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氨基酸螯合铁的制备及分析一、 实验原理：通过氨基酸与硫酸亚铁在一定的比例、温度、PH的条件下制备氨基酸螯合铁，并对合成物利用分光光度法测定螯合率。二、 实验药品：复合氨基酸、七水合硫酸亚铁、乙酸钠、邻二氮菲、盐酸羟胺、无水乙醇、氢氧化钠、D-异抗坏血酸钠三、 实验步骤1.1氨基酸螯合铁的制备1. 称取5.00g氨基酸放于锥形瓶内，加入约0.667g的D-异抗坏血酸钠作为抗氧化剂，并加入1.26g（0.00828947mol）的硫酸亚铁，加入6.67ml蒸馏水溶解并用保鲜膜封紧瓶口反应10min左右。2. .氨基酸螯合铁的螯合率测定2.1铁标准曲线的绘制以0.1242g七水合硫酸亚铁（分析纯0.000446762mol）配置0.1000mg/mL的Fe标准溶液，从中用移液管取10.00mL溶液移至100mL容量瓶中，再加入2.00mL2mol/LHCl，用水稀释至刻度，得到10g/mL的Fe标准溶液。在5个50mL容量瓶中分别加入0.00mL，2.00mL，4.00mL，6.00mL，8.00mL浓度为10g/mL的Fe标准溶液，再分别加入1.00mL盐酸羟胺（10%），2.00mL邻二氮菲（0.15%），5mL乙酸钠溶液（1mol/L），每加一种试剂后摇匀。最后用溶剂（蒸馏水和乙醇按一定比例（9:1？）配置）稀释至刻度，摇匀，放置10min。以空白试剂（未加铁的溶液）为参比，在510nm的波长下，测量各溶液的吸光度，以铁量为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制标准曲线如下：线性方程为A=0.0044+0.213c（2）测定游离铁离子的吸光度用移液管取10mL步骤一中的滤液，加入90mL无水乙醇，于超声仪中超声萃取15min，然后离心分离，取清液转移至250mL容量瓶中，定容摇匀。分别从中取10mL加入两个50mL容量瓶中，编号1,2,1中加入1.00mL盐酸羟胺（10%），2.00mL邻二氮菲（0.15%），5mL乙酸钠溶液（1mol/L）；2中加入1.00mL盐酸羟胺（10%），5mL乙酸钠溶液（1mol/L），作为空白对照，设定吸光度为510nm，测定溶液吸光度。（3）计算螯合率由线性方程及吸光度可计算得稀释后的溶液浓度c1=（A-0.0044）/0.213然后可计算出稀释前反应后溶液浓度c2= c1125然后计算出反应后溶液中游离铁离子质量m1= c2V又反应体系中铁离子总量m2=（铁的摩尔质量/七水合硫酸亚铁的摩尔质
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