同型半胱氨酸的检测及临床意义.doc

同型半胱氨酸的检测及临床意义一、同型半胱氨酸同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）是一种人体内的含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物，部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在，微量以还原型同型半胱氨酸存在，大部分通过二硫键与白蛋白结合而存在。大量对Hcy的研究表明Hcy是心脑血管疾病的独立危险因素，危险度随着浓度的升高而增加。Boushey等的研究结果显示，血浆总Hcy水平每升高5umol/L，相当于胆固醇升高500umol/L。伴有血浆Hcy升高(10umol/L)的原发性高血压定义为H型高血压。二、影响血液Hcy水平的因素1、遗传因素： C667T点突变可引起Hcy升高。CBS基因多态性。蛋氨酸合成酶基因多态性。2、性别与年龄： 国内外不少研究发现，Hcy随年龄增长而升高，而且男性女性。女性在绝经前的水平较低，绝经后显著升高，认为其机制可能与雌激素水平的变化有关。3、营养因素：VitB6、VitB12、叶酸等Hcy代谢辅酶摄入不足时，则Hcy升高。 饮酒：长期饮酒可引起肝细胞蛋氨酸合成酶活性下降，从而造成Hcy血症。饮食中蛋氨酸过高：有报道认为高动物蛋白饮食可能是Hcy血症的危险因素之一。三、同型半胱氨酸致病机理1、内皮毒性作用。2、刺激血管平滑肌细胞增生。3、致血栓作用：Hcy可促进血栓调节因子的表达，激活C蛋白和凝血因子、，血小板内前列腺素合成增加，从而促进血小板粘附和聚集。4、脂肪、糖、蛋白代谢紊乱：Hcy可促进脂质沉积于动脉壁，泡沫细胞增加，还可改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结构，促进斑块钙化。5、干扰谷胱甘肽的合成：谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂，它能防止很多细胞成分的氧化互相作用，对血管产生保护作用。Hcy干扰谷胱甘肽的合成，从而对机体造成危害 。6、影响体内的转甲基化反应：Hcy浓度的升高会影响体内许多物质的甲基化过程，甲基化能力的降低影响细胞的发育及分化，这可能是Hcy致病的关键因素。 许多有关高Hcy血症的生化基础有待明确，Hcy与各种疾病的关系及防治需继续探讨。四、Hcy与其它因素对心脑血管疾病的协同作用吸烟：研究发现，每日抽烟量大于20支，同时血浆Hcy12umol/L的人群，心血管疾病危险性是Hcy水平正常且不吸烟者的12倍。血脂异常：总胆固醇及Hcy和胆固醇水平均为最高值组的患者与均为低值组相比，患心血管疾病的危险性增加4倍。糖尿病：在对658名经血管造影确诊冠心病的患者进行的研究中，Ueland等观察了Hcy升高和糖尿病对于总死亡率的复合作用。结果发现：Hcy升高和糖尿病联合，可使死亡的危险性指数上升。高血压：研究发现当校正了心血管危险因子后，Hcy与高血压呈独立的正相关关系。Hcy的浓度升高5umol/L，受试者中男性的舒张压和收缩压分别增加0.5和0.7mmHg，女性分别增加了0.7和1.2mmHg。肾脏疾病：最近Mallamaci等对195名意大利的血透患者进行观察， 平均30个月的跟踪调查，Hcy tertile 值最高组患者，心血管疾病发生的危险性是最低组的8.2倍。证明了Hcy是透析患者心血管死亡率独立的，很强的危险因子。慢性肾病病人因排泄Hcy功能障碍，血中总Hcy增加，造成动脉粥样硬化，心血管疾病的死亡率增加。五、Hcy的测定方法 1、同位素法：该方法灵敏度高，特异性强，但操作繁琐且有放射污染，未能推广使用。2、色谱法：灵敏度特异性好，但因仪器价格昂贵、操作费时费力、技术性强等而不能推广。 3、荧光偏振免疫测定：此法需要专门的荧光偏光免疫检测仪。 4、ELISA：对仪器要求不高，易普及，但结果准确性相对较差。5、放射免疫法：结果准确，但有放射性污染，很少使用。6、循环酶法：快速、简便、灵敏度高。可上全自动生化分析仪，适用大批标本，临床应用广泛。循环酶法也是目前更适合我们检验科开展的方法，其检测原理为：基于小分子捕获技术SMT的S-腺昔同型半胧氮酸水解酶。Hey被转化为游离型后，通过与共价底物反应，循环放大，同时产生腺昔。腺昔立即水解成氨和次黄嗦吟，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使NADH转化为NAD,样本中的Hey浓度与NADH转化速率成正比。目前可用的试剂分别有：北京九强、四川迈克、宁波美康等公司生产的同型半胱氨酸试剂盒。六、同型半胱氨酸的临床应用1、心血管病防治（1）HCY升高与动脉粥样硬化(AS)的关系： 1969年就曾有人从尸检中发现2例血浆Hcy浓度超过正常人几十倍的病人存在广泛的动脉粥样硬化和动脉血栓。临床上发现高胱氨酸尿症病人早年多因全身动脉粥样硬化和血栓形成死于脑梗塞和心肌梗塞，这与血中Hcy升高有关。有学者在动物实验中观察到注射Hcy后引起高Hcy血症，23个月后发生动脉粥样硬化。认为高Hcy血症是发生动脉粥样硬化的独立危险因素。（2）Hcy水平与心血管疾病的危险性通过血管内超声观察AS斑块情况 ，发现血浆HCY浓度与冠状动脉病变程度呈正相关，冠状动脉病变支数随着血浆Hcy浓度增高而增加。有研究表明：轻度、中度Hcy水平升高可使心血管疾病死亡危险性增加4 6倍，血浆总Hcy水平每升高5mol/L则CHD危险性男性增加60%，女性增加80%。Hcy与心力衰竭的相关性更为密切，对尚未出现心脏病症状者来说，Hcy升高者患心力衰竭的危险可加倍。2、HCY与神经系统疾病脑卒中：血浆Hcy15umolL为高Hcy血症，普通人群血浆Hcy水平升高者只有不到5，而在脑卒中患者中可达3040。美国研究表明：Hcy的升高是与中风有重要关联的危险因子。美国最新的数据显示中年后期男性中风发病率，处于55-64这个年龄段的男性相对于45-54年龄段的男性而言，前者患中风的几率是后者的三倍。帕金森病：高HCY是造成老年痴呆症与帕金森的重要因素：弗明汉医学研究中心对1092例（76岁）追踪调查8年Hcy值，结果：Hcy超出14mol/L，患老年性痴呆的危险性增加1.8倍，患多异古怪痴呆发生率增加1.6倍。英国OPTIMA项目研究发现： Hcy水平大于11.2mol/L的病人，三年后随访，发现他们大脑颞叶（包括海马）快速萎缩。3、糖尿病及并发症防治国内外大量研究结果显示，血浆Hcy水平可作为2-型糖尿病患者患大血管疾病的独立危险因素。监测糖尿病患者Hcy水平有利于对其预后的评估。Hcy升高在糖尿病伴肾脏、视网膜及血管并发症的患者更为严重。高Hcy血症也能促进糖尿病微血管并发症的发生与发展。4、慢性肾功能衰竭并发症防治慢性肾功能衰竭患者普遍有高Hcy血症，其发生率是正常人33倍。尿毒症时一方面肝脏蛋氨酸腺苷转移酶活性升高，导致S-腺苷蛋氨酸水平升高；另一方面肾功能下降使Hcy代谢的必需产物丝氨酸合成减少，导致Hcy代谢受抑制引起Hcy的堆积。5、肺血栓栓塞症防治研究表明，高Hcy血症（20mol/L）使得深静脉血栓的危险性明显增大，高Hcy血症可使深静脉血栓发生率增加4倍。高Hcy是我国汉族人群肺血栓栓塞症发病的一个独立的危险因子，降低Hcy可降低国人静脉血栓栓塞症的危险。6、预测骨折风险美国和荷兰的研究结果显示：高Hcy的人容易骨折，高Hcy组与低Hcy组相比，男性的骨折风险为后者的4倍，女性为1.9倍。研究还显示：老年人骨折中19%是由高Hcy引起的。Hcy阻碍骨胶原纤维状蛋白质形成网状结构的作用可能就是高Hcy者容易骨折的原因。7、诊断与监测肝损伤研究结果显示：血浆Hcy浓度在急性肝病和慢性肝病患者间差异有显著性；血浆Hcy浓度对于慢性肝损伤的敏感性为91%，特异性为89%。以病理组织切片对照敏感性为94%，特异性为89%。血浆Hcy浓度检测还可应用于对普通人群慢性肝病的筛选。8、优生优育与母婴健康流行病学研究报导：血中Hcy值高的妇女容易产生妊娠并发症 (32%)；早产 (38%)；新生儿体重减低 ( 99%)。孕妇检测Hcy对防治妊娠并发症与优生优育（预防早产、流产、新生儿体重减低、胎儿神经管畸型等）具有重要意义。9、肿瘤防治有研究发现：未服抗叶酸药物的乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌中有许多患者的血清Hcy升高。Ueland和Refsum在白血病患者的研究认为Hcy升高是因肿瘤细胞的快速增殖所致。许多恶性肿瘤细胞有对蛋氨酸的依赖性，蛋氨酸的依赖或高Hcy血症可能是恶性肿瘤一种表型的表达。Lily L等在一组未用药的肿瘤患者中将Hcy浓度与主要的肿瘤标志物进行了比较，发现Hcy血清浓度的变化与血清肿瘤标志物CA125、CA15-3、CA19-9及CEA的变化是平行的。这提示血清Hcy与肿瘤标记物一样反应肿瘤细胞的活性或肿瘤细胞的快速增生状况。10、什么样的人需要做HCY检查？已有CHD、脑血管病或周围AS病者；有高血压、糖尿病、肥胖、吸烟者；有CHD或AS家族史者，尤其是直系亲属中有早发病或早病死者；有黄瘤或黄疣者； 有家族性高脂血症者；40岁以上男性及绝经期后女性。七、血标本采集注意事项样品为血清或血浆，空腹 8h以上，采血后1h之內离心分离, 置干净试管中保存。样本稳定性：室温：2-7天；2-8：14天；-20：几年。样品不宜反复冻融。血红蛋白,胆