新型真菌药物研究进展.doc

新型真菌药物研究进展综述 目前发现药用真菌具有多种药用价值，如止血、消炎、清热解毒、润肺、追风散寒、舒筋活络、健美、护肤、健脑、滋补等多种功效，尤其是在癌症的防治、胆固醇增高引起的动脉硬化、高血压、心脏病的防治和病毒性疾病的防治方面具有比较好的疗效。同时，许多药用真菌含有丰富的蛋白质、氨基酸、维生素、和微量元素，是理想的病后康复食品和保健食品。真菌类药物广泛地用于防治疾病，其应用方式有两种。其一是一部分药用真菌如获荃、猪荃、冬虫夏草、雷丸、灵芝、银耳等可按中医辨证施治的治则与其它中药组成复方或制成中成药应用。其二是单用药用真菌或其有效成分制成制剂应用。目前关于药用真菌方面的研究多集中在第二个应用方式方面。现在主要综述一下大型药用真菌的药理学和应用方面的研究进展。(一)抗肿瘤作用药用真菌，特别是其中所含多糖的抗肿瘤作用倍受重视。现代研究认为，药用抗癌真菌主要通过宿主间的免疫调节作用来实现其对癌症的治疗作用，即其有效成分能调动或活化机体的“内源性抗癌物质”，包括活性细胞和活性因子，使机体处于平衡、稳定和和谐的状态、防止拮抗肿瘤的发生和发展协同肿瘤的化学治疗或放射治疗，发挥免疫化学治疗或免疫放射治疗的作用，达到治疗肿瘤的目的。 已经发现的真菌抗癌有效成分可分为多糖类、糖肽类、蛋白质或肽类、核酸及其类似物和抗生素5类。其抗癌机理不尽相同， 已用于治疗肿瘤的真菌多糖类药物有香菇多糖，云芝多糖、云芝多糖肽、裂褶菌多糖、灵芝多糖、银耳多糖、猪等多糖、获荃多糖等。一些真菌多糖类如灵芝多糖、银耳多糖等还可减轻化学治疗和放射治疗的严重副作用，如白细胞减少、食欲不振、抵抗力降低等。1、大分子物质的抗肿瘤活性作用 目前对药用真菌大分子抗肿瘤物质的研究主要集中在真菌多糖类物质的结构和抗肿瘤机理方面的研究，具有抗肿瘤活性的多糖主要有：香菇多糖(Letinan )、云芝多糖(Krestin PSK)/云芝多糖肽( PSP)、香菇多糖(Letinan)、灵芝多糖、银耳多糖(TSP)、裂褶菌多糖(Shyzophillan,SPG) ,获荃多糖(Pachymaran)、冬虫夏草多糖、黄蘑多糖、小金针菇多糖、块菌多糖和啤酒酵母多糖。这些多糖类物质的抗肿瘤作用和它们的化学结构尤其是 -D一1-3 链密切相关，多糖的分子量、此外多糖链分支的多少及链上羟基取代的数目有关，也与多糖的连接方式及空间立体构型密切相关，如灵芝多糖分子量为Ix104IxIO10时才显示出显著的抑制肿瘤活性作用。真菌多糖的抗肿瘤机制主要有以下几点: I)免疫调节:免疫调节是目前公认的多糖抗肿瘤作用的主要机制之一。多糖是一种免疫增强剂，不但能激活T细胞、B细胞、M、 NK细胞、CTL细胞、LAK细胞等免疫细胞的活性，激活网状内皮系统(RES)吞噬、清除老化细胞和异物以及病原体的作用，还能促进IL-1. IL-2. TNF-、INF- 、NO等生成，调节机体抗体和补体的形成，提高机体抗肿瘤免疫力。云芝多糖能诱导IL- 2, INF- 等的产生和T细胞增殖，减少免疫抑制因子TGF-的产生。香菇多糖能使癌症患者体内细胞毒性T细胞和辅助T细胞增加、抑制性T细胞减少，CD+4/CD+8升高，外周血中NK细胞、LAK细胞活性增加。总之，多糖是生物反应调节剂的重要组成部分，能激活免疫细胞，诱导多种细胞因子和细胞因子受体基因的表达，增强机体抗肿瘤免疫力。2)影响细胞生化代谢:香菇、猪荃、获荃多糖对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞胞浆和膜两部分酪氨酸蛋白激酶(TPK)活力均有一定程度的抑制，而对两部分磷酸酪氨酸蛋白磷酸酶(PTPP)的活力均有明显的激活作用，最终导致HL-60细胞酪氨酸蛋白磷酸化水平下降，提示这3种多糖抗肿瘤作用的分子机制可能与酪氨酸蛋白磷酸化作用有关。(3)抑制肿瘤细胞周期:Kamei等将云芝多糖与结肠癌细胞AGS一起培养4d后，肿瘤细胞的数量比对照组明显减少，通过流式细胞术研究发现，肿瘤细胞生长阻滞于细胞周期S期和G2/M期。 (4)抗氧化作用:动物实验和临床实验表明云芝多糖能缓解肿瘤宿主体内的氧化应激状态。Kariya等在联氨氧化反应体系中观察到云芝多糖有自由基清除剂作用，并进一步通过定量分析H2O2及对黄嗓吟黄缥吟氧化酶体系的电子自旋共振检测，证实云芝多糖有似SOD的作用。 (5)其它:多糖对血管的调节也参与了其抗肿瘤作用，它使肿瘤部位的血管扩张和出血，导致肿瘤出血坏死和完全退化。2、小分子物质的抗肿瘤作用 目前，对药用真菌小分子抗肿瘤物质的研究主要集中在丝状真菌方面，对大型真菌方面的研究较少。据报道美国学者用水或水溶性有机溶剂如己醇对获等菌核人工培养的菌丝体进行提取，得到一种抗癌药物 A- 1 ，A- 1”不仅有很好的抗癌活性，而且无毒性，A- 1”对S-180抑制率达92 %。赵吉福等报道从获荃中分离出一组脂溶性四环三菇类有机酸，统称为获荃素，获等素对艾氏腹水癌、肉瘤S180有显著抑制作用，对小鼠Lewis肺癌的转移也有一定的作用，与环磷酞胺等抗癌药合用有一定的协同作用，并实验证明获荃素有免疫增强作用。XinLiu等人报道灵芝抱子粉中除了多糖类外，其中的菇类物质也具有抗肿瘤作用。(二)降血糖作用 灵芝多糖由三个多聚糖的活性成分一GanoderanA, B. C组成。其中GanoderanB为灵芝多糖的主要活性成分，具有降低血糖作用，其机制是能升高血浆胰岛素的浓度，加速葡萄糖代谢，提高周围组织对糖的利用，并通过强化参与肝脏糖代谢的各种关键酶的活性来提高肝脏对葡萄糖的利用。邱赛红等报道，灵芝饱子粉提取物对实验性糖尿病有防治作用。据铃木裕等人报道，从灵芝中分离的一些多糖成份有具有促进糖代谢、降血糖的作用。 薛惟建等报道猴头菌多糖(Hericiumerinaceus Polysaccharides.HEP)由葡萄糖、半乳糖，、甘露糖组成，以葡萄糖为主。它是由 (1一3)键连接的主链和 (1一6)键连接的支链构成的葡聚搪,相对分子质量4万。HEP对四氧嘧啶致糖尿病的小鼠有预防作用和明显的疗效。 另据王玉萍等报道富铬鸡腿蘑发酵液对四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠有降血糖作用，且无毒。 (三)降血压降血脂作用 灵芝制剂能降低血清胆固醇、甘油三脂和一脂蛋白，具有降血脂作用。其中的灵芝多糖具有一定的降血脂作用。而且灵芝孢子粉中三菇类化合物的含量比较丰富，参与内分泌调节代谢，也有一定的降脂作用。灵芝孢子粉在500mg/kg.BW的剂量时，具有调节血脂作用。另外灵芝合剂能够抑制血小板活化、使血管内皮细胞释放抗凝促纤溶生物活性物质的作用增强，从而起到抗血栓的作用。 Nina Gunde Cinerman从糙皮侧耳等几种侧耳菌中首次发现Mevinolin，认为糙皮侧耳中起作用的活性物质是Mevinolino， Mevinolin是一种酶竞争性抑制剂。甲羟基戊酸MVA是胆固醇合成过程中关键中间体，HMG-CoA还原酶是胆固醇合成过程中起决定作用的酶限速酶)，它决定着胆固醇合成的速度，抑制此酶的活力即可降低胆固醇的生成，即可以降血脂。Mevinolin作为竞争性抑制剂可抑制HMG - CoA还原酶的活性，对高血脂患者将为有效，特别是对于动脉硬化形成的最直接因素LDL具有优先降低的作用。 云芝多糖也具有降血脂作用。它可能是通过刺激清道夫受体途径在整体发挥降脂、抗动脉粥状硬化作用。此外，猴头菌中脂肪含量低，而且脂肪中不饱和脂肪酸含量较高，也具有一定的降血脂降血压的功能。(四)肝炎治疗药 灵芝、云芝、银耳、香菇、获荃、猪荃等药用真菌均可用于防治肝炎的作用。灵芝孢子粉对注射四氯化碳引起的血清ALT升高及肝脏甘油三脂的蓄积均有明显降低作用，并能减轻乙硫氨酸引起的脂肪肝，促进肝细胞再生，加强肝脏的解毒功能。云芝多糖对慢性乙肝具有一定的疗效。此外银耳、香菇、猪荃、获荃的一些制剂(均为多糖)亦有用于治疗肝炎的类似报告。(五)神经调节作用 灵芝、密环菌、获荃、冬虫夏草等药用真菌均具有镇静作用，可用于治疗神经衰弱、失眠，尤以灵芝为著。不少的实验研究报道均表明，灵芝对中枢神经系统有明显的镇静作用，能使动物的自发性活动减少，肌肉轻度松弛，协同戊巴比妥的镇静作用。 (六)免疫调节作用1、香菇多糖免疫调节作用 香菇多糖(LNT)能使荷瘤或感染后机体的免疫应答能力得以提高，其制剂在动物体内筛选实验中能明显促进体外淋巴细胞培养物的转化作用。因此认为，LNT是一种胸腺依赖型T细胞导向并有巨噬细胞参与的特殊免疫佐剂。其免疫作用特点在于识别脾及肝脏中抗原的巨噬细胞，促进淋巴细胞活化因子(LAE)的产生，释放各种辅助性T细胞因子。增强宿主腹腔巨噬细胞吞噬率，恢复或刺激辅助性T细胞的功能。2、灵芝多糖的免疫调节作用灵芝多糖具有免疫调节作用，主要表现为以下几个方面:(1)增强免疫作用。GLP能直接刺激人脐血单个核细胞CBMC增殖，并能协同植物凝血素(PHA)刺激CBMC增殖。能协同rIL- 2提高CB-LAK细胞表面IL-2R的表达。(2)影响细胞免疫功能，雷林生等采用3H胸腺嘧啶核苷(3H - TdR)渗入法检测赤芝多糖对混合淋巴细胞增养MLCR模型中的T淋巴细胞增殖的促进作用，证明赤芝多糖GLA,GLB,GLC均能明显促进T淋巴细胞的增殖。( 3 )影响体液免疫功能。夏冬等证明灵芝多糖BN3-C可显著增加羊红细胞(SRBC)诱导的正常小鼠脾细胞中抗体形成细胞PFC的数目。BN3-A, BN3-B, BN3-C还能显著增加免疫低下的老年小鼠脾细胞中PFC的产生。4)拮抗免疫抑制剂的作用。灵芝多糖在50, 100和200 g /ml时，可完全拮抗环抱素A、丝裂素C、氟尿嘧啶和阿糖孢苷对小鼠混合琳巴细胞(MLR)的轻度抑制(抑制50%以下)作用，部分拮抗氢化可的松对MLR的严重抑制(抑制50%以上)作用。5)促进人脐血LAk:细胞增殖。GLP不仅能增强CB-LAK细胞杀伤活性，而且能明显促进CB-LAK细胞增殖，因此，将GLP与IL-2协同能诱导扩增出高杀伤活性的LAK细胞，这就可大大降低IL-2用量，避免IL-2毒性反应的发生，有助于IL-2、LAK细胞生物疗法的推广应用。3、冬虫夏草的免疫功能 冬虫夏草多糖能提高机体的免疫功能，它对机体网状内皮系统及腹腔巨噬细胞的吞噬功能具有明显的激活作用，能促进淋巴细胞的转化。沈敏等对冬虫夏草多糖的免疫作用进行了研究，结果表明:冬虫夏草多糖能改变大鼠淋巴细胞表面分子，从而调节机体的免疫反应，证明冬虫夏草多糖是具有免疫调节作用的有效成分。(七)抗菌作用周建树等的研究表明榆耳子实体水煎液和发酵液对痢疾杆菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏杆菌等致病菌都有较好的抑制效果，活性成分可能是一种糖甙类物质。黄瑞珊等的研究表明鬼伞的发酵液对几种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌以及支原体均有抑制活性，而且对热和紫外光稳定。Nora H报道香菇菌丝体发酵液的氯仿相具有抗菌活性，为一分子量小于10, 000的物质。王景祥报道从竹黄中提取到的竹红菌甲素对革兰氏阳性菌有很好的抑制活性。李慧珍等报道正红菇具有抗菌活性，其中对革兰氏阴性菌的抑制效果要好于革兰氏阳性菌。 (八)其他密环菌片对原发型高血压、肾型高血压、神经衰弱、耳科疾病及神经科疾病引起的头晕、耳鸣、耳聋、肢麻、失眠等症状有效。猴头菌制剂对胃及十二指肠溃疡、慢性萎缩性胃炎有一定疗效。竹黄菌(制剂为其液体培养产物)及从其中所获的竹红菌素甲有