机能实验学开题报告.doc

机能实验学开题报告 (一) 研究课题名称： (二) 选题目的、意义： 人体在低氧环境下，体内会发生一系列缺氧应激反应从而使氧自由基浓度异常增高，这是造成机体组织缺氧情况下损伤的主要原因之一。目前提高缺氧耐受力的保健食品主要是通过其有效成分清除活性氧等以减少氧自由基对机体的伤害。现在研究已证明不少药物如藏红花、红景天等对于提高机体缺氧耐受能力有明显效果。其中红景天可通过提高机体组织氧的利用率、增加有氧氧化酶的活性、提高机体的带氧和供氧能力等以及清除自由基或减少自由基对血管内皮的损伤来提高机体抗缺氧耐受能力。另外，我组发现番茄的有效成分之一番茄红素（属类胡萝卜素）也是一个具有良好抗氧化能力的物质，只是曾经因为其不含维生素A而一度未被重视。由于番茄红素的抗氧化作用在类胡萝卜素中最强，且能多方位促进抗氧化酶系的活性并淬灭单线态氧、清除自由基，是极具有开发价值的功能性天然食用色素，本组猜想番茄红素也能通过清除自由基等作用而较明显地提高机体缺氧耐受力，且红景天虽然被广泛应用，但当前对于该药材的来源不够明确，且缺乏统一完备的质量规范，相比之下，番茄红素容易提取制作也较方便，性价比也许更高。因此本组拟用红景天和番茄红素进行比较实验，以观察番茄红素是否对提高机体缺氧耐受能力的作用更明显或者性价比更高从而更好地开发番茄红素的潜在价值。（三）实验动物: 健康近交系成年小鼠 性别：单一性别？ 体重: (202)g 年龄：二月龄 数量：预实验10只，正式实验6只（四） 所需特殊器材、试剂的种类与数量：实验试剂：复方高山红景天口服液，番茄红素（两者的浓度待定）、钠石灰 105g、凡士林、乙醚、棉花实验器材：注射器、灌胃针、计时器、250ml广口瓶8个，大剪刀（五） 主要观察指标常压耐缺氧时间( A-time)、亚硝酸钠中毒存活时间( B-time)、急性脑缺血性缺氧时间( C-time)、（六） 主要实验方法与步骤：1.提取液制作：直接购买2.分组与给药：预实验确定番茄汁和苹果醋的最佳灌胃量(较粗略)：组别 剂量 小鼠序号 常压耐缺氧时间 急性脑缺血性缺氧时间( A-time)（s） ( B-time) C-time （20只） 20 20番 A1 /茄 低（原浓度番茄 A2红素 汁0.2ml/10g) A3 / 灌 A5胃 A6 /组 高（半稀释番茄 A7 汁0.2ml/10g） A8 / A9 A10 B1 /红 B2景 B3 /天B4灌 B5 / 胃 组 /C1正 生理盐水 C2 /常 0.2ml/10g C3组 C4 C5 /正式实验：组别 剂量 小鼠序号 常压耐缺氧时间 急性脑缺血性缺氧时间( A-time)（s） ( B-time) C-time （20只） 20 20番 A1 /茄 低（原浓度番茄 A2红素 汁0.2ml/10g) A3 / 灌 A5胃 A6 /组 高（半稀释番茄 A7 汁0.2ml/10g） A8 / A9 A10 B1 /红 B2景 B3 /天B4灌 B5 / 胃 组 /C1正 生理盐水 C2 /常 0.2ml/10g C3组 C4 C5 /在正式实验中，如表所示，将小鼠随机分为3组：正常对照组、番茄红素灌胃组与红景天灌胃组，每组20只小鼠。除正常对照组外，其余2组的小鼠按0.2ml/10g比例ig给予受试物流体，正常对照组ig给予同等容量的生理盐水，以上步骤作为初次灌胃。重复上述步骤两次。a、常压耐缺氧实验:末次灌胃1 h 后, 将各组小鼠分别放入盛有15 g 钠石灰的250 ml 广口瓶中, 每瓶1只, 用涂抹凡士林瓶盖封口, 计时, 以呼吸停止为计时终止指标。记录从封口到死亡的时间。即常压耐缺氧时间( A-time) 。b、急性脑缺血性缺氧实验: 末次灌胃1 h 后, 各组小鼠在乙醚浅麻醉下自颈部断头, 立即计时, 记录小鼠断头后至张口喘息停止的时间, 即急性脑缺血性缺氧时间( C-time) 。（乙醚浅麻醉时，可以尝试用棉花蘸上适量乙醚，然后放入注射器内，并用注射器靠近小鼠鼻子，这样减少术者的吸入量）c、亚硝酸钠中毒缺氧实验：末次灌胃1 h 后,各大鼠腹腔注射亚硝酸钠，立即计时，立即记录大鼠死亡时间，即亚硝酸钠中毒存活时间( B-time)各组小鼠初次灌胃 1h后各组小鼠第二次灌胃 1h后各组小鼠末次灌胃 1h后进行实验测定三项指标的时间 进行统计比较分析（四）结果预计：一、预实验结果预计：对于番茄红素灌胃组，可能出现：1.高低剂量的灌胃都对小鼠缺氧耐受能力的提高无明显作用2.高低剂量的灌胃都对小鼠缺氧耐受能力的提高有较明显作用，两者作用效果区别不大3.高低剂量的灌胃都对小鼠缺氧耐受能力的提高有较明显作用，且低剂量组的效果更明显4.高低剂量的灌胃都对小鼠缺氧耐受能力的提高有较明显作用，且高剂量组的效果更明显注意：在预实验中不去着重比较番茄红素灌胃组和红景天灌胃组的效果。但可收集数据作为正式实验的参考。二、正式实验结果预计在通过预实验确立了番茄红素的最佳浓度后，进行正式实验可能有以下结果：1. 番茄红素和红景天对于提高小鼠缺氧耐受能力的效果