南极磷虾中油脂类物质的提取和特性 翻译.doc

南极磷虾中油脂类物质的提取和特性JosephC.Gigliotti,MatthewP.Davenport,SarahK.Beamer,JanetC.Tou ,J.Jaczynski关键词：南极磷虾虾油 油脂提取 脂肪酸的外形 脂质成分 Omega-3多不饱和脂肪酸 营养食品 功能性食品摘要：从磷虾中提取的虾油因为含有丰富的Omega-3多不饱和脂肪酸，比如EPA和DHA而具有很重要的商业价值。我们的目标是确定使用不同提取方法时虾油的提取效率和虾油的主要成分。与常规的两步提取法和索氏提取法相比，当使用溶质和溶剂比为1:12或1:30的一步提取法时提取效率最高，溶质应当是冷冻干燥的磷虾。提取出的虾油主要含2033%的磷脂，6477%的非极性磷脂和少量的13%的甘油三酯。虾油中的甘油三酯比磷脂中含有更多的饱和脂肪酸。用一步提取法（每毫升虾油用等值的9.414.2 umol Trolox)提取的虾油的抗氧化能力和用乙醇提取的磷虾虾油的抗氧化能力基本相同，但是比用丙酮和索氏提取法提取的虾油强。虾油被提取后的磷虾含有72.975.8%,的蛋白质。根据提取效率和得到的虾油的成分，推荐使用溶质溶剂比为1:12的一步提取法。1绪论南极磷虾是一种小型的虾状甲壳类动物。南极磷虾的商业捕捞十分简单，因为磷虾会在大洋表面形成密集的群体。尽管磷虾身躯渺小，但是却拥有地球上多细胞生物中最庞大的种群数量。虽然无法准确计算南极磷虾收获的可持续生物量，但是这一显著的资源已经可以和其他任意一种水生生物资源的收获量媲美了。2000年之后世界上每年的渔业总捕获量已经超过了一亿三千万吨(FAO,2007)。与之相比，世界上的磷虾总储量约为4亿到15亿5000万吨，而可捕捞量约为7000万到2亿吨(Suzuki&Shibata,1990)。不过，最新的估计显示磷虾的资源总量可能比之前估计的略少(Priddle,Boyd,Whitehouse,Murphy,&Croxall,1998;) Nico和Foster估计磷虾的年捕获量约为10万吨，这使磷虾成为一个未充分利用的物种。不过，鉴于磷虾在海洋生态中所扮演的作用，必须要为这一渔业资源的长期可持续发展建立国际监管机制。(Everson,2000;Hureau,1985;Laws,1985). Grantham(1977)报道磷虾中含有77.983.1%的水分，0.43.6%的脂质，11.915.4%的蛋白质，和2%的糖类。Saether,Ellingsen,和Mohr(1986)研究发现，磷虾干重中的纸质含量季节性的在1250%浮动。磷虾中的油脂含量和成分也取决于种类，年龄和捕获和冷冻之间的时间(Kolakowska,1991).。. Kolakowska,Kolakowski和Szczygielski(1994) 报道说虾油里的n-3PUFA,EPA和DHA特别丰富，这是由于磷虾食用的是单细胞海洋微型藻类。然而，贝类一般被看做高胆固醇的食品，因此减少了其作为食品被消费者接受的程度。磷虾的胆固醇水平比鱼高，但低于虾(Tou,Jaczyn-ski,&Chen,2007).。此外，要强调的是，贝类固醇中三分之二是非胆固醇类固醇，这会干扰日程饮食中胆固醇的吸收(Feeley,Criner,&Watt,1972;Vahouny,Connor,Roy,Lin,&Gallo,1981).尽管磷虾有作为一个高品质的蛋白质和脂肪来源的潜力，作为人类食物利用的磷虾却是有限的。磷虾由于其很高的虾青素含量而被用于减少渔业生产中所使用的鱼饲料。此外，封装磷虾油在日常膳食中起到各种潜在的健康保护作用，包括防止心血管疾病，这些好处一部分归功于虾油中的不饱和脂肪酸和磷脂。鱼类的n-3多不饱和脂肪酸多与甘油三酯有关，这一点和磷虾不同。磷虾油的氧化稳定性被归因于它的抗氧化剂含量，特别是虾青素。(Suzuki&Shibata 1990)。磷虾油可能在保健食品的开发领域非常有价值。(Kassis,Beamer,Matak,Tou,andJaczynski,2010;Kassis,Drake,Beamer,Matak,&Jaczynski,2010;Kassis,Gigliotti, Beamer,Tou,andJaczynski,submittedforpublication).以磷虾为基础的食品生产工业存在的主要障碍就是磷虾中的高活性脂肪酶和蛋白酶。(Anheller,Hellgren,Karlstam,&Vincent, 1989)这些酶在磷虾死亡之后被立即释放，使磷虾自溶，从而导致磷虾快速腐败。这种酶的特性与其小体积结合，使作为人类食物的磷虾处理成为一个重大挑战。另一个担忧是磷虾外骨骼内所含有的氟，不过，可以使用离心的方法取出氟化物(Christians&Leinemann,1983;Karletal.,1986).磷虾油目前用两步溶剂萃取，第一个和第二个步骤分别用丙酮和乙醇。(Beaudoin&Martin,2004;Sampalis,2007).然而，这种提取方法需要两个独立的步骤和相对长的时间。此外，两步提取法在磷虾油提取之前没提到去水的问题。在提取之前去水可以大大的提高提取效率，并且去除水的干扰，并使提取后得到的虾油里的水变少。(Dunford,Temelli,&LeBlanc,1997;Nilsson,1996).另一个提取虾油的过程需要利用含有20%乙醇的超临界CO2 (Bruheimetal.,2008).然而，这个过程需要在虾油提取之前对脂肪酶进行超过50的热灭活。虽然酯键和少量脂肪酸分解产生的热量会导致脂肪酶失活，它会同时使不耐热的磷虾肌肉蛋白变形。(Carvajal,Lanier,&Macdonald,2005).由于结构的变化，磷虾蛋白失活之后很难复性，即使磷虾蛋白复性，也将丧失某些能力，比如凝胶形成能力等Bruheimetal.s(2008)过程类似于两步溶剂萃取，(Beaudoin&Martin,2004;Sampalis,2007)，但是此过程之前不需要进行除水处理。然而，在超临界二氧化碳进行虾油提取之前对虾进行冷冻干燥已经被证明可以将提取效率提高三倍。(Yamaguchietal.,1986).在虾油提取过程之后保留的蛋白质可以用増溶，降水，等电点等方法复原，并且保留原来的性质。这些蛋白质可以应用于人类的食品生产当中，使这一巨大资源得到充分利用。(Chen&Jaczynski,2007a,b; i,2010;Torres, -Gar-cia,&Jaczynski,2007).、2材料和方法2.1样品制备和虾油提取完整的南极磷虾从磷虾加拿大获得。整块的磷虾被装到了充满干冰的工业绝缘箱里运送到了西弗吉尼亚大学的食品科学实验室。抵达后，立即储存在零下八十摄氏度下直至使用。整块的冷冻磷虾未经解冻直接冷冻干燥，真空包装 和储存在-80。虾油提取图见图示1. 在单步提取法中，虾油是从以1:1的溶质溶液比的冷冻干燥的磷虾中提取的，溶剂是比例为1:1的丙酮和乙醇。下面的磷虾样品以1:6,1:9,1:12和1:30的溶质溶剂比进行了测试。最初的干磷虾质量被记录下来来确定提取效率（见下文）。本研究用了1:30的比例，模仿Beaudoin 和 Martin(2004) 以及 Sampalis所描述的整个新鲜磷虾的1:6的比例。新鲜的整个磷虾目前被用来商业虾油提取。(Beaudo-in&Martin,2004;Bruheimetal.,2008;Sampalis,2007)然而，本研究使用的是冷冻干燥的磷虾(Dunfordetal.,1997;Yamaguchietal.,1986)在商业磷虾油提取中根据有关的脂肪含量和有关的溶剂量，在本实验中使用1:30的比例，相当于新鲜磷虾时1:6的比例。冷冻干燥磷虾使用实验室搅拌器搅拌30s后分散在乙醇丙酮混合溶剂中。油脂提取要在4摄氏度下使用振动筛连续提取2小时，在4下以10000g的速度离心20分钟后。提取的磷虾油在大气压力下风干。底泥（残余磷虾包括蛋白质，外壳等）也在大气压力下风干和进行粗蛋白质分析（凯氏），总脂肪（索氏），灰分含量（见下文）。在两步提取法中虾油是从使用两个单独的提取步骤的冷冻干燥的磷虾中提取的。最初的冷冻干燥磷虾的重量被记录下来来确定提取效率（见下文）。冷冻干燥磷虾首先与丙酮以1:6的比例混合，然后再与乙醇以1:6的比例混合，最后离心。因此获得了两个单独的提取物，第一步获得了丙酮提取物，第二步获得了乙醇提取物，使用实验搅拌器搅拌30s使冷冻干燥的磷虾混匀在丙酮中。在4摄氏度和10000g下离心20分钟后使用连续振动筛对第一步中的虾油震动两个小时。丙酮提取物在大气压下澄清和干燥，而底物在步骤2中处理。第二步以同样的方式进行，出了第一步使用乙醇而不是丙酮。因此，步骤1和步骤2的总提取时间为4小时。第第二步之后，在4，10000g条件下离心20分钟。乙醇提取物在大气压下放置并干燥。剩余的磷虾外壳，蛋白质等进行灰分，粗蛋白，总脂肪含量分析。（见下文）。 干磷虾油（即一步提取的磷虾油和两步的丙酮和乙醇提取物）在体积比2：:1的氯仿甲醇混合物中，然后用20ml的10NaCl用分液漏斗分离。(Folch,Lees,&Sloane,1957).这种方法可以去除虾油样品中的所有残留水。加入足量的氯仿甲醇混合液直到没有明显的分层。放置澄清以后，把虾油样品在大气压力下干燥。干燥的澄清磷虾油称重之后和最初的冷冻干燥的磷虾质量作比较，以确定提取效率。（见下文）图1 对磷虾虾油提取和提取的虾油及参与磷虾的后续分析流程图 为了比较，还从冷冻干燥磷虾里用Folch法和索氏提取法提取虾油。在Folch法中，3g冷冻干燥的磷虾溶解在体积比为2:1的氯仿甲醇混合物中，用实验室搅拌机搅拌30s，然后在分液漏斗中过滤。往分离漏斗里加入20ml10的Nacl，用手摇动直到出现分层。底部有机溶剂被移除后在大气压下干燥。溶剂蒸发后得到高浓度的磷虾油。虾油的重量被记录以确定提取效率。在索氏提取法中，3g冷冻干燥的磷虾溶解于石油醚中。索氏提取在一个标准仪器中进行18小时，接下来在大气压下干燥。石油醚蒸发干燥之后得到虾油。虾油的重量被记录以计算提取效率。在预实验中，采用上述溶剂系统是为了从新鲜磷虾和冷冻干燥的磷虾中提取虾油。在所有溶剂系统中，新鲜磷虾与冷冻干燥的磷虾相比，虾油的提取效率明显降低。这些预实验证实了Yamaguchi Et Al.(1986)和 Dunfordetal.(1997).等人的报告。因此，本实验中只是用冷冻干燥的磷虾。所有的虾油提取使用同一批次的冷冻干燥的磷虾进行了3个同步实验。2.2 提取效率的测定 用不同溶剂系统提取的冷冻干燥的磷虾的初始质量被记录下来，后续提取的虾油质量也要被记录下来。丙酮和乙醇提取物的重量结合起来来确定两步提取的总提取效率。根据下列公式确定提取效率：提取效率=提取效率表示为每100g冷冻干燥的磷虾所提取出来的虾油的g数。2.3.测定虾油中的脂类物质薄层色谱法被用来解决用一步提取法，两步提取法，索氏提取法提取的虾油中的脂类物质的鉴别。对于两步提取法提取的虾油，薄层色谱法和随后的虾油密度分析也适用于丙酮和乙醇提取物的分析。将10ml的虾油溶解于体积比1:1的氯仿甲醇混合液中，然后平铺于薄层层析板上。薄层色谱一用体积比80:20:1.5的正己烷、乙醚、冰醋酸溶液为流动相，一旦完成，就将平板在空气中放干五分钟。平板上的图像用连接于电脑上的数码相机捕捉下来。用软件(version1.0,AlphaInnotechCorp., ,CA).Phospholipids(PL)分析图像，测定磷脂和甘油三酯中的RF值，与大豆卵磷脂(FisherScientic,NJ)和三油酸甘油酯(SigmaAldrich,St.Louis,MO)作比较。一旦确定，就把磷脂、甘油三酯和非极性的磷脂从平板上挂下来，溶于体积比1:1的氯仿甲醇溶液中，再用气象色谱测定其中的脂肪酸。该密度数据以平均值的数据（标准偏差）发表，虾油中的各种脂质以百分比的形式表示。2.4.提取的虾油中的脂肪酸含量磷脂和甘油三酯分别从薄层平板上挂下来。这些磷脂和甘油三酯的脂肪酸含量被测定。(Chen,Nguyen,Semmens,Beamer,&Jaczynski,2007,2008a,2008b;Folchetal.,1957;Taskaya,Chen,Beamer,Tou,&Jaczynski,2009)在无水甲醇中加入4ml的4g/100ml硫酸之后脂肪酸被析出，然后再90水浴中加热1小时。混合物转移到硫酸钠填充的巴斯德玻璃管中，在氮气环境下，用60的水浴干燥一小时。脂肪酸的总甲基值在过滤的异辛烷中重新悬浮。(HPLCgradeiso-octane,FisherScientic,Fairlawn,NJ,USA).总甲基值用气象色谱测定。(50mlength,0.25mminsidediameter;VarianAnalyticalInstruments,WalnutCreek,CA,USA).注射温和检测温度维持在220，柱温为190。固定相是CP-Silica88(Varian ,CA,USA)载气为氮气并使用10:1的分流比。脂肪酸与已知的标准和参考比较然后确定。(Ackman,1980)使用STAR气象色谱工作站来计算峰值区域并估计脂肪酸含量(. 该密度数据以平均值的数据（标准偏差）发表，虾油中的各种脂质以百分比的形式表示2.5 提取虾油中胆固醇含量的测定由于没有极性，胆固醇含量的测定不能使用薄层层析和密度分析的方法。对于两步提取法提取的虾油，乙醇和丙酮提取物的胆固醇含量需要分别测定。一步提取法，两步提取法和索氏提取法所提取的虾油中的胆固醇含量要用比色法测定. (EMDChemicalsIn,Germany)胆固醇的检测依赖于向胆固醇里加入胆固醇氧化酶和过氧化氢使胆固醇氧化，使用分光光度计来检测过氧化氢和胆固醇的相互作用。虾油样品在胆固醇缓冲溶液中制备。在一个96孔的微板里，50ul缓冲虾油样品和50ul缓冲液（包含胆固醇氧化酶和胆固醇探头）混合。样品盖住后在37度下保温一小时。吸光度在570nm处用Spectramax酶标仪读取。(Devices,CA).为了确定磷虾油中的胆固醇含量，要用标准胆固醇和缓冲液的混合液构造标准曲线。胆固醇含量的平均值至少有三个重复的平均值，并表示为每100g虾油样品中所包含的胆固醇克数。2.6提取的磷虾有的抗氧化能力据报道，磷虾油富含抗氧化剂，尤其是虾青素中。(Kolakowska, ,1994;Suzuki&Shibata 0;Touetal.,2007).这些抗氧化剂很有可能包含在非极性磷脂中。因此，用比色法抗氧化实验来测用不同方法提取的磷虾油的抗氧化能力。(CaymanChemicalCompany,AnnArbor,MI).对于两步提取法提取的虾油，要分别测定丙酮和乙醇提取物的抗氧化能力，这个抗氧化检测依赖于虾油中的内源性抗氧化剂。向磷虾油样品中加入试剂，然后使用分光光度计测定。磷虾油的内源性抗氧化剂的抗氧化能力与水溶性维生素E的抗氧化能力相比较。在96孔微板中，10ul磷虾油油样和150ul 2 ,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐及10ul的高铁肌红蛋白。为了启动反应，过氧化氢被添加到每个小孔内。样品盖好之放于一个振动筛上室温保存5分钟。吸光度在一个加酶标仪上的750nm处读出。(MolecularDevices,Sunnyvale,CA)为了确定磷虾油相当的磷虾油的量的标准曲线，10ul磷虾油油样和150ul 2 ,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐及10ul的高铁肌红蛋白被混合起来用来构建标准曲线。图2不同溶剂体系的虾油提取效率，数据条顶端的不同字母显示着显著差异图3 密度分析对丙酮和乙醇提取物的薄层板进行了分别分析，一个薄层板上显示磷虾中的油脂用质剂比1：:12的溶液萃取，脂质包括甘油三酯、磷脂、胆固醇等，数据条顶端的不同字母代表着显著差异。2.7.磷虾虾油提取之后的残余物质的工业分析要确定一般成分（即粗蛋白，总脂肪和灰分含量）对剩余的磷虾的水分含量进行了分析。一份2g的样品被放在铝盘里(FisherScientic,Fairlawn,NJ,USA)(AOAC,1995).对一步和两步提取法提取后剩余的物质进行了粗蛋白，总脂肪和灰分的测定。（即图1中的沉积物）粗蛋白用凯氏定氮法测定(AOAC,1995)灰分测定在一个550的焚化炉里焚化24小时(AOAC,1995残余的脂肪含量根据索氏提取法测定。(AOAC,1995) 数据的平均值至少有三个重复的平均值，并表示为每100g虾油样品中所包含的克数。（干重）2.8统计分析虾油提取要做三次重复试验，对于三次试验的每一次，都要用三种测定方法。单项方差的独立分析措施被用来在学生实验中确定除了甘油三酯和磷脂之间的脂肪酸差异外的其他个体差异。事后分析使用具有显著现象的杜克实验。方差分析使用KYPlot软件。(KyensLab,Tokyo,Japan).3.结果与讨论3.1提取效率两步提取法提取虾油的效率和溶质溶剂比1：:6的磷虾的一步提取法相似。当溶质溶剂比为1：:12和1:30时虾油的提取效率最高。溶质溶剂比为1:12和1:30时，虾油的提取效率没有显著区别。溶质溶剂比是磷虾提取过程中的一个关键参数。有可能的是，如果两步提取法中的溶质溶液比增加虾油的提取效率也会随之变高。然而，一步提取法比两步提取法简单推荐使用体积比为一比一的丙酮乙醇混合液和1:12溶质溶剂比的一步提取法。3.2提取的磷虾油中的油脂种类提取的磷虾油主要使用薄层色谱法进行油脂的分离，用密度和提取的虾油中的各种油脂的水分含量进行量化（图3）。提取过程并不影响提取的虾油中的甘油三酯的含量，甘油三酯的含量在1.03.2%浮动（图3）。然而，提取过程会影响提取虾油中的磷脂的含量，在索氏，傅氏和溶质溶剂比1:6的一步提取法得到的虾油中的磷脂含量最高。磷脂的含量在20.432.7%浮动（图3）虾油中含有大量的磷脂已经被提到过，大约占虾油中油脂总量的40。(Bottino,1975).高磷脂含量使磷虾油与其他膳食油脂相比有了独特价值。鱼油中的甘油三酯含量约为60。(Touetal.,2007)磷虾虾油中的主要油脂种类是非极性油脂。(60%).这些主要包括胆固醇，单甘油酯和双甘油酯，红色色素主要包括虾青素等。非极性油脂与红色素的联系会使每个单独种类的薄层层析变得困难。因此，这些作为非极性油脂被合在一起。与一步提取法相比，溶质溶剂比大于1:6并且丙酮含量分数最高的两步提取法所提取的虾油有着最高的极性非磷脂物质的含量。极性非磷脂的不同之处在于它有商业价值，因为有一个过程可以降低胆固醇含量，但是一个较高的抗氧化值有助于提供最健康的油。因此，对胆固醇含量和总抗氧能力进行了测定（见章节3.4和3.5）图4 主要脂肪酸包括以1:12的溶质溶剂比的一步提取法提取的虾油中的磷脂和甘油三酯。磷脂、甘油三酯和极性非磷脂用薄层层析法测定（图3）。极性非磷脂显示没有检出脂肪酸。这些抗氧化剂包括虾青素、n3w-3脂肪酸，n6 w-6脂肪酸，等不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸。数据条顶端的不同字母显示了脂肪酸主要成分的显著的差异。3.3提取的磷虾油中的脂肪酸磷脂是虾油中含有的主要油脂类型（磷脂2033%vs甘油三酯13%）图3.只有磷脂和甘油三酯中检测到足量的脂肪酸。预实验是为了确定不同提取方法对脂肪酸含量的影响。出去提取方法外脂肪酸的含量没有什么不同。（数据未显示）因此，目前所使用的研究方法不会影响脂肪酸的含量测定。此外，图2显示当溶质溶剂比为1：:12和1:30时虾油的提取效率最高。溶质溶剂比为1:12和1:30时，虾油的提取效率没有显著区别。因此，只有使用1:12的溶质溶剂比的一步提取法提取到的磷脂和甘油三酯中的脂肪酸含量才被报道。（图4） 薄层分析之后，把磷脂和甘油三酯从薄层层析板上挂下来，然后用气相色谱法把脂肪酸甲基化。（图4）磷脂中饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的比值比甘油三酯中的低。（图4A）不饱和脂肪酸含量较高的油被认为更健康。EPA和DHA在磷脂中占很高地位，因此磷脂中的不饱和脂肪酸含量比甘油三酯中的高的多。EPA和DHA这两种具有生物活性的n-3多不饱和脂肪酸可以降低心血管疾病的风险。甘油三酯比磷脂有更高的棕榈油酸和亚油酸含量。（图4） 磷脂和甘油三酯需要不同的消化酶，因此有可能存在生物利用度的差异并导致n-3不饱和脂肪酸的堆积，反过来，这可能会导致对生理和健康的不同影响。( Amate,Gil,&Ramirez,2001,2002;Mat-thewsetal.,2002).因此，磷虾油中磷脂EPA和DHA的酯化可能对人类健康产生巨大影响。因此，先前已经之处磷脂中的EPA和DHA的酯化是引人入胜的。(Saetheretal.,1986).然而，现有的比较吸收磷虾虾油中的w-3不饱和脂肪酸的好处与其他来源的油脂的区别的数据很稀缺。因此，需需要进一步研究来比较和了解磷虾虾油和其他来源的n-3不饱和脂肪酸的营养价值和对健康的影响。3.4.提取的磷虾虾油中的胆固醇含量一步提取法提取的虾油中的磷脂含量很高导致胆固醇含量也最高（图5A）一步提取法中溶质溶液比为1:9时通常有最低的胆固醇含量。两步提取法，索氏提取法，福氏提取法中的胆固醇含量与极性非磷脂的含量相似（图3）这表明在这些过程中胆固醇含量占极性非磷脂含量比一步提取法中的更多。一般来说，磷虾胆固醇含量比虾低，比鱼略高。(Touetal.,2007)作用于高血脂患者时，磷虾油是血清胆固醇含量减少18，相比之下，鱼油只能减少6。(Buneaetal.,2004).海产品油脂的降血脂原理并没有被完全了解，但是显然与其中的n-3不饱和脂肪酸有关。因为磷虾油中的磷脂含有丰富的n-3不饱和脂肪酸，并含有低胆固醇，所以磷虾油可以作为降血脂药物的添加剂。3.5提取的磷虾油的抗氧化能力 磷虾虾油的红色是由于一种类胡萝卜素虾青素，一种很强的抗氧化剂。每100g冰冻磷虾含有3-4mg这种类胡萝卜素。虾青素占总的类胡萝卜素的80还要多。(Yamaguchietal.,1983).通过测定本实验提取出来的虾油的总抗氧能力，虾青素的抗氧化能力被估算出来。体外研究表明，与维生素E相比，虾青素能更大程度的降低细胞膜的损伤，抗氧化剂常用于食品生产中。(Kurashige,Okimasu,Inoue,&Utsumi,1990).使用溶质溶液比为1:9和1:30的一步提取法提取出的虾油和两步提取法提取出的乙醇提取物具有最大的抗氧化能力。（图5B）一步提取法所提取的虾油的抗氧化能力和它们各自对应的极性非磷脂相似（图3）这表明虾青素是这些极性非磷脂的主要成分。尽管有最高含量的极性非磷脂成分，两步提取法的丙酮提取物却有着最低的抗氧化能力。因此，这些丙酮提取物中的极性非磷脂物质很可能是胆固醇，福氏法所提取的虾油同样有着很低的抗氧化能力。图5 使用不同溶剂体系从冷冻干燥的完整磷虾中提取的虾油的胆固醇含量（A图）和抗氧化能力（B图）数据条顶端的不同字母显示着主要成分的显著差异。3.6虾油提取之后磷虾中的近似成分 虾油提取之后，剩余的磷虾用离心的方法从溶液中提取出来。这些剩余的磷虾的沉积物被收集起来。（图1）表1表明，这些沉积物主要由蛋白质（74/100 干重）组成。残余磷虾中的蛋白质含量并不受提取过程的影响。当溶质溶剂比从1:9上升到1:30时，残余磷虾中的脂质含量降低。两步提取法和溶质溶剂比为1:12和1:30的一步提取法会导致残余磷虾中的脂质含量最低。残余磷虾的灰分与提取之前的整个磷虾的灰分相比较。（灰分17.4g每100g，干重Chenetal.,2009).如果剩余磷虾中的蛋白质要提供给人类和动物消费的话，里面过高的氟含量可能需要减少。直接数据清晰的表明，残余磷虾中的蛋白质含量很高，尽管灰分和氟的含量也可能很高。这些蛋白质可以用等电点増溶法和沉淀法提取出来。它已经表明，可以用热定型凝胶从完整的磷虾和其他水生资源中提取蛋白质。(Chen&Jaczynski,2007a;Taskaya,Chen,Beamer,andJaczynski,2009;Taskaya,Chen,&Jaczynski,2009).ISP的应用也可以在回收蛋白质的过程中显著降低氟和灰分的含量。(Chen,Tou,&Jaczynski,2007;Chenetal.,2009)因此，可以通过提取虾油使作为人类食物的磷虾得到更充分的利用，现在的研究表明，景Isp回复的蛋白质可以用来生产人类食物。4结论 根据目前的研究，用丙酮乙醇体积比1:1，溶质溶剂比为1:12的一步提取法从冷冻干燥磷虾中提取虾油，提取效率最高。磷脂是提取得到的虾油中的主要脂类，主要含有omega-3脂肪酸。和甘油三酯相比，磷脂含有更多的总n-3脂肪酸，不饱和脂肪酸，EPA和DHA，含有更少的饱和脂肪酸，和相似含量的n-6脂肪酸。用溶质溶液比为1:12的一步提取法从冷冻干燥的磷虾中提取的虾油有着较低的胆固醇含量和较高的抗氧化能力，与其他步骤相比。提取虾油之后剩余的磷虾可以用等电点増溶法和沉降商法回收。这种方法还可以减少回收的蛋白质中灰分和氟的含量。参考文献Ackman,R.G.(1980).Fishlipids,part1.InJ.J.Connell(Ed.), 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