细胞分子生物学复习提纲09.doc

医学细胞分子生物学复习提纲1. 真核生物基因表达调控的环节和重点环节转录、转录后的调控、翻译2. 原癌基因激活的主要机制点突变、基因扩增、染色体易位、3. 细胞有那些基本的生命活动生长、分裂、分化、凋亡4. 细胞骨架的组成微丝、微管、中等纤维、结核蛋白组成5. 研究细胞周期的主要手段有那些光镜、电镜、共聚焦、流式细胞仪6. 基因、看家基因、奢侈基因的概念基因DNA分子中含有特定遗传信息的核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核酸序列（通常是DNA序列）。看家基因 (housekeeping gene)：基因表达产物是所有组织细胞或生物体整个生命过程中都必须的，是维持细胞生存所必须的基因。奢侈基因: 基因表达产物是特殊类型的细胞发挥特异功能所必需，这类基因的表达是细胞分化的基础。7. HIV是如何特异性地感染宿主细胞的？简述HIV感染的生活史（李老师）HIV感染宿主细胞的方式是：HIV仅感染表面有CD4受体的细胞1) HIV的 gp120同靶细胞表面CD4受体结合2) 靶细胞表面的辅助受体CCR5或CXCR4和gp120和CD4共同形成复合体，病毒颗粒与细胞膜连接。3) gp120空间结构改变而显露出的gp41 N末端疏水性融合结构域插入细胞膜，遂构成病毒的侵入。HIV感染的生活史吸附穿入脱壳复制与合成装配与释放8. 说出几个抑癌基因名称p53、Rb、MTS1、9. 蛋白激酶种类及功能（李老师）定义：催化磷酸基团从磷酸供体转移致受体蛋白的酶（使靶蛋白磷酸化的酶）。酪氨酸蛋白激酶丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶例： 酪氨酸蛋白激酶(protein-tyrosine kinase, TPK): 使靶蛋白的酪氨酸发生磷酸化的酶 10. 基因工程的主要过程（一）目的基因的获取:供体生物基因或称外源基因的提取（二）克隆载体的选择和构建：选择适当的载体（三）外源基因与载体的连接：连接到另一DNA分子上（克隆载体）（四）重组DNA导入受体菌:将这个重组DNA分子转入受体细胞（五）重组体的筛选和鉴定:对含重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定（六）克隆基因的表达：进行培养，检测外援基因是否表达11. 核酸杂交及蛋白杂交的主要类型及其检测对象（一）DNA印迹技术 (Southern blotting) 用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的分析。DNA-DNA（二）RNA印迹技术 (Northern blotting) 用于RNA的定性定量分析。DNA-RNA, RNA-RNA（三）蛋白质的印迹分析 (Western blotting) 用于蛋白质定性定量及相互作用研究。抗体抗原12. PCR概念、基本过程聚合酶链反应1. 变性（denaturation） 2. 退火（annealling）3. 延伸（extension）13. 电泳的主要类型、用途琼脂凝胶电泳(Agar Gel electrophoresis) 核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) 核酸或蛋白SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE) 蛋白14. 真核细胞与原核细胞的主要区别细胞核膜性细胞器骨架系统15. 组成核酸的主要化学成分有那些碱基(base)：嘌呤碱，嘧啶碱戊糖(ribose)：核糖，脱氧核糖磷酸(phosphate)16. 蛋白质的四级结构17. 启动子、增强子启动子 是促进DNA转录的DNA序列，是DNA分子上可与RNA pol 特异性识别结合并使之转录的部位，但启动子本身不被转录增强子 是一段DNA序列，其中含有多个能被反式作用因子识别与结合的顺式作用元件。反式作用因子与这些元件结合后，通常为增强邻近基因的转录。18. 分子生物学中心法则DNA及蛋白质分子化学修饰的方式DNA 甲基化蛋白质 磷酸化 糖基化 乙酰化19. 质粒质粒（plasmid） 是独立于许多细菌及某些真核细胞染色体外共价闭合环状的DNA分子（cccDNA），能独立复制的最小遗传单位。20. 基因组细胞或生物体中，一套完整单倍体遗传物质的总和（包括一种生物所需的全套基因及间隔序列）称为基因组。 21. 干细胞的特点及其在医学研究中的意义（刘老师）特点：高度的增殖潜能（自我更新能力或自我维持能力）高度的分化潜能，能分化成多种组织。可连续分裂几代，也可在较长时间内处于静止状态意义：体外研究人胚胎的发生发育 非正常发育（通过改变细胞系的靶基因） 新人类基因的发现 药物筛选和致畸实验 作为组织移植、细胞治疗和基因治疗的细胞源22. 细胞外基质的主要成分（1） 糖胺多糖，大多以蛋白聚糖的形式存在；（2） 纤维蛋白，包括胶原、弹性蛋白、纤连蛋白、层连蛋白23. 细胞分化的概念在个体发育中，细胞后代在形态结构和功能上发生稳定性差异的过程称为细胞分化24. 细胞工程的概念及主要内容细胞工程（cell engineering）是应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的试验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。主要内容细胞培养细胞融合单克隆抗体细胞核移植染色体工程25. 基因治疗的策略1. 致病基因的原位置换2. 基因的异位替代3. 直接抑制有害基因的表达4.增强机体免疫能力的基因治疗26. 受体、配体的概念及其相互结合的特点受体 受体是一种蛋白质，或存在于细胞膜上，或存在于细胞核内，它能接受外界的信号并将这一信号转化为细胞内的一系列生物化学反应，而对细胞的结构或功能产生影响。简言之，受体即细胞的外界信息接受装置配体 受体所接受的外界信号统称为配体，包括神经递质、激素、生长因子、光子、某些化学物质及其他细胞外信号。相互结合特点：高度特异性、高度亲和性、可饱和性、可逆性P21c-rasgp120v-rasin vivoin vitroSalI开卷试题一、 名词解释（每题1分）1. 受体家族2. 配体3. 感受态E.coli-DH5二、 本文材料和方法中提及的下列英文缩写代表的是基因工程中的什么材料或名称?(不要求翻译,指出中文名称或材料种类即可)（每题1分）1. E.coRI，SalI，XhoI，BglI 2. P1,P2,P3,P43. GenBank,4. STAT5. IL-20R三、 问答题（共42分）1. 本文选用了增强型的绿色荧光蛋白的表达载体作为人IL-26cDNA的表达载体,该种载体和一般载体相比有什么优点? （本题5分）2. 什么是巢式PCR？和一般PCR相比有什么优点？在本文中是如何应用的？（本题10分）3. 在本文前言中指出IL26在天然外周血细胞中表达，本文中作者是用什么方法大量获得外周血中的IL26基因的？又是如何证实获得的基因确为IL26基因？（本题8分）4. 本文是如何证实插入载体