巨噬细胞移动抑制因子在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其临床意义.docx

巨噬细胞移动抑制因子在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其临床意义!兰鲞笠塑gtet(le(?ol,May.2005,Vo1.14.N3 巨噬细胞移动抑制因子在卵巢上皮性肿瘤 组织中的表达及其临床意义 王红英孔北华张友忠 (山东大学齐鲁医院妇产科,济南250012) 【摘要】目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子(macrophagemigrationinhibitory.factor, MIF)在正常卵巢,卵巢上皮性良性肿瘤,卵巢上皮性癌组织中的表达及其临床意义.方 法:用SP免疫组化法,测定5例正常卵巢,8例卵巢上皮性良性肿瘤,42例上皮性卵巢癌 组织及21例转移的大网膜或淋巴结中MIF的表达=.结果:MIF蛋白在正常卵巢滤泡上 皮,卵巢良性肿瘤上皮,上皮性卵巢癌细胞的胞浆中表达,上皮性卵巢癌42例中l8例 (42.9%)同时有细胞核内的表达.MIF在细胞浆内的表达强度与临床分期有关,IIIIV 期高于III期,两者差异有显着性(P<0.05),而与组织学分化程度无关(P>0.05). 在转移的淋巴结或大网膜组织中MIF表达与原发部位差异有显着性(P<0.05).结论: MIF与上皮性卵巢癌的发生,尤其是与肿瘤的浸润与转移有关. 【关键词】卵巢肿瘤;巨噬细胞移动抑制因子;免疫组织化学 中图分类号:R737.33文献标识码:A文章编号:10047379(2005)03019003 Theexpressionandtheclinicalsignificanceofmacrophagemigrationinhibitoryfactorin ovarianepithelialtumortissues.Wangthing)ing,beihua,ZhangYouzhong.Department ofObstetricsandGynecology,QiluHospitalofShandongUniversity,Jinan,250012. 【Abstract】Objective:Toinvestigatetheexpressionandclinicalsignificanceofmacro phagemigrationinhibitory.factol(MIF)innormalovariantissues,ovarianbenigntumortissues an(Iovarianepithelialcancer(OEC).Methods:ExpressionofMIFproteinwasdetermined usingimmunohistochemistry(IHC)ill5easesofnormalovariantissues,8ovarianbenigntumor tissues,42ovarianepithelialcan(ertissues,and21metastaticlymphnodeormetastaticomen tum.Results:MIFproteinwasobseedinthecytoplasmoffollicularepithelium,benigntumor Iells.OECcellsandmetastaticcancercells.PositiveMIFstainingwasalsoobservedinthenu一 (.1eiofOEC(ellsfrom18patients(42.9%).TheexpressionofMIFinadvancedstage(III IV)washigherthanthatinearlystage(III)(P<0.05).TheexpressionofMIFwashigher inthelymphonodeandomentalmetastasistha,athatinprimary.carcinomawithintheovary.(P <0.05).Conlusion:MIFmayplayanimportantroleintumorpathogenesis,especiallythede velopmentandmatastasisofovarianepithelialcancer. 【Keywords】Ovariantumor;Macrophagemigrationinhibitory.factors;Immunohisto. chemistry 噬细胞移动抑制因子(macrophagemigration inhibitory.factor,MIF)是含有ll5个氨基酸的蛋白 质,分子量12.5kD,具有南Ot链和p链组成的维 ? 论着? 结构.MIF与炎症和免疫反应有关,在细胞生长和 分化中起重要作用,包括肿瘤发生,创伤修复,胚胎 发育等.MIF在多种肿瘤中,包括前列腺癌,结肠 山东大学硕士学位研究生,现工作单位聊城市人民医院妇产科 通讯作者 J90 生旦箜l4卷第3期ProgObstetGvneco1.Mav.2005.V01.14.No.3 癌,乳腺癌,肺腺癌,黑色素瘤有表达,并与肿瘤 预后相关.本研究应用免疫组化技术,检测了 MIF蛋白在上皮性卵巢肿瘤中的表达,并探讨其临 床意义. l资料和方法 1.1临床资料组织标本取自1993年1月至1997年12月 山东大学齐鲁医院妇科手术并经病理证实的上皮性卵巢癌 42例.患者年龄平均3074岁,平均48.6岁;临床分期 (FIGO):III期8例,IIIIV期34例;组织分化程度:高分 化4例,中分化l6例,低分化22例;组织学类型:浆液性癌 26例,粘液性癌l0例,内膜样癌6例;同时收集到同一病例 癌转移的大网膜16例,癌转移的淋巴结5例,选同期切除的 良性卵巢肿瘤8例,因子宫肌瘤行卵巢切除的正常卵巢组织 标本5例,组织标本共76份.所有恶性肿瘤病例术前均未 予以任何形式的辅助治疗.病理切片及石蜡包埋组织由山 东大学齐鲁医院病理科存档,纳入研究时重新切片,由妇科 病理家复核确诊. 1.2方法 1.2.1试剂山羊抗人MIF多克隆抗体由山东省立医院陈 子江教授惠赠(Cat.AFo289-PB),免疫组化SP试剂盒及DAB 显色试剂盒购白福州迈新生物技术公司. 1.2.2步骤切除标本用10%甲醛固定,石蜡包埋,蜡块 以41xm厚连续切片,分别进行免疫组化和HE染色.免疫组 化用SP法.每批实验均以肺腺癌切片作为阳性对照,用 磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作阴性对照,在相同条件下进 行实验. 1.2.3结果判定采用双盲法,每张切片随机观察5个高 倍视野.MIF表达按染色强度判定,不着色为阴性(-),淡棕 黄色为弱阳性(+),深棕黄色为强阳性(+),中度阳性着 色(+)介于弱至强阳性之间. 1.3统计学处理采用秩和检验分析. 2结果 2.1MIF蛋白在正常卵巢及上皮性良性卵巢肿瘤 中的表达应用人重组MIF抗体行免疫组化检查 提示,在正常卵巢滤泡上皮细胞的胞浆中有MIF表 达,卵巢良性腺瘤细胞的胞浆内有MIF蛋白的表 达,细胞核中则未见MIF蛋白表达. 2.2MIF在上皮性卵巢癌组织中的表达及与临床 病理指标的关系在上皮性卵巢癌组织中MIF蛋 白表达在肿瘤细胞胞浆内,42例中l8例(42.9%) 同时在肿瘤细胞核内表达,余均未发现细胞核内表 达.MIF蛋白的表达强度与临床病理指标的关系见 表l.由表l可见,MIF蛋白在卵巢癌中的表达强 度与临床分期有关,IIIIV期高于III期,两者差 异有显着性(P<0.05),而与组织学分化程度无关 (P>0.05). 表l卵巢上皮性癌组织中MIF表达 与临床病理指标的关系 P<0.05VSIII期 2.3MIF蛋白在卵巢上皮性癌转移的大网膜及淋 巴结中的表达l6例转移大网膜及5例转移淋巴 结中MIF蛋白表达均阳性,与相应的原发肿瘤相 比,转移组织中MIF蛋白表达明显增强,差异有显 着性(P<0.05),见表2. 表2卵巢上皮性癌原发癌与转移癌组织中MIF的表达 诊断塑堕 + 原发部位癌l0 大网膜或淋巴结转移部位癌3 8 5 3 l3 3讨论 3.1MIF及与肿瘤的关系MIF是由激活的T淋 巴细胞产生的细胞因子,因能减慢或抑制巨噬细胞 的移动而命名.MIF具有多种生物学功能,包括 巨噬细胞活性,如粘附,吞噬,杀瘤活性及诱导一氧 化氮(NO)产生等.MIF可作为一种垂体激素参与 神经免疫调节,还是内毒素休克的重要介质,并有拮 抗糖皮质激素作用. MIF除调节炎症和免疫功能外,也促进细胞生 长和分化.关于肿瘤生成,MIF蛋白在前列腺癌转 移的淋巴结J,乳腺导管内癌细胞,单核细胞白 血病和结肠癌细胞系中呈高表达.如将反义 MIF质粒转染小鼠结肠腺癌细胞株,可抑制肿瘤细 胞增殖J.此外,MIFmRNA表达可显着提高TGF B,bFGF,PDGF表达水平这些结果均提示MIF直 接或间接诱导肿瘤细胞的生长. 研究表明,抗MIF抗体可抑制肿瘤生长和新生 血管的形成J.MIF在肺腺癌细胞中的表达与患 者预后相关J.肿瘤细胞核中无MIF表达的患者 治疗预后较差. 3.2MIF在肿瘤发生和转移中的作用机制MIF 促进肿瘤发生和转移的作用机制尚不十分明了.巨 噬细胞通常聚集在肿瘤浸润区域邻近的间质组织 中,肿瘤和宿主炎症细胞之间的相互作用机制对肿 瘤的进展和消退有重要作用.肿瘤细胞与臣噬细胞 191 20o5年5月第l4 的相互作用导致了细胞外基质降解酶的产生,促进 了血管生成反应.这两种反应均促进了肿瘤的 浸润和转移.肿瘤细胞分泌MIF,可通过促进巨噬 细胞的聚集而影响肿瘤的生长. 研究表明,MIF抑制p53活性.”.MIF通过促 使p53基因失活,在炎症和肿瘤之间提供了一个连 接点.MIF调节CTL的杀伤活性,观察发现,抗MIF 处理的荷瘤小鼠肿瘤CD4和CD8T细胞以及肿 瘤凋亡细胞均明显增多.MIF可诱导肿瘤细胞 MMP?9和IL?8表达上调,这可能是肿瘤早期组织侵 袭和淋巴结转移的重要因素;MIF还可通过直接 促进肿瘤血管生成促进肿瘤发生”. 3.3卵巢肿瘤MIF的表达及其临床意义本研究 表明,正常卵巢滤泡上皮和良性卵巢肿瘤细胞的胞 浆中存在MIF.在上皮性卵巢癌细胞浆中存在MIF 表达,其中,42.9%的病例细胞核和细胞浆同时表 达.MIF蛋白的表达强度与临床分期,组织学分级 无显着性相关,但在转移癌组织中MIF蛋白表达强 度与原发癌差异有显着性,在转移组织中表达增 强(P<0.05).提示MIF与肿瘤转移有关.与 Meyersiegler报道的MIF在前列腺癌中的表达研究 结果相似.本研究结果提示,MIF在上皮性卵巢 癌的诊断和治疗监测中有一定的临床价值,开发应 用抗MIF抗体和MIF反义基因治疗有望成为治疗 卵巢癌的新途径. 2 3 4 I92 参考文献 NishihiraJ.Macrophagemigrationinhibitoryfactor:itses sentialroleintheimmunesystemandcellgrowthJ.J InterferonCytokineRes,2000,20:751-762 KamimuraA,KamichiM,NishihiraJ,eta1.1ntracellular distributionofmacrophagemigrationinhihitoryfactorpre dictstheprognosisofpatientswithadenocarcinomaofthe lungJ.Can(-er,2000,89:334-341 BloomBR,BennettB.Mechenismofareactioninvitroas s(xiatedwithdelayedtypehypersensitivityJ.Science, 1966,153:8082 MeyersieglerK,FattorR,HudsonP,eta1.Expressionof 5 6 7 8 9 10 12 13 ObstetGynecol,May.20o5.Vu1.14.N().3 macrophagemigrationinhibitoryfactorinthehumanpros. tateJ.DiagnMolPathol,1998,7:4450 BiniL,ngiB,MazoechiB,eta1.Proteinexpressionpro filesinhumanbreastductalcarcinomaandhistologicallv normaltissueJ.Electrophoresis,1997,l8:28322841 TakahashiN,NishihiraJ,Sat()Y,eta1.Involvementof macrophagemigrationinhibitoryfactorinthemechanism oftumorcellgrowthJ.MolMed,1998,4:707714 NishihiraJ,KoyamaY.MizueY.Identificationufmacro phagemigrationinhibitoryfactorinhumanleukemiaHL一 60celllsanditsinductionbylip0p【1lysa(?chari(1eJ.Bio chemMolBiolInt,1996,40:861869 ChesneyJ,MetzC,BatherM,eta1.Anessentialrolefor macrophagemigrationinhibitoryfactor(MIF)inangio genesisandthegrowthofmurinelymphomaJ.Mol Med.1999.5:181191 DabbousMK,NoahSM,HaneyL,eta1.Effectsofmast cell?macrophageinteractionsontheproductionofcol?- lagenolyticenzymesbymetastatic