糊精含量测定.doc

糊精含量测定糊精的检测方法中,研究了乳粉中糊精含量的检测方法.样品经过质量分数为85的乙醇溶液处理,提取物经过盐酸水解后进行还原糖含量的热滴定,从而计算出样品中糊精的量.结果表明,该方法用于检测乳粉中糊精在0.8以上含量具有良好的重现性和回收率,同时方法操作简单,结果准确,适用于乳品企业进行原料及产品中糊精的检验.据我所知国标还没有,现在的检测方法都是各企业自行研究的,有用苯酚硫酸法显色光度法,也是测乳粉中糊精的.GB/T20884-2007是麦芽糊精产品的检测食品中淀粉的测定 第一法 酶水解法一、目的与要求：1、明确与掌握各类食品中淀粉含量的原理及测定方法。2、掌握用酶水解法和酸水解法测定淀粉的方法。二、原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。 三，试剂： 1、0.5淀粉酶溶液：称取淀粉酶0.5克，加100毫升水溶解，数滴甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。 2、碘溶液：称取3.6克碘化钾溶于20毫升水中，加入1.3克碘，溶解后加水稀释至100毫升。3、乙醚4、85乙醇5、6N盐酸：量取50毫升盐酸加水稀释至100毫升。6、甲基红指示液：0.1乙醇溶液。7、20氢氧化钠溶液。8、碱性酒石酸铜甲液：称取34.639克硫酸铜(CuS045H2O)。加适量水溶解，加0.5毫升硫酸，再加水稀释至500毫升，用精制石棉过滤。 9、碱性酒石酸铜乙液：称取173克酒石酸钾钠与50克氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500毫升，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。 10、0.1000N高锰酸钾标准溶液。 11、硫酸铁溶液：称取50克硫酸铁，加入200毫升水溶解后，人100毫升硫酸，冷后加水稀释至1000毫升。 四、操作方法： 1、样品处理： 称取2-5克样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪，再用约100毫升85乙醇洗去可溶性糖类，将残留物移入250毫升烧杯内，并用50毫升水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15分钟，使淀粉糊化，放冷至60以下，加20毫升淀粉酶溶液，在55-60保温1小时，并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴溶液，应不显现蓝色，若显蓝色，再加热糊化并加20毫升淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。加热至沸，冷后移入250毫升容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤，弃去初滤液。取50毫升滤液，置于250毫升锥形瓶中，并加水至刻度，沸水浴中回流1小时，冷后加2滴甲基红指示液，用20氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100毫升容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并人100毫升容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。 B、测定： 吸取50毫升处理后的样品溶液，于400毫升烧杯内，加入25毫升碱性酒石酸铜甲液及25毫升乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热，控制，在4分钟内沸腾，再准确煮沸2分钟，趁热用铺好石棉的古氏坩埚或c4垂融坩埚抽滤，并用60热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫升烧杯中，加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水，用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以0.1000N高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。 同时量取50毫升水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白实验。计算：X1=(A1-A2)0.9)/( m150/250V1/1001000)100X1：样品中淀粉的含量，；A1：测定用样品中还原糖的含量，mg；A2：试剂空白中还原糖的含量，mg；0.9：还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数；m1：称取样品质量，g；V1：测定用样品处理液的体积，毫升(m1)。第二法 酸水解法 一、原理： 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖，然后按还原糖测定，并折算成淀粉。二、试剂：1、乙醚；2、85乙醇溶液；3、6N盐酸溶液；4、40氢氧化钠溶液；5、10氢氧化钠溶液；6、甲基红指示液：0.2乙醇溶液7、精密PH试纸8、20乙酸铅溶液9、10硫酸钠溶液10、乙醚11、碱性酒石酸铜甲液。 (配制见前)12、碱性酒石酸铜乙液； (配制见前)13、硫酸铁； (配制见前)14、0.1000N高锰酸钾标液三、仪器：1、水浴锅2、高速组织捣碎机：1200rmin3、皂化装置并附250毫升锥形瓶。四、操作方法：1、 样品处理A、粮食，豆类、糕点、饼干等较干燥的样品，称取2.0-5.0克磨碎过40目筛的样品，置于放有慢速滤纸的漏斗中，用30毫升乙醚分三次洗去样品中的脂肪，弃去乙醚。再用150毫升85乙醇溶液分数次洗涤残渣，除去可溶性糖类物质。并滤干乙醇溶液，以100毫升水洗涤漏斗中残渣并转移至250毫升锥形瓶中，加入30毫升6N盐酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2小时。回流完毕后，立即置流水中冷却。待样品水解液冷却后，加入2滴甲基红指示液，先以40氢氧化钠溶液调至黄色，再以6N盐酸校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深，可用精密PH试纸测试，使样品水解液的PH约为7。然后加20毫升20乙酸铅溶液，摇匀，放置10分钟。再加20毫升10硫酸钠溶液，以除去过多的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转入500毫升容量瓶中，用水洗涤锥形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀释至刻度。过滤，弃去初滤液20毫升，滤液供测定用。 B、蔬菜、水果、各种粮豆含水熟食制品：按1：1加水在组织捣碎机中捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净、晾干、取可食部分)称取5-10克匀浆(液体样品可直接量取)，于250毫升锥形瓶中，加30毫升乙醚振摇提取(除去样品中脂肪)，用滤纸过滤除去乙醚，再用30毫升乙醚淋洗两次，弃去乙醚。以下按A自“再用150毫升85乙醇溶液”起依法操作。 2、测定： 吸取50毫升处理后的样品溶液，于400毫升烧杯内，加25毫升碱性酒石酸铜甲液及25毫升乙液。于烧杯上盖一表面皿加热，控制在4分钟沸腾再准确煮沸2分钟，趁热用铺好石棉的古氏坩埚或G4垂融坩埚抽滤，并用60热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫升烧杯中，加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水，用玻棒搅拌使氧化铜完全溶解，以0.1000N高锰酸钾标液滴定至微红色为终点。 同时吸取50毫升水，加与测样品时相同量的碱性酒石酸铜甲乙液、硫酸铁溶液及水，按同一方法做试剂空白试验。计算： x2=(A3-A4)0.9)/( M2V2/500100)-100式中：X2：样品中淀粉含量，；A3：测定用样品中水解液中还原糖含量，mg；A4：试剂空白中还原糖的含量，mg；m2：样品质量，mg；V2：测定用样品水解液体积，m1；500：样品液总体积，ml； ，0.9：还原糖折算成淀粉的换算系数。淀粉的测定(戊糖的测定)在食品加工中往往用淀粉做增稠剂,用于改变食品的物理状况.有的加淀粉为了使操作容易,如各种硬糖和奶糖,在成形过程中,加入淀粉可防止相互粘结和吸湿.有的食品不仅含淀粉高,而且都是用淀粉制造的比如粉丝粉条粉皮凉粉绿豆糕 淀粉测定方法大体上可分为两类:1.用酸或淀粉酶将淀粉分解为单糖后测定2.用重金属盐将蛋白质,单宁等除去.用显色剂显色后进行比色分析。 除此之外,还有酸化酒精沉淀法,在含淀粉不高的样品中准确性差(一).含多量淀粉样品的测定方法: 本法适用于含淀粉量多的样品如:小麦糖、米糖、山芋干、藕糖、子蹄糖、糖丝、糕干糖、代乳糖等1.原理.淀粉在淀粉酶作用下或在一定酸度下被分解为单糖然后用测总糖的方法测定共含量,再乘上换算参数0.9即为淀粉重量。根据反应式:淀粉与葡萄糖之比为162.1:180.12=0.9:1； 说明0.9克淀粉水解后可得1克葡萄糖。2.试剂3.操作步骤: 称干燥样2-3克 乙醚洗涤4-5次.每次10毫升 用10%的乙醇150毫升分次洗涤，以除去1克液 将残留液用200毫升水流入三角瓶加稀盐酸(2:1)20毫升至沸水浴溶解2.5HR冷却用20%NaOH中和加铝浆10毫升加入500毫升容量瓶 稀释至刻度过滤取滤液按总糖测定法测定葡萄糖含量所得葡萄糖量乘以0.9即为淀粉含量4.计算:淀粉%=葡萄糖(%)0.9注意:A.用乙醚提取少量的脂肪,若样品中仅含微量脂肪,乙醚洗涤可以省略.B.用10%乙醇洗涤,以除去可溶性糖类(包括糊精)等物质.(二) 含少量淀粉样品的测定法.此法适用于含淀粉量少的植物性样品.如蔬菜以及某些果品等.1.原理.同上.2.操作步骤:称5-10克于250毫升三角瓶加1N硫酸100毫升入高压蒸汽锅15秒冷却用20%NAOH中和加入20%醋酸铅20毫升使蛋白质全部沉淀再加入硫酸钠11.5毫升沉淀除铅锥形瓶全部倒入250毫升容量瓶加水至刻度静置过滤取滤液按测定总糖量的方法测定葡萄糖含量另取一分样品按总糖量的测定方法进行转换并测定转化糖量(以葡萄糖计)二者之差为葡萄糖量即为1克淀粉水解而得.计算:淀粉%=水解后的总糖(以葡萄糖计%)-转化糖(以葡萄糖计%)0.9（三）熟肉制品中淀粉含量的测定法在熟肉制品中有的加入相当多的淀粉，有的几乎不加。它们的差别是很大的，在测定这类食品时，根据情况决定取样量的多少。测定方法有重量法、容量法、比色法。样品的前处理一般步骤如下：a.制品在加热过程中加NaOH和乙醇溶液，破坏其组织和皂化脂肪。b.加醋酸酸化，用C2H5OH使淀粉，沉淀并分离。c.将沉淀滤出称重，或者溶解后加酸水解。d.按总糖的测定方法测葡萄糖并换称成淀粉量(一)容量法：称样5g于500ml磨口锥型瓶中加100ml水和7ml浓盐酸加热回流1h冷却用30%NaOH中和破坏组织、皂化脂肪用滤纸滤入500ml容量瓶（加5ml2%醋酸锌+5ml6%亚铁氰化甲）加水至刻度摇匀按Lane-Eynm Method测定转化糖量（同时做空白试验）计算：淀粉%=500/W100/50（A-b）0.9/V100/1000注：W：样品重量100/50：取50ml样液进行转化后定容至100mlA：样品中淀粉相当于还原糖的重量，（以葡萄糖计）mgB：试剂空白相当还原糖重量，（以葡萄糖计）mgV：取Vml经转化后的样液测定还原糖，ml0.9：还原糖（以葡萄糖计）换称为淀粉的回数1000：将毫克换算成克100：在100克中含淀粉良500：样品溶于500毫升之中（二）比色法称样5g于250ml离心管中加水40ml摇匀（加3ml2%醋酸锌+3ml6%亚铁氰化甲）于1500转/分离心机中离心5分钟倒出上清液加25ml水重复上面操作两次（每次加1ml12%醋酸锌+1ml6%亚铁氰化钾）残渣移入滤纸上然后把残渣移入250ml锥型瓶用50ml0.1N Hcl将残渣清洗入瓶内于68-70C水浴上转化搅拌保持1.5h加12%盐酸（V/V）10ml移入100ml容量瓶加20%磷酸15ml加水至