原核生物转录终止分为依赖(Rho)因子与非依赖因子两大类:转录终止指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进,转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。a、依赖因子的转录终止;b、非依赖 Rho因子的转录终止:DNA模板上靠近终止处,有些特殊的碱基序列,转录出RNA后,RNA产物形成特殊的结构来终止转录。3、真核生物的转录:答:(1)、RNA聚合酶种类、特点:、RNA聚合酶(RNA Pol):位于细胞和热的核仁,催化合成rRNA前体,转录产物为45S-rRNA;对鹅膏蕈碱耐受。、RNA聚合酶(RNA Pol):在核内转录生成hnRNA,然后加工mRNA并输送给胞质的蛋白质合成体系。对鹅膏蕈碱极敏感。、RNA聚合酶(RNA Pol ):位于核仁外,催化转录编码tRNA、5SrRNA和小RNA分子的基因,转录产物为5S-RNA、tRNA、snRNA、。对鹅膏蕈碱中度敏感。(2)、主要转录因子有哪些?答:反式作用因子中,直接或间接结合RNA聚合酶的,则称为转录因子。主要有:TF、TF、TF.TF的功能已清楚;参与RNA-pol转录的TF:转录因子亚基组成和(或)分子量功能TFDTBP 38结合TATA盒TAF辅助TBP-DNA结合TFA12,19,35稳定TFD-DNA复合物TFB33促进RNA-pol结合及作为其他银子结合的桥梁TFF30,74解螺旋酶TFE57(a)34(b)ATPseTFH蛋白激酶活性,使CTD磷酸化型基因中的四类转录因子:转录因子具体组分 结合序列 功能 转录因子 基本组分TBP,TFA,B,E,G,F和HTBP结合TATA盒转录起始定位; 转录起始和延长 基本组分辅激活因子TAFs和中介子在可诱导因子和上游因子与基本转录因子、RNA聚合酶结合中起联结和中介作用 辅激活因子上游因子SP1、ATF、CTF等启动子上游元件协助基本转录因子,提高转录效率和专一性 上游因子可诱导因子如MyoD、HIF-1等增强子等远隔调控序列时间和空间(组织)特异性地调控转录 可诱导因子4、何谓顺式作用元件?简述其组成。答:(1)、顺式作用元件:不同物种、不同细胞或不同的基因,转录起始点上游可以有不同的DNA序列,但这些序列都可统称为顺式作用元件(cis-acting element)。 (2)、组成:顺式作用元件包括启动子、启动子上游元件(GC盒和CAAT盒)(upstream promoter elements或promoter-proximal elements)等近端调控元件和增强子(enhancer)等远隔序列。5、简述真核生物mRNA加工的过程。答:、前体mRNA在5-末端加入“帽”结构;、前体mRNA在3端特异位点断裂并加上多聚腺苷酸尾;、前体mRNA的剪接主要是去除内含子;、mRNA的编辑是对基因编码序列进行转录后加工。6、何谓“5帽子结构”?它有何作用?答:(1)、“帽子结构”:大多数真核mRNA的5-末端有7-甲基鸟嘌呤的帽结构。 (2)、作用:、可以使mRNA免遭核酸酶的攻击; 、也能与帽结合蛋白质复合体(cap-binding complex of protein)结合,并参与mRNA和核糖体的结合,启动蛋白质的生物合成。 7、何谓断裂基因、内含子、外显子?答:(1)、断裂基因:真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因。 (2)、内含子:隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 (3)、外显子:在断裂基因及其初级转录产物上出现,并表达为成熟RNA的核酸序列。8、简述tRNA的加工修饰的内容。答:(1)、5核苷酸序列的切除;(2)、32个核苷酸的切除,再加上CCA;(3)、稀有碱基的形成;(4)、剪切除去内含子9、何谓核酶?核酶研究有何意义?答:(1)、核酶:具有酶促活性的RNA称为核酶。 (2)、意义: 、核酶的发现,对中心法则作了重要补充;、核酶的发现是对传统酶学的挑战;、利用核酶的结构设计合成人工核酶。 一、 选择题:D1.关于转录的概念,下列哪一说法不恰当A.指导转录的DNA链称模板链 B.与模板互补的链称编码链 C.转录具有不对称性 D.两条链可同时被转录 E.第一个被转录的核苷酸位置也称+1 D2.转录底物是A.ATP、GTP、TTP、CTP B.AMP、GMP、TMP、CMP C.dATP、dGTP、dUTP、dCTP D.ATP、GTP、UTP、CTP E.d AMP、dGMP、dTMP、dCMP D3.下列哪种碱基只存在于RNA中? A.腺嘌呤 B.胞嘧啶 C.鸟嘌呤 D.尿嘧啶 E.胸腺嘧啶 A4.转录沿RNA聚合的方向是 A.53 B.35 C.25 D.52 E.无方向性A5.已知某基因转录产物的部分序列是5-AUCCUGCAU-3, 那么该基因中与此序列对应的编码链序列应该是A.5-ATCCTGCAT-3 B.5-AUCCUGCAU-3 C.5-AUGCAGGAU -3 D.5-ATGCAGGAT-3 E.3-ATCCTGCAT-5C6.已知某基因模板链的部分序列是5-ATGCTGCAA-3, 那么该基因的转录产物的序列应该是A.5-TACGACGTT-3 B.5- UACGACGUU -3 C.5-UUGCAGCAU-3 D.5- TTGCAGCAT 3 E.3- UUGCAGCAU 5B7.真核生物转录反应发生的部位是A.细胞质 B.细胞核 C.内质网 D.核糖体 E.高尔基体C8.下列关于RNA聚合酶的叙述哪一项是错误的A.原核生物仅有一种RNA聚合酶 B.真核生物有三种RNA聚合酶 C.RNA聚合酶转录需要引物 D.RNA聚合酶的底物是4种NTP E.RNA聚合酶的模板是局部的DNA片断A9原核生物启动序列 -10区的共有序列称为A.Pribnow盒 B.CAAT盒 C.GC盒 D.GACA盒 E.增强子E10.原核生物DNA指导的RNA聚合酶由数个亚基组成,其核心酶组成是A.2 B.2 C. D.2 E.2 C11.RNA聚合酶结合于操纵子的位置是 A.结构基因 B.调节序列 C.启动序列 D.操纵序列 E.CAP结合位点C12.细胞内识别转录起始点的是A.因子 B.核心酶 C.RNA聚合酶的亚基 D.RNA聚合酶的亚基 E.RNA聚合酶的因子B13.原核生物转录起始复合物的组成下列正确的是A.核心酶-DNA-pppGpN-OH B.全酶-DNA-pppGpN-OH C.全酶-DNA-RNA D.TFD -TFA-TFB- DNA复合体 E.核心酶-DNA-RNA E14.原核生物转录空泡的组成,下列正确的是A.核心酶-DNA-pppGpN-OH B.全酶-DNA-pppGpN-OH C.全酶-DNA-RNA D.TFD -TFA-TFB- DNA复合体 E.核心酶-DNA-RNA C15.真核生物中,RNA聚合酶催化的转录产物为A.45S-rRNA B.tRNA C.hnRNA D.snRNA E.siRNA D16.利福平(或利福霉素)抗结核菌机制是它抑制了菌体RNA聚合酶中A.亚基 B.亚基 C.亚基 D.亚基 E.因子B17.snRNA的功能是A.参与复制 B.参与hnRNA的剪接 C.激活聚合酶 D.形成核糖体 E.参与蛋白质的合成B18.RNA聚合酶启动的转录中,能直接结合TATA盒的转录因子是A.转录因子A B.转录因子B C.转录因子D D.转录因子E E.转录因子FE19.电子显微镜下观察到原核生物转录过程的羽毛状图形说明A.模板一直打开成单链 B.图中可见复制叉 C.转录产物RNA与模板DNA形成很长的杂化双链 D.多聚核糖体的翻译过程必须在转录完结后才出现 E.转录未终止即开始翻译B20.mRNA成熟过程中帽子结构形成的部位是A.细胞质 B.细胞核 C.内质网 D.核糖体 E.高尔基体 C21.与hnRNA的加工修饰无关的内容是A.5加帽,3加尾 B.RNA编辑 C.加3CCA D.切除内含子连接外显子 E.二次转酯反应A22.常见hnRNA的剪接接口是(5,3,)A.GUAG B.AGGU C.GAUG D.UGGA E.GAGUD23.真核生物mRNA的多聚腺苷酸尾巴(poly A)是A.由模板DNA上的多聚T序列转录生成 B.是输送到胞质之后才加工接上的 C.可直接在初级转录产物的3-OH末端加上去 D.先切除部分3端的核苷酸然后添加poly A尾巴E.加尾反应发生在核蛋白体上C24.真核生物转录终止的修饰点序列是A.-AAATAAGTGTGT- B.-AAATAAGUGUGU- C.-AATAAAGTGTGT- D.-AAUAAAGUGUGU- E.-AATAAAGUGUGU-A25.与tRNA的加工修饰无关的内容是A.5-端加帽子结构 B.5-端核苷酸序列的切除 C.3-端加CCA D.稀有碱基的形成 E.切除内含子A26.tRNA加工时在3端添加的序列为A.5CCA3 B.5CAA3 C.5CCC3 D.5AAC3 E.5UCA3B27.下列核酶概念不正确的是A. 核酶也称酶RNA B.它别名是RNA酶 C.它的英文名称是RibozymeD.它的本质是核酸 E.它不需蛋白质也能完成催化功能参考答案:15:DDDAA 610:CBCAE 1115:CEBEC 1620: BBCEB 2125:CADCA 2627:AB二、名词解释:1.转录:生物体以DNA为模板合成RNA的过程称为转录。2.结构基因:基因组中,能转录出RNA的DNA区段。3.模板链:结构基因DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链,称为模板链。 4.编码链 :结构基因中,与模板链互补的另一条DNA链称编码链。5.不对称转录:在双链DNA分子上,一股链用作模板指引转录,另一股链不转录 ;模板链并非永远在同一条DNA单链上。6.转录因子:反式作用因子中,直接或间接结合RNA聚合酶的,则称为转录因子。7.转录空泡:也称转录复合物,在转录过程中由RNA聚合酶的核心酶、DNA和转录产物RNA三者结合形成的复合体。9.CTD:羧基末端结构域,RNA聚合酶最大亚基的羧基末端有一段共有序列为yr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser的重复序列片段,称为羧基末端结构域,CTD对于维持细胞的活性是必需的。10.外显子:在断裂基因及其初级转录产物上出现,并表达为成熟RNA的核酸序列。11.内含子: 真核生物中隔断基因的线性表达,而在剪接过程中被除去的核酸序列。12.TATA 盒:真核生物转录起始点上游25区(或原核的-10区)多有典型的TATA序列,通常认为是启动子的核心序列。13. PIC:转录起始前复合物。真核生物转录前,RNA-pol通过众多的TF与DNA相结合。包括:TF D、A、B、E、F、H、RNA-pol和TATA序列形成的复合结构。 14.断裂基因:真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称断裂基因。15.转录终止修饰点:真核生物读码框架的下游,常存在共同序列AATAAA,再下游还有相当多的GT序列,mRNA在该处切断并加polyA。被称为转录终止修饰点。 16.剪接接口:真核生物内含子序列的“5GUAG-OH3”称为剪接接口。 三、简答题:1、简述复制与转录的区别。答:复制转录模板两股链均复制模板链转录(不对称转录)原料dNTPNTP酶DNA聚合酶RNA聚合酶产物子代双链DNAmRNA、tRNA、rRNA配对A-T、G-CA-U、T-A、G-C2.简述转录和复制的相同点。答:(1)转录和复制都是酶促的核苷酸聚合过程,都以DNA为模板;(2)都需要依赖DNA的聚合酶;(3)聚合过程都是核苷酸之间生成磷酸二酯键;(4)都从5至3方向延伸生成新链多聚核苷酸;(5)都遵从碱基配对规律。3.简述RNA聚合酶II的转录激活调节即PIC的组装过程。答: TFIID TFIIA TFIIB RNA-pol II/TFIIF TFIIE TFIIHTATA PIC 4.说明依赖因子的转录终止机制。答:Rho因子与RNA转录产物结合,结合后Rho因子和RNA聚合酶都发生结构变化,从而使RNA聚合酶停顿,转录停止,Rho因子发挥解螺旋酶活性使DNA/RNA杂化双链拆开,利于产物从转录复合物中释放。 5. 说明非依赖因子的转录终止机制 。答:转录接近终止区RNA形成茎环结构,其后面接一串寡聚U,是阻止转录的关键结构;茎环结构作用于RNA聚合酶,可能改变RNA聚合酶的构象,使转录停顿; 模板DNA恢复双螺旋结构和RNA中的寡聚U促进了RNA产物从模板上的脱落。6.简介真核mRNA 的转录后加工修饰。答:合成5端帽子结构;添加3端polyA尾巴;内含子的剪切和外显子的连接;RNA编辑。第十二章 蛋白质的生物合成(翻译)本章知识要点:1、蛋白质生物合成(翻译)的概念?答:蛋白质生物合成(protein biosynthesis)也称翻译(translation),是生物细胞以mRNA为模板,按照mRNA分子中核苷酸的排列顺序所组成的密码信息合成蛋白质的过程。 2、mRNA、tRNA、核蛋白体在翻译过程中的作用,遗传密码的特点?答:(1)、作用:、mRNA:mRNA是蛋白质生物合成的直接模板;、tRNA:tRNA是氨基酸的运载工具及蛋白质生物合成的适配器;、核蛋白体:核蛋白体是蛋白质生物合成的场所; (2)、遗传密码的特点:、方向性(directional):翻译时遗传密码的阅读方向是53,即读码从mRNA的起始密码子AUG开始,按53的方向逐一阅读,直至终止密码子。 、连续性(non-punctuated):编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读,密码子及密码子的各碱基之间既无间隔也无交叉。 、简并性(degenerate):一种氨基酸可具有2个或2个以上的密码子为其编码。这一特性称为遗传密码的简并性。、通用性(universal):从简单的病毒到高等的人类,几乎使用同一套遗传密码,因此,遗传密码表中的这套“通用密码”基本上适用于生物界的所有物种,具有通用性。密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。、摆动性(wobble):反密码子与密码子之间的配对有时并不严格遵守常见的碱基配对规律,这种现象称为摆动配对(wobble base pairing)。 3、氨基酰-tRNA合成酶的作用特点?答:氨基酰-tRNA合成酶催化氨基酰-tRNA合成过程分两步。首先,氨基酸结合于AMP-酶(AMP-E),形成中间产物,AMP-E通过消耗ATP生成。其次才生成氨基酰-tRNA。反应过程如下:第一步:;第二步:。氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性;氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性。4、原核、真核生物翻译过程的异同?答:(1)、原核生物与真核生物肽链合成过程的主要差别: 原核生物真核生物mRNA一条mRNA编码几种蛋白质(多顺反子)一条mRNA编码一种蛋白质(单顺反子)转录后很少加工转录后进行首尾修饰及剪接转录、翻译和mRNA的降解可同时发生mRNA在核内合成,加工后进入胞液,再作为模板指导翻译核蛋白体30S小亚基50S大亚基70S核蛋白体40S小亚基60S大亚基80S核蛋白体起始阶段起始氨基酰-tRNA为fMet-tRNAfMet起始氨基酰-tRNA为Met-tRNAiMet核蛋白体小亚基先与mRNA结合,再与fMet-tRNAfMet结合核蛋白体小亚基先与Met-tRNAiMet结合,再与mRNA结合mRNA中的S-D序列与16S rRNA 3-端的一段序列结合mRNA中的帽子结构与帽子结合蛋白复合物结合有3种IF参与起始复合物的形成有至少10种eIF参与起始复合物的形成延长阶段延长因子为EF-Tu、EF-Ts和EF-G延长因子为eEF-1、eEF-1和eEF-2终止阶段释放因子为RF-1、RF-2和RF-3释放因子为eRF (2)、同:合成过程基本相同,都要经历起始、延长、终止等三个步骤;5、分子伴侣的作用,翻译后修饰的形式?答:(1)、分子伴侣的作用:、封闭待折叠蛋白质的暴露的疏水区段;、创建一个隔离的环境,可以使蛋白质的折叠互不干扰;、促进蛋白质折叠和去聚集;、遇到应激刺激,使已折

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