优化方案高考生物大一轮复习_第十二单元 生物技术实践 第43讲 微生物的培养与应用课件

第43讲微生物的培养与应用 第十二单元生物技术实践 考纲点击 1 微生物的分离和培养2 培养基对微生物的选择作用3 利用微生物进行发酵来生产特定的产物 第十二单元生物技术实践 一 微生物的实验室培养1 培养基 1 概念 人们按照微生物对 的不同需求 配制出供其 的营养基质 2 营养构成 一般都含有水 氮源和无机盐 此外还要满足微生物生长对pH 特殊营养物质以及 的要求 3 种类 按照物理性质可分为 培养基 半固体培养基和 培养基 营养物质 生长繁殖 碳源 氧气 液体 固体 煮沸消毒法 紫外线消毒法 灼烧灭菌 高压蒸汽灭菌 3 大肠杆菌的纯化培养 1 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基配制步骤 计算 溶化 倒平板 2 纯化大肠杆菌 纯化大肠杆菌 其关键的步骤是 纯化培养方法 法和 法 纯化培养原理 在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的 即可获得较纯的菌种 称量 灭菌 接种 平板划线 稀释涂布平板 菌落 二 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数1 分离原理 土壤中细菌之所以能分解尿素 是由于它们能合成 这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起 作用 以尿素为唯一氮源的培养基能促进分解尿素的细菌的生长和繁殖 并抑制或阻止其他微生物的生长 从而将目的菌分离 2 统计菌落数目 统计样品中的活菌一般用 法 3 实验流程 土壤取样 制备 微生物的培养与观察 细菌的计数 脲酶 催化 稀释涂布平板 培养基 三 分解纤维素的微生物的分离1 纤维素酶 1 组成 纤维素酶是一种复合酶 它包括C1酶 CX酶和葡萄糖苷酶 2 作用 2 菌种筛选 1 方法 刚果红染色法 纤维素 纤维素酶 1 2016 北京海淀区期末 培养基中一般都含有水 碳源 氮源和无机盐四种成分 2 将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离分解尿素的细菌 是否无菌操作影响较小 3 培养基分装到培养皿后进行灭菌 4 从有机废水中分离微生物用于废水处理时 接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 5 外植体消毒的原则是既杀死材料表面的微生物 又减少消毒剂对细胞的伤害 6 2015 高考四川卷T3D 用稀释涂布平板法培养计数 应选择有30 300菌落数的平板 7 2016 山东青岛市期末 筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中 尿素是唯一的氮源 8 分解尿素的细菌在分解尿素时 可以将尿素转化为氨 使得培养基的酸碱度降低 9 土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的 选择培养 是必不可少的 10 在富含纤维素的培养基中加入刚果红染色剂 若出现周围存在透明圈的菌落 则说明筛选到了分解纤维素的微生物 考点一培养基及微生物的纯化培养技术 不加凝固剂 工业生产 加凝固剂 如琼脂 微生物分离 鉴定 活菌计数 菌种保藏 观察微生物的运动 分类 鉴定 培养基中加入某些化学物质 依据某些微生物对某些物质的特殊需求或抗性而设计 从众多微生物中分离所需的微生物 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 培养基中加入某种指示剂或化学药品 产生特定的颜色或其他变化 鉴别不同种类的微生物 用伊红 美蓝培养基鉴别大肠杆菌 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物 煮沸消毒法 日常用品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手 用氯气消毒水源 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物 包括芽孢和孢子 灼烧灭菌法 接种工具 干热灭菌法 玻璃器皿 金属工具 高压蒸汽灭菌法 培养基及容器 接种环在固体平板培养基表面连续划线 一系列的梯度稀释 涂布平板法操作 每次划线前后均需灼烧接种环 稀释度要足够高 为确保实验成功可以增加稀释度 在具有显著的菌落特征的菌落中挑取菌体 从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体 可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落 既可以获得单细胞菌落 又能对微生物计数 不能对微生物计数 操作复杂 需要涂布多个平板 检测培养基平板灭菌是否合格 灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 B 溶解氧 营养物质 固氮 自养 异养 解析 1 为了检测培养基平板灭菌是否合格 可在涂布接种前 随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间 2 接种环 接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 以达到迅速彻底灭菌的目的 在第二次及以后的划线时 总是从上一次划线的末端开始划线 其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 3 比较A和B可以看出 A培养基中细菌的分布呈线性 是用平板划线法接种培养后得到的结果 B培养基中细菌均匀分布 是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果 4 振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量 还可以使菌体与培养液充分接触 提高了营养物质的利用率 因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快 5 从表格中可看出 培养基中无氮源 中无碳源 中为完全培养基 由此可知能在 中生存的甲只能是固氮微生物 能在 中生存的乙是自养微生物 丙只在 中存活 为异养微生物 考点二微生物的计数方法 当样品的稀释度足够高时 培养基表面生长的一个菌落 来源于样品稀释液中的一个活菌 通过统计平板上的菌落数 就能推测出样品中大约含有多少活菌 利用特定细菌计数板或血细胞计数板 在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 每克样品中的菌落数 C V MC 某稀释度下平板上生长的平均菌落数 V 涂布平板时所用的稀释液的体积 mL M 稀释倍数 每毫升原液所含细菌数 每小格平均细菌数 400 104 稀释倍数 当两个或多个菌体连在一起时 平板上观察到的只是一个菌落 不能区分细胞死活 比实际值偏小 比实际值偏大 排除非测试因素对实验结果的影响 排除偶然因素对实验结果的影响 空白对照 确定培养基制作是否合格 同一稀释度涂布至少3个平板 70 75 煮30分钟 或80 煮15分钟 牛奶的营养成分不被破坏 B 3 4 106 偏小 个别菌落可能是由2个或多个细菌形成的 伊红 美蓝 金属光泽的紫 黑色 考点三微生物的筛选与鉴别 利用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行选择培养 利用富含纤维素的选择培养基进行选择培养 只有分解尿素的细菌能够合成脲酶 才能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长 因为培养基中含有丰富的纤维素 因此能够分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而