家禽肾损伤是由多种原因引起肾脏机能障碍的总称.doc

家禽肾损伤是由多种原因引起肾脏机能障碍的总称，由于本病发病原因复杂，目前主要采取标本兼治的方法，在对因治疗的同时，还应使用对症治疗家禽肾损伤的药物，此类药物作用以利尿和抑制血尿酸为主，如呋塞米、丙磺舒等。然而，由于此类药物存在毒副作用大、药物残留等问题，因此开发具有类似功能的无毒无残留中药复方迫在眉睫。为此，保定冀中药业有限公司充分发挥自身在中兽药研制方面的独特优势，致力于研制开发治疗家禽肾肿、肾损伤的中药制剂，现已成功研制出适合标准化、规模化养殖需求的中药复方制剂苍蓝口服液。此制剂于2011年9月29日被农业部批准为国家三类新兽药，证书号为：（2011）新兽药证字46号。一、组方及用途本品为棕褐色液体，味微苦。苍蓝口服液是由苍术、板蓝根、柴胡、黄柏四味组成。选苍术为君药，用以燥湿健脾，加强运化水湿，减少水液在肾的滞留，缓解肾脏肿胀；选板蓝根为臣药，泻心火以缓解心阳对肾阴的炽灼之力，促进肾阴与肾阳的平衡，快速恢复“肾主水、分清泌浊”的功能，加速结石的溶解与排出；选柴胡为佐药，配合君药苍术泻肝火以纠正肝木疏泄偏胜之弊，使脾运趋于正常，减少腹泻的发生；选黄柏为使药，引领众药入肾兼能泻相火、除湿热、养肾阴，大大促进“肾主水、分清泌浊”之功能的恢复。苍蓝口服液具有清热燥湿、利水养阴之功效，可用于治疗肾肿胀、肾损伤。二、对肾肿肾损伤的治疗试验（一）材料苍蓝口服液（批号1007001、1007002、1007003）由保定冀中药业有限公司生产。AA+肉雏鸡750羽，购自保定市浔源禽业有限责任公司。消肿解毒散、复方新诺明购于某兽药市场。（二）方法肾损伤模型的建立 12日龄实验用鸡630只，按2.0克/千克饲料拌料添加复方新诺明，连续使用至第7天时，全群鸡只表现为精神沉郁、采食量下降。截止第7天24：00共计死亡8只，死亡和精神极度沉郁的鸡只解剖发现肾脏肿大、苍白，部分呈花斑肾样，肾脏切片观察显示肾小管上皮细胞坏死，管壁增厚，坏死的细胞阻塞肾小管腔。剔除死亡和精神极度沉郁的鸡只后，随机挑选600只鸡用于后续试验。实验分组及给药 将复方新诺明造模成功的600只鸡随机分为5个处理组（包括、组），每组设4个重复，每个重复30只鸡。组为药物对照组，日粮中拌料添加消肿解毒散3克/千克饲料；、依次为苍蓝口服液低、中、高剂量（剂量依次为：1毫升/升、2毫升/升、4毫升/升）组，采用饮水给药，全天分两次集中饮完；组为阴性对照组，不添加药物。造模成功5日后的第二天（即26日龄）开始给药，连续用药5天。另外，组为阴性对照组，120只鸡，不做任何处理。试验期从25日龄起考察至35日龄止，共11天。（三）测试指标与方法鸡群整体状况的观察记录 试验期间（2535日龄）逐日观察、记录鸡群精神状况、采食量及粪便情况。肾脏器官指数和病理组织学变化 剖检并分离肾脏，观察肾组织的肉眼变化后，剔除脂肪，称重并计算肾脏指数。肾脏指数的计算方法为：肾脏指数=肾脏净重（克）/体重（千克）。采用常规石蜡切片法研究肾脏的病理学变化。取肾脏样品置于Bouin液常温固定24小时，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，切片6微米，制作病理切片，HE染色后显微镜观察。数据统计分析 试验数据采用SPSS软件包进行统计分析，用Duncan法进行均值多重比较。（四）结果鸡群整体状况的观察结果 25日龄时，组实验鸡表现采食量减少、精神沉郁、拉水样稀便，有部分鸡只出现石灰样便。经过5日的治疗试验后（30日龄时），“苍蓝口服液”中高剂量组鸡群精神状态有了明显改善，水样稀便减少；低剂量组和药物对照组鸡群精神状态也有所改善，水样稀便现象仍然严重。至35日龄时，中高剂量组精神状态完全恢复，粪便也基本正常；低剂量组和药物对照组精神状态基本恢复，但粪便恢复较差。在进行治疗试验前（25日龄时），组供试鸡群各组肾脏指数数值相近（P0.05），而与空白对照组比较具有显著性差异（P0.05），说明造模成功。并且未使用药物对肾肿肾损伤进行治疗处理的阴性对照组于30、35日龄的肾脏指数，较25日龄各组肾脏指数也表现无显著性差异（P0.05），说明阴性对照成立。通过5天的治疗试验处理后（30日龄时），药物对照组（消肿解毒散组）肾脏指数较25日龄时显著降低（P0.05）；35日龄时较30日龄有所降低，但差异不显著。表明对照药物对肾肿肾损伤的AA+肉鸡有一定的治疗作用。使用低剂量的“苍蓝口服液”，30日龄的肾脏指数较25日龄有所降低，但差异不显著，30日龄与35日龄时也表现为差异不显著，但35日龄时较25日龄时差异显著（P0.05）。而使用中高剂量“苍蓝口服液”后，于30和35日龄时，肾脏指数较用药前显著降低（P0.05）。35日龄较30日龄有所降低，但差异都不显著。说明，相应日龄时，高剂量组较中剂量组有所降低，但也表现为差异不显著。在35日龄时，中高剂量组肾脏指数与空白对照组比较，无显著性差异（P0.05），而药物对照组和低剂量组与空白对照组比较差异显著（P0.05）。因此，试验表明，饮水添加一定剂量的“苍蓝口服液”可显著降低肾肿肾损伤的AA+肉鸡的肾脏指数，消除或缓解肾肿肾损伤。其中，中高剂量组疗效相似，优于低剂量组和药物对照组，肾脏指数测定结果与肾脏外观形态剖检结果相一致。苍蓝口服液对AA+肉鸡肾脏组织形态学变化的影响取肾脏样品制作病理切片，采用HE染色法观察病理学变化。结果空白对照组（未使用复方新诺明造模）肾小球结构正常，肾小球囊腔明显，肾小囊壁层和脏层细胞结构清楚，细胞界限较清晰。通过复方新诺明造模试验后的鸡肾组织严重受损，大多数肾小体管球肿胀，肾小球囊腔扩大，部分肾小体因为肿胀破裂而严重破损，呈现缩小、萎缩状，有的肾小体内可见淋巴细胞浸润。从肾肿/肾损伤鸡只的治疗试验发现，使用中剂量的苍蓝口服液5天后，肾脏组织肿胀、损伤得到了不同程度的改善，组织切片可见萎缩的肾小体减少，肾小管结构趋于整齐排列，细胞结构和界限趋于清晰，核破裂、溶解数量减少，仅有少量肾小管细胞仍有损伤。（五）结论本试验选取肾肿、肾损伤的AA+肉鸡，以肾肿解毒散为药物对照，使用不同剂量的苍蓝口服液进行治疗试验。结果表明，中高剂量苍蓝口服液可有效改善肉鸡精神状况，缓解腹泻、肾肿和花斑肾症状，降低肾脏指数，其效果优于药物对照组和低剂量组。此外，由于中剂量组和高剂量组之间效果相近，故以中剂量作为推荐剂量。根据试验结果，考虑生产实际，建议每升饮水添加2.0毫升苍蓝口服液用于鸡肾肿肾损伤的治疗。三、临床用药案例（一）案例1河北省秦皇岛市某养殖场饲养5000只AA肉鸡，12日龄发病，出现白色水样稀便，解剖死鸡症状有肾脏花斑样肿胀，输尿管有尿酸盐，患病鸡群采食量下降，羽毛松乱，鸡爪发绀，14日龄当天死亡89只鸡。从15日龄开始使用苍蓝口服液（200千克水/瓶），全天饮水量集中下午一次饮水使用，连用4天。用药后1619日龄，鸡群死亡数分别为：87只、72只、64只、13只，用药第三天，鸡群采食量明显上升，白色水样便明显减少，第20日龄粪便基本成型，只有少数白色稀便，全群状态良好。（二）案例2天津市静海某养殖场20000只AA肉鸡，16日龄开始至22日龄，连续使用硫酸新霉素治