以鲢鱼头骨研制复合口含片的工艺.doc

以鲢鱼头骨研制复合口含片的工艺王安瑜（天津农学院 食品科学系）1 引言鲢鱼作为“四大家鱼”之一，由于其骨骼所占比重较大，骨刺细小，且这部分常被废弃或加工成附加值很低的产品，而成为影响其加工利用率的重要原因之一1。如何利用约占鱼体比重40%的鱼头、鱼骨、鱼鳍等部位是一个亟待解决的问题。 鱼类加工过程中，固体废物占5080。这些废物是很好的高蛋白食品的制作原料。淡水鱼中含有大量的蛋白质、氨基酸、微量元素和维生素等，综合利用鱼加工过程中产生的废弃物，制成营养价值高的饲料添加剂，降低主导产品成本，提高水产品的附加值。为提高淡水鱼营养成分的利用率，需除去淡水鱼本身和加工过程产生的腥味、苦味物质，通过大量实验，应用复合生物酶处理、超微粉碎、喷雾干燥等技术解决淡水鱼综合加工系列产品的品质问题2。随着科技的发展和人们生活水平的提高，未来淡水产品的加工将朝着方便、模拟、保健、美容、鲜活发展。方便：先用低值水产品加工成鱼浆，再用鱼浆生产出各式各样的鱼糕、鱼卷、鱼饼、鱼丸、鱼排、鱼片、鱼香肠等产品，既富营养又耐贮存便于携带。模拟：用鱼浆制成色、香、味、形近似蟹、虾、贝、鱼翅、鱼子等风味似真，有一定营养价值、胆固醇含量低、价格便宜的模拟食品。保健：以水产品为原料，按照一定的配方，配以药物，用水产之味，取药物之性，经特殊加工制成各种保健食品。美容：鱼子是国际上引人瞩目的健美食品，十分畅销。它不但味道鲜美，而且营养丰富，含有大量蛋白质和钙、磷、铁及卵磷脂等物质。 鲜活：经过科学加工保持鲜活。有关水产加工专家指出，对淡水鱼除提倡就地、就近活销、鲜销外，可开发冻品加工或分割制成冷冻包装。科学研究表明，淡水鱼中也富含EPA和DHA两种不饱和脂肪酸。鲜活分割后制成的小包装因贮存时长、食用方便而受到欢迎；传统的加工产品，冷冻、腌制、咸、淡干品将受到冷淡3。补钙已受到社会的日益关注, 因而研究一种易被人体吸收的口含片是非常必要的。随着社会经济的快速发展，人民生活水平的不断提高，对健康的关注日趋重视，人们对食品的需求趋向也越来越丰富，钙是人体所必需微量元素，对人体健康起着不可或缺的作用。市场上的钙片多以牛初乳、牡蛎等为原料，成本较高。而淡水鱼中鱼头、鱼骨富含钙，鱼骨经过高温蒸煮、真空干燥、超微粉碎或微粉碎、干法压片等一系列的加工，生产出的天然营养口含片产品，大大提高了鱼头骨钙在人体内的吸收率，还可减轻入口时的鱼腥味、方便携带、食用4。鱼的次生产品的经济附加值也可大大提高。我国淡水鱼资源产量为世界第一，其中鲢鱼几乎占了1/45。此种鱼具有易饲养、成长快、成本低、营养价值高等特点，但其工业化加工的比例甚底，这极大阻碍了鲢鱼养殖业的发展。充分开发鲢鱼资源，变废为宝，具有很大的经济效益和社会效益。本文对鲢鱼头骨加以利用，采用干粉制粒，研制出一种口味纯正且方便食用的休闲复合口含片。2 实验材料与方法2.1 实验材料材料：白鲢鱼头（他人加工所剩鱼头，冷冻）。辅料：安琪酵母、醋酸、NaCl、Na2SO3、蔗糖、葡萄糖、蛋白糖、柠檬酸、-环糊精、硬脂酸镁、乙醇、豆粉、香橙粉、绿茶粉2.2 实验仪器与设备LDZX-30FB立式电热压力蒸汽灭菌器，上海申安医疗器械厂；DGX-90T3B-2型电热恒温鼓风干燥箱，上海福玛试验设备有限公司；ACS-A型电子计价秤，上海友声衡器有限公司；AF-20A密封型摇摆式中药粉碎机，泾赣事奥力中药机械有限公司；JJ-2组织捣碎匀浆机，天津市华北实验仪器有限公司；FA1104A电子天平,上海精天电子仪器有限公司；TDP-5T单冲压片机，江阴市康和机械制造有限公司。2.3 实验方法2.3.1 工艺流程鱼头解冻清洗脱腥高温高压蒸煮取出骨二次脱腥干燥填充剂、酸味剂、甜味剂等 粉碎过筛调配混合制软料制粒干燥压片杀菌包装成品。 乙醇 硬脂酸镁2.3.2 操作要点 2.3.2.1 原料选择与处理鲢鱼头骨粉的制备：将冷冻鲢鱼头置于室温下解冻，清洗干净，进行脱腥处理。然后放入高压灭菌锅中于120、0.1MPa处理1h，至鱼骨能用手捏碎为宜。取鲢鱼头骨，冷却至室温，放入酵母水中二次浸泡脱腥，之后进行干燥，干燥温度为120oC，时间3h。将干燥好的鲢鱼头骨放入粉碎机中粉碎，过80目筛，得到鲢鱼头骨粉。2.3.2.2 填充剂的制备选用的填充剂为蔗糖、葡萄糖，放入粉碎机中粉碎，过80目筛备用。2.3.2.3 调配向鲢鱼头骨粉中添加填充剂、酸味剂、甜味剂和-环糊精等辅料，上述配料均符合食品卫生标准。2.3.2.4 制软料将鲢鱼头骨粉与上述辅料混合均匀，慢慢加入润湿剂乙醇，同时迅速不断的搅拌，制成软硬适中的软料。2.3.2.5 制粒用40目筛作为制粒的工具。把软料压过筛网，将筛过的配料收集好，装入瓶。2.3.2.6 干燥将筛过的料放入温度为60oC干燥箱中干燥3h，注意在干燥过程中要每隔30mim中翻拌一次，防止底部结块或干燥不均匀。一般干粒水分含量为3.04.56。 2.3.2.7 压片将硬脂酸镁作为润滑剂混入干燥好的配料中充分混合均匀，用压片机直接干粉压片7。2.3.2.8 杀菌与包装将做好的口含片放入紫外灯下照射30min，在无菌条件下包装8。2.4 试验设计2.4.1 脱腥实验鲢鱼的腥味较重，若不经脱腥处理会严重影响产品的风味，故研究采用以下4种方法脱腥。2.4.1.1 微生物转化法本实验采用1%安琪酵母在35oC浸泡鱼头1h然后用高压灭菌锅蒸煮，取鱼骨，将其再浸泡入1%安琪酵母中使其充分脱腥9。2.4.1.2 遮掩法称取10g茶叶，加入1.5Kg100 oC水冲泡10min，滤掉茶叶，把鱼头浸泡在茶水中，然后放入高压灭菌锅蒸煮中，120oC，时间60min，取鱼骨，将其再次浸泡到茶水中30min使其充分去腥。2.4.1.3 酸碱处理法将0.05%的Na2SO3、0.1%NaCl和0.05%醋酸混合液浸泡鱼头骨60min脱腥脱臭2。2.4.1.4 分子包埋法固定其他配方不变，向配料中添加-环糊精混匀9。2.4.2 产品配方实验实验选取鲢鱼头骨粉、蔗糖、蛋白糖、柠檬酸、乙醇、硬脂酸镁等改变其配方比例做单因素实验。2.4.3 干燥温度实验确定鲢鱼头骨粉、蔗糖、甜味剂、酸味剂、润湿剂、润滑剂等各种含量的配方后，分别采用60oC、70oC、80oC三个温度对产品进行干燥温度的单因素实验。2.4.4 产品正交试验在单因素试验的基础上，选出了对产品质量有明显影响的鲢鱼头骨粉、蔗糖、 甜味剂及柠檬酸四因素，设计L9(34)正交试验，因素水平表见表1 表1 正交试验因素水平表水平A鲢鱼头骨粉用量/%B蔗糖用量/%D蛋白糖用量/%C柠檬酸用量/%16.5351.52.527.5402338.5452.53.52.4.5 感官评分标准选取9人作为感官评分员，依据评分标准，分别从色泽、风味、口感、组织形态4个方面对产品进行感官评定，评分标准满分为100分。其中，色泽和组织状态分值各为20分，口感和风味分值各为30分。感官评定标准见表2。表2 感官评定项目及标准项目标准色泽20亮白15-20淡黄10-14深黄色10风味30鲢鱼特有香味25-30淡淡的鱼腥味20-24鱼腥味较重20口感30无颗粒感25-30稍有颗粒感20-24颗粒感明显20组织状态20饱满不易碎15-20较易碎1-16松散易碎143 结果与分析3.1 脱腥实验的结果与分析3.1.1 前处理对产品的影响将鱼头骨分别浸泡于安琪酵母、茶叶水、Na2SO3与NaCl和醋酸混合液中1h进行脱腥，实验结果见表3。表3 不同脱腥方法的比较（前处理）序号脱腥方法效果1微生物转化法显著2遮掩法不显著3酸碱处理法较显著由表3可知，三种脱腥方法中以微生物转化法的脱腥效果显著，可有效去除鲢鱼头骨的腥味。遮掩法和酸碱法脱腥效果逊色于微生物转化法。3.1.2 -环状糊精对产品的影响固定其它配方成分不变，向配料中添加不同比例的-环状糊精，实验结果见表4。表4 -环状糊精添加量脱腥效果的比较序号-环状糊精添加量效果10.1%脱腥效果不显著，腥味重20.15%脱腥效果较显著，腥味减小30.2%脱腥效果显著，腥味淡由表4可知，在配料中加入0.2%的-环状糊精，其脱腥效果明显，有效减弱鱼腥味。3.1.3 配料成分对产品的影响为了进一步改善产品的风味，分别向配料中添加香橙粉、豆粉、绿茶粉三种成分，添加量与骨粉等量，实验结果见表5。表5 不同配料脱腥效果的比较序号配料效果1香橙粉去腥效果较显著，产品色泽灰白2豆粉去腥效果十分显著，产品色泽亮白3绿茶粉去腥效果不显著，产品色泽深绿由表5可知，豆粉对改善产品风味和色泽的效果显著，同时可以达到去腥味的目的。在其他配方量固定不变的条件下，对豆粉与鲢鱼头骨粉的添加比例作单因素实验，结果见表6。表6 豆粉添加比例对脱腥效果的比较序号豆骨粉比例效果11:1豆粉味过重，产品色泽洁白21:1.5豆粉味与鲢鱼骨的味道和谐，产品色泽洁白光亮31:2鱼腥味过重，产品色泽灰白由表6可知，在豆骨粉比为1:1.5时，脱腥效果好，产品色泽佳。3.2 产品配方的结果与分析3.2.1 鲢鱼头骨粉添加量对产品质量的影响在产品基本配方不变的条件下，改变头骨粉的添加量，实验结果见表7。表7 鲢鱼头骨粉添加量的比较序号鲢鱼头骨粉添加量/%色泽风味口感组织状态总分15.0162424178127.51627271888310.01424241678由7表可知，当鲢鱼头骨粉添加量在7.5%时，鲢鱼头骨口含片的色泽和风味最好。当添加量达到10.0%时，其色泽和风味有所下降。由此可见，鲢鱼头骨粉添加量达到7.5%时较为合适。3.2.2 蔗糖添加量对产品质量的影响在产品基本配方不变的条件下，改变蔗糖的添加量，实验结果见表8。表8 蔗糖添加量的比较序号蔗糖添加量/%色泽风味口感组织状态总分130162424147824016272418853501621211472由表8可知，添加40%蔗糖制成的产品组织状态最好，散粒情况比较少，风味也是最好的。3.2.3 蛋白糖添加量对产品质量的影响在产品基本配方不变条件下，改变蛋白糖的添加量，实验结果见表9。表9 蛋白糖添加量的比较序号蛋白糖添加量/%色泽风味口感组织状态总分123123161616212721182724161616718677由表9可知，蛋白糖添加量为2%，风味和口感最佳。3.2.4 柠檬酸添加量对产品质量的影响在产品基本配方不变的条件下，改变柠檬酸的添加量，结果见表10。表10 柠檬酸添加量的比较序号柠檬酸添加量/%色泽风味口感组织状态总分121624241680231627241885341621241475由表10可知，当柠檬酸添加量为3%时，口含片的风味最佳。3.2.5 乙醇浓度对产品质量的影响在产品基本配方不变的条件下，改变乙醇浓度，结果见表11。表11 乙醇浓度的比较序号乙醇浓度/%色泽风味口感组织状态总分130162727188824016242414783501424241678由表11可知，乙醇浓度为30%，产品的粘合度最佳，易于干燥，不会出现结块和散粒现象。3.2.6 硬脂酸镁添加量对产品质量的影响在产品基本配方不变的条件下，改变硬脂酸镁的添加量，结果见表12。表12 硬脂酸镁添加量的比较序号硬脂酸镁添加量/%色泽风味口感组织状态总分11162424168021.51624211475321624241882由表12可知，硬脂酸镁主要对片剂的组织状态有影响，当硬脂酸镁添加量为2%时其组织状态是最佳的，片剂表面最光滑，易于脱模。3.3 干燥温度对产品质量的影响在制粒后，采用3种不同温度对配料进行干燥实验，结果见表13。表13 干燥温度的比较序号干燥温度效果160oC干燥效果好，无结块现象270oC干燥效果稍差，有小硬块380oC干燥效果差，有大的硬块由表13可知，当干燥温度为70oC或80oC时，有颗粒黏结成硬块的现象；而当干燥温度为60oC时，颗粒质量好，干燥时间3h，因而采用60oC的干燥温度较为恰当。3.4 正交实验的结果分析在单因素试验的基础上，以鲢鱼头骨粉、蔗糖、蛋白糖、柠檬酸用量为主要因素，设计L9(34)正交试验，实验结果见表14。14 正交实验结果实验号因素色泽/分风味/分口感/分组织状态/分总分/分ABCD11（6.5）1（35）1（1.5）1（2.5）1627121267212（40）2（2）2（3）1421211672313（45）3（2.5）3（3.5）141518146142（7.5）123182124167952231162427168362312162727168673（8.5）1321215151456832111424241678933231218151459K1200202231228T=213.7K2248233210214K3193206200199k166.767.37776k282.777.77071.3k364.368.766.766.3R18.410.43.39.7由表14可知，四个因素的水平变化对试验的影响主次顺序为ABDC，即影响口含片产品感官质量的最重要的因素为鲢鱼头骨粉，其次为蔗糖含量，再次为柠檬酸用量，然后是蛋白糖用量。按照各因素的最好水平选取试验最佳工艺为A2B2C1D1，即鲢鱼头骨粉、蔗糖、蛋白糖、柠檬酸的添加量分别为7.5%、40%、1.5%、和2.5%。4 讨论4.1 脱腥的效果微生物转化法是由于微生物的新陈代谢，小分子的腥味物质在微生物酶的作用下发生分子结构的修饰，转化成为无腥味的成分，从而达到脱腥的目的9。4.1.1 -环状糊精的效果-环状糊精是环状低聚葡萄糖，存在一个立体疏水空腔10，与腥味物质分子形成包合物，从而达到脱腥的目的。4.2 产品配方的效果4.2.1 骨粉的影响制备好的鲢鱼头骨粉颜色淡黄色，有淡淡的鲢鱼特有的风味、粉粒细致，是鲢鱼头骨口含片的主要成分。它赋予了口含片特有的风味和色泽，对口感和风味等的影响相对较大。随着骨粉添加量的增加颜色逐渐加深，鲢鱼头骨口含片的风味和色泽逐渐变差。因此，鲢鱼头骨粉添加量是决定口含片质量的关键因素。4.2.2 蔗糖的影响蔗糖作为可溶性片剂的优良填充剂，具有调味和黏合作用，可减少干粒的松散，能使片剂表面光洁，硬度增加8。故选择蔗糖作为口含片填充剂，蔗糖的添加量对口含片的组织形态、风味、口感都有影响， 其中对组织形态的影响较大，而对色泽无明显影响。4.2.3 蛋白糖的影响蛋白糖也称阿巴斯甜，它是一种新型氨基酸类高甜度甜味剂，是由 L-天冬氨酸和L-苯丙氨酸组成的二肽化合物，阿斯巴甜能增进含片的风味和口感，有效地降低能量，不会造成牙齿龋坏，且有与蛋白质相类似的代谢作用8。蛋白糖用量一定程度上决定了产品的风味和口感。4.2.4 柠檬酸的影响柠檬酸的添加量主要影响鲢鱼头骨口含片的风味，对色泽、口感几乎没有影响。由于配方中含较高的糖分，如蔗糖、蛋白糖等，容易使鲢鱼头骨口含片的甜酸味不协调，因而添加适量的柠檬酸，使糖酸比较合理，风味协调8。4.2.5 乙醇的影响润湿剂一般采用水、乙醇。由于混合料遇水后，易结成块，不易制成颗粒，压片产生花斑。故应采用乙醇为润湿剂，以克服制粒困难，并缩短受热干燥时间。由于采用乙醇作润湿剂，故应迅速搅拌，并立即制粒，迅速干燥，以免乙醇挥发而使软材结团，不易制粒或使已制得的颗粒变形结团11。4.2.6 硬脂酸镁的影响以硬脂酸镁作为润滑剂具有润滑性、抗粘附性等优点。 在压片前加入一定量的硬脂酸镁具有润滑作用，以增加颗粒的流动性，可以减少颗粒与冲模之间的摩擦力，以利于将片剂推出模孔, 使片剂的剂量准确，片面光滑美观11。4.3 干燥温度的影响干燥温度决定最后压片后成品的感官质量，干燥终点主要靠感官判断12，一般是手捏干粒，手感干脆、沉实而不黏手。 5 结论本实验以白鲢鱼头为原料，经过脱腥、高压蒸煮、干燥、磨粉、配料、压片等加工工艺制成口含片，口味独特，营养丰富。实验表明：在35下用1%的安琪酵母浸泡鱼头1h，之后放入高压蒸煮锅内，在120、0.1MPa下蒸煮60min，冷却后取头骨进行二次浸泡脱腥。将头骨置于60的干燥箱中恒温干燥3h。将干燥好的骨块粉碎成骨粉并过80目筛，加入蔗糖、柠檬酸、蛋白糖等各种辅料，加入0.2%的-环状糊精，豆粉与骨粉用量为1:1.5，制成的产品，在口味上更易被人所接收。压片前再添加2%的硬脂酸镁制成的口含片口感香醇，色泽亮白并带有鲢鱼特有的淡淡香味，适用于各类人群服用，是一种口感独特的休闲食品。参 考 文 献1 陈晶,熊善柏等.白鲢鱼骨蛋白酶水解工艺研究J.食品科学,2006（27）:327. 2 叶云花，涂宗财，刘成梅，徐剑兵. 淡水鱼的深加工与综合利用J.食品科技,29-30. 3 海石花. 未来水产品加工五大发展趋势.中国水产论坛,2008,11.4 英Joseph Wasswa，Jian Tang，Xiaohong Gu Utilization of Fish Processing By-Products in the Gelatin IndustryJFood Reviews international,V23 2007,8:159-174.5 李昀,刘漪.乳酸菌发酵淡水鱼骨泥制备高钙饼干的研究J.食品开发与机械，2008,7：98-100.6 李新玲,陆东林.活性牛初乳钙片的研制与生产J.中国乳业,2007,9：27-28.7 陈三宝 口腔速溶钙片的研制J.食品科学,2008,29,09：693-695.8 陈武,邹盛勤,伍晓春.绞股蓝口含片的制备技术J.食品与机械,2007,4：130-133.9 段振华，汪菊兰，王志国，易美华.水产品加工过程中的脱腥技术J渔业现代化，2005，5:48.10 叶盛权，吴晖，赖富饶等.牡蛎酶解过程的成分变化及脱腥初步研究J现代食品科技，2009,3:264-265.11 江伟强.麦胚钙片的研制J.食品工业科技,2006,21:51-53.12 冷桂华.泡腾钙片的研制J.食品工业,2008,3:47.致 谢 本论文是在我的导师刘铁玲副教授的亲切关怀和悉心指导下完成的。在这两个多月的时间里，因为有了刘老师的督促和指导，我的毕业论文才能够顺利完成，刘老师总是在百忙之中耐心的解决我们提出的问题，并与我们一起设计实验，提出宝贵的意见，在做实验的过程中随时沟通了解实验进度和进展，及时指出不足，所以在这里首先要感谢我的导师刘铁玲老师。同时还要衷心感谢实验室和食品车间的所有老师，正是有了这些老师的帮助和指导，使我解决了很多在实验中遇到的难题，谢谢老师们的支持和鼓励。另外，本论文的顺利完成，也离不开同学的关心和帮助。在论文即将完成之际，我的心情无法平静，从开始进入课题到论文的顺利完成，有多少可敬的师长、同学给了我无言的帮助，在这里请接受我诚挚的谢意！最后，再次对关心、帮助我的老师和同学表示衷心地感谢。附录1：外文文献原文附录2：外文文献译文黑线鳕鱼骨钙片的制备及生物效能摘 要探讨废物加工后的产品可能使用的黑线鳕鱼，得到了最近研究用氢氧化钠和乙醇粉浸泡制备黑线鳕鱼骨钙粉，加上适当的复合粉辅料来制备黑线鳕鱼骨钙片。黑线鳕鱼骨钙片的生物利用效果用一个老鼠的实验模型来研究。结果表明获得最佳参数是：氢氧化钠浓度1 mol / L时，浸泡时间30小时，乙醇浓度60，浸泡时间15小时，和2的聚乙烯吡咯烷酮混合，用1:2比例乙醇作为赋形剂，辅料为全脂奶粉，不使用崩解剂。在此工艺过程中得到了硬度和口味良好的配方。动物试验表明，一个黑线鳕鱼骨钙片2克公斤- 1d - 1的或5克公斤- 1d - 1的明显增加血液中钙、磷水平和骨中钙含量。因此，这种药可用于补充钙质，防止骨质疏松症。虽然在与黑线鳕鱼鱼骨钙片饲喂老鼠高吸收的原因还不清楚，不过建议，如与碱性醇或补充牛奶的方法治疗，可能对增强吸收率起积极作用。关键词：黑线鳕鱼；鱼刺；钙；生物有效性；老鼠1 前言随着中国渔业的发展，水产养殖产品有了显著的增长。然而，水产品加工很大部分都是和水产废物有关。45%的水产废物是鱼头和鱼骨。这些废物主要用于卤和水解蛋白质，这包括复杂的产品加工工艺和高额的产品成本。废鱼骨的利用是一个有价值的研究并且是个商业机会。因为鱼骨包含了大量的钙。关于钙的慑人量，有大量的临床实验，被认为是判断骨质疏松风险的因素。有研究表明，从日常饮食中很难获得足够的钙。事实上，中国营养协会称，中国许多居民没有足够的钙质摄入量。因此，提高公众补充日常充足钙的意识是重要的，会造成对钙的供给和预防的强烈需求。据报道，钙的吸收和生物利用度是与钙源密切相关的。此外，钙的生物利用度似乎取决于其化学成分。鱼骨的组成成分类似于人类的骨骼。许多研究的重点是鱼骨中钙的生物利用度，但所有的这些研究都是淡水鱼。用酸提取黑线鳕鱼中的钙，但从中对钙的补充效果不能估算。据我们所知，还没有利用海水鱼骨的研究。因此，对于鱼骨有效利用的研究，我们以鱼为生物材料，以黑线鳕鱼制备钙片，以碱性乙醇的方法制备。在目前的研究，以骨为材料的钙片的评价和生物利用度，我们将以审核老鼠的生物利用率来探讨高效钙片的补充疗效。黑线鳕鱼是我国远洋渔业产品中最重要的渔业产品可以输出数百万吨。黑线鳕鱼制作的最大量工艺的是生产鱼粉，代表了自由的原始利用。鱼骨制成钙片的工艺可能提供了宝贵的市场机会。因此，在这项研究中，我们用黑线鳕鱼骨作为研发钙片并研究片剂的生物效应，由于高效补钙，可以提高黑线鳕鱼的综合利用。2 材料和方法2.1 黑线鳕鱼鱼骨购自文凯深海食品公司，其他试剂和溶剂均为分析纯溶液购自中国民族医药资源有限公司。2.2 黑线鳕鱼骨制备不同数量的黑线鳕鱼骨与氢氧化钠不同时间处理，然后用蒸馏水洗。然后，黑线鳕鱼的骨头与乙醇在不用时间进行处理，然后用蒸馏水洗。然后，处理后的黑线鳕鱼骨头转移到一个加压烤箱烘干机8小时0.15兆帕，126oC然后用180目筛过滤。由此产生的骨粉与其他辅料混合，用造粒机制成黑线鳕鱼骨钙片。然后进行正交试验，以确定最佳氢氧化钠和乙醇的浓度以及浸泡时间。基于钙和磷的临床意义，钙和分配到加权值为0.6，磷为0.4。2.3 黑线鳕鱼骨中钙、磷、蛋白质和脂肪的测定蛋白质和脂肪的测定分别用微凯氏定氮法和索氏提取法。钙、磷的测定如下，钙，将0.5克样品转移到一个50毫升瓶里，加10克硫酸钾，0.5克硫酸铜和10毫升硫酸，将其溶解直至变得透明。将烧瓶冷却后，将溶液转移到500毫升的容量瓶中，定容。然后，取5毫升溶液转移到15毫升离心管并加一滴0.1%甲基红，2毫升4%草酸铵和0.5毫升20%乙酸，不断摇匀。其他的草酸铵被添加到溶液中直至溶液变为浅黄色。然后，加入醋酸，直到溶液变为淡红色。该管放置一小时沉淀。4500克离心15分钟离心。2摩尔每升的硫酸加入管中，震摇放到80oC水浴锅中。溶液用1摩尔每升的高锰酸钾滴定，直至淡红色不褪色。钙的数额计算如下：钙（毫克）=（N V20100100）/（W5）其中N是高锰酸钾（mol / L的浓度），V是高锰酸钾量的增加（毫升）和W是样本重量（克）对于磷，0.5克样品被转移到50毫升瓶中，加10克硫酸钾，0.5克硫酸铜和10毫升硫酸和溶解直到溶液变得透明。冷却后，该溶液被转移到500毫升烧瓶中，加入蒸馏水定容。然后，将25-30毫升此溶液转移到400毫升烧杯中，加入10毫升50硝酸并将溶液稀释至100毫升。一百毫升试剂加入并覆盖着玻璃烧杯，煮1分钟冷却后震摇。溶液转移到离心管，离心4 000克10分钟，至恒重移到坩埚里。坩埚放置在烤箱180oC 45分钟。冷却后，记录该坩埚重量。制备一个相同的样品作对比。磷量的计算如下：磷=（G 0.03207100500）/ WV其中G是沉淀的重量（克），W是样品重量（g）和V是体积样品溶液（毫升）。2.4 动物和饮食50只老鼠（2周岁）均购自浙江省医学科学院做实验。所有的动物被安置在个人塑料笼里。温度控制（221）房间与湿度655和12小时照明循环。到达目的地后，动物们自由活动，7天标准实验室饮食，之后老鼠随机分成5组，对照组和A，B，C和D，饮食如下。对照组：低钙饮食。这种饮食是基于氮化铝- 76制定的饮食构成，见表2。这种饮食钙含量为1.159毫克/公斤。A组：低钙饮食加上钙骨片（公斤2克- 1d - 1的）。 B组：低钙饮食，加上钙骨片（5克公斤- 1d - 1的）。C组：低钙饮食加碳酸钙（2克公斤- 1d - 1的）。 D组：低钙饮食磷碳酸盐（公斤5克- 1d - 1的）。这些动物给予自由进入实验饮食和去离子水12周。一个星期要确定钙的吸收，粪便和血液标本。在对饲养期结束后，所有在乙醚麻醉下处死。动物的照顾和治疗符合指南的研究实验动物护理和使用。2.5 矿物分析从眼眶后静脉管收集血液样本（1毫升）放在没有抗凝血剂的试管里。经过6周和12周血液收集，将老鼠杀死，测量左、右股骨骨折负荷，骨的长度和干重。使用游标卡尺测量该股骨长度，多功能检测设备确定断裂负荷。用烤箱 140 oC干燥8 h后测干重并在800 C加热6小时后测定灰分。鱼骨中钙，磷量，饮食和股骨用X射线光谱法荧光测定。首先，所有样品在马弗炉110 oC干燥12小时。样品的结果灰分（100毫克）被压碎，与锂混合硼砂（900毫克）用电动压片成片。血液样本离心1 500克20分钟，与血清钙，磷浓度用比色法测定试剂盒。矿物质吸收的计算使用以下公式：钙的吸收率=（摄取钙粪便中钙）/钙摄取钙的保留率=（摄取钙粪便钙尿中钙）/钙的摄入2.6 刚度和崩解时间的测定黑线鳕鱼骨钙片的僵化和崩解时间4路片剂测定仪与78 - X2测定，是由黄海制药考试公司生产。2.7 统计分析结果用SPSS统计软件包进行方差分析。3 结果与讨论3.1 测定最佳提取黑线鳕鱼骨条件在本研究中，以黑线鳕鱼骨作为原料，用碱性/酒精方法处理。采用正交试验，在氢氧化钠和乙醇不同浓度和浸泡时间。对钙、磷提取结果的影响见表3如表3所示，方法C有最大范围而方法D的最小范围。这表明，氢氧化钠的浓度乙醇对钙和磷含量影响最大，而浸泡时间乙醇至少有效果。综合分析对治疗的条件得出的结论，最佳参数如下：氢氧化钠浓度为1 mol / L时，浸泡时间30小时;乙醇浓度60，浸泡时间15小时。表4显示黑线鳕鱼鱼骨钙粉的成分在这一条件分析。从表4中的黑线鳕鱼骨制备使用上述条件钙含量为27.8和12.2，磷含量，蛋白质和脂肪含量仅为3.67和0.44。得到的骨粉是白色的，也没有任何气味。3.2 黑线鳕鱼鱼骨钙片的测定由于黑线鳕鱼骨钙粉粘性差，为了制备需要包括粘合剂辅料，润湿剂和润滑油要符合要求。因此，在这项研究中，我们将聚乙烯吡咯烷酮的K30作为粘合剂，乙醇作为润滑剂，硬脂酸镁为润滑剂。调查的效果聚乙烯吡咯烷酮K30值的浓度对片的刚性（图1）。此外，我们添加全脂奶粉和草莓本质的制定，以改善口味。该片剂硬度是最终产品一个非常重要的指标，因为硬度低会导致片剂开裂。图1显示，低和高聚乙烯吡咯烷酮的K30浓度影响的片剂硬度。聚乙烯吡咯烷酮K30值的4浓度最高的4.79千克片剂硬度高。然而，2浓度的刚性为4.58千克，其中，在接近4，符合实际需要生产。在成本方面，这2浓度为首选。可以看出，在表5中辅料的使用越多，产品刚性更好。辅料全脂奶粉3:1的比例带来的刚性最高的5.4公斤。另一方面，加入全脂奶粉加强了该产品的味道。全脂奶粉1:2的比例口味更好，这是一个带着的牛奶和香味的草莓香精，以有及较高的刚度，即4.4公斤。因此，辅料中全脂奶粉比例为1:2。在制片过程中通常使用钠羧甲基淀粉，低取代羟丙基甲基纤维素或类似的化合物作为崩解剂。本研究利用研究羧甲基淀粉钠的崩解量的来影响崩解时间。表6所示崩解时间随羧甲基淀粉钠含量增加而增加。然而，黑线鳕鱼骨钙片相对少了崩解剂崩解12分钟，这是相对少时间在短崩解剂的情况下。因此，崩解剂未添加在压片的钙片。3.3 生物有效性的黑线鳕鱼骨钙片3.3.1 对黑线鳕鱼骨片上的钙在老鼠钙代谢不同来源和剂量的影响钙制剂中钙代谢老鼠列于表7。如表7所示，对照组为明显不同于其他群体方面钙的吸收率和钙的保留率差的。皮毛无光泽的老鼠有并不好。这表明，老鼠展出严重负钙平衡缺钙。钙的吸收率和对于其他群体钙保留率分别为相对较高，而较高的黑线鳕鱼骨钙比钙片组碳酸盐岩组。对于这两种钙来源，钙的吸收率和钙保留率中高剂量组明显高于低剂量组。这表明，黑线鳕鱼骨钙的生物效率大于碳酸钙。在钙的吸收率是非常重要的，因为它直接相关，钙的生物效应。事实上，钙与维生素D的含量吸收率呈正相关。缺乏维生素D钙吸收率较低，即使钙水平是很高。因此，许多市售补钙也含有维生素D来帮助钙的吸收。最近研究表明，商用钙制剂的吸收率