1690fJ气相色谱操作规程.doc

1690FJ气相色谱操作规程一、开机顺序：先打开氮气看钢瓶输出压力有没有，如有再看仪器柱前压力有没有，有的话就打开仪器电源（本机的初始氮气设为0.12MPA，以后根据分离效果再做调整）。二、设置温度：1、柱温设置：按柱箱+初温 +220+置入 2、进样器温度设置：按进样+270+置入3、氢火焰检测器温度设置：按换挡+热导+250+置入全部温度设置好后，按起始键。看实际温度：按显示再按柱温；按显示再按进样；按显示再按换挡+热导。看设置温度：A看柱温设置：按柱箱+初温+置入；B看进样器温度设置：按进样+置入；C看检测器温度设置：按换挡+热导+置入。极性的设置：按极性+数字(1或2)+置入。灵敏度（量程）设置：按量程+数字(0,1,2,3,4)+ 置入一般用2。锁键盘的设置：按换挡再按0，即锁定键盘,重复按一次即解锁。三、点火：当进样温度（显示+进样）达到100度以上时，打开氢气和空气气体钢瓶，然后打开净化器氢气和空气开关，同时打开电脑和工作站，就可以点火（点火：先把氢气开大点一般为0.15，把空气开小一点一般为0.06，当听到“扑”的一声，然后看基线是否比没有点火前高，如果基线有变高，就说明火已经点着了,或看检测器上是否有水蒸汽，如果有，则说明点着火了），然后再慢慢的把氢气调到0.1MPA，空气调到0.06MPA就可以了。四、进样:当基线温度稳定为直线就可以进样品了。样品的前处理：取6-7滴样品，加约半滴管的甲醇，加 1-2滴浓硫酸，充分摇匀，必要时，需放到热水浴中让其完全反应，直到变浑浊，该过程为甲酯化，用尽量多的蒸馏水洗涤甲酯层，然后加半滴管的石油醚，待醚层变清后，取醚层进样分析。（酸油进样1ml，油酸进样0.5ml）进针时，先把针全部插入针孔，再打针，按钮，抽针，此过程速度要快；打完针后，用乙醇清洗针6-7次，堵针也用此方法清洗。备注：中性油的甲酯化处理方法取7滴样品，加半滴管（1:1）苯:乙醚溶液，再加0.8N的氢氧化钾，充分摇匀，必要时，需放到热水浴中让其完全反应，直到变浑浊，用尽量多的蒸馏水洗涤甲酯层，然后加半滴管的石油醚，待醚层变清后，取醚层进样分析。五、关机顺序：1、先关上净化器氢气和空气开关，再关氢气和空气钢瓶总阀。2、降低温度，把三路温度都降到50度。按柱箱+初温 +50+置入按进样+50+置入换挡+热导+50+置入3、当柱温（显示+柱箱）降到50度以下时就可以关上仪器电源。4、打开色谱仪门，散热几分钟。5、关闭电源半小时后关上氮气和电脑工作站。六、结果分析：1、分离效果不好时处理方法A、降低柱温B、降低载气流速（载气1、载气2压力0.13 MPA，总压的固定值是0.3MPA）2、没有出现峰的原因A、火焰熄灭B、漏气，垫子用久后会出现漏气现象C、样品没有打进七、注意事项：1、在仪器做样品和老化柱子时，柱温不能高于柱子的最高使用温度，否则会损坏柱子。2、仪器要定期老化柱子，这样会提高柱子的使用寿命和降低仪器污染（老化的方法：正常开机，持续24小时即可。3、千万不在不通N2的情况下，打开仪器电源并升高温度。4、要定期更换色谱柱（色谱柱的装法：取下柱子，先放螺丝，再放石墨垫，最后插入色谱柱衬管，其中长衬管是进样端，装在外侧，缺口向上；短衬管是检测端，装在内侧，堵有棉花）5、两个进样器不可同时用，用完一个，再用第二个时，应先把第一个氮气关掉，再打开第二个。6、H2罐和N2罐均是高纯含量99.999%，甲醇和石油醚均为上海国药生产。7、进针时注射器不要有气泡。甲酯化原理1、定义：甲酯化：是一种将含羧基等的物质转变为甲酯的化学方法。酯化反应：是将游离脂肪酸在以浓硫酸作为催化剂，并加热的情况下，转化为多种甲酯的反应。2、理化数据：酸化油中游离脂肪酸占6070%，甘油酯（中性油）占3040%，酸值140，沸点320；亚油酸是含18个碳原子和2个双键的不饱和脂肪酸，酸值195-202，沸点286；油酸甲酯酸值小于1，沸点218.5（2.66kPa），168-170（0.267kPa）。3、甲酯化目的：降低酸价和沸点，转化为可以汽化的酯。（酸化油中有酸和甘油酯，如果不酯化，不转化为一种物质（酯），酸和油同一碳的保留时间是不一样的）。甲酯化可将无法用气相检测的化学物质（如酸性物）转变为可气相检测的甲酯，从而分析成分和含量；等等。气相色谱原理气相色谱法是利用色谱柱中装入担体及固定液，用载气把欲分析的混合物带入色谱柱，在一定的温度与压力条件下，各气体组分在载气和固定液薄膜的气液两相相中的分配系数不同，随着载气的向前流动，样品各组分在气、液两相中反复进行分配，使脂肪酸各组分的移动速度有快有慢，从而可将各组分分离开。然后进行分别测定。色谱柱2m3mm填充80-100目Chromosorb（白色硅藻土担体），涂以20% (W/W)二乙二醇琥珀酸酯(DEGS)固定液 在有微处理机的情况下，用归一化计算法则可自动打印出峰面积和各种脂肪酸占总脂肪酸的百分比。归一化计算法不能直接计算脂肪酸的总重量及各种脂肪酸的实际含量。 同一样品的两次测定值之差不得超过两次测定平均值的5%。担体：是一种化学惰性的,多孔性的固体微粒,能提供较大的惰性表面,使固定液以液膜状态均匀地分布在其表面. 担体的要求: (1)表面积大,孔径分布均匀 (2)化学惰性好,其表面没有吸附性或吸附性很弱,与被分离分不起任何化学反应. (3)热稳定性好 (4)颗粒均匀,大小适度 (5)有一定的机械机械强度，使固定相在制备和填充过程中不易粉碎 常用的担体有硅藻土性和非硅藻土性.硅藻土性有分为红色担体和白色担体固定液： 在气液色谱和液液色谱中作为固定相的液体称为固定液。在气液色谱 中，这种液体固定相又称为液相(liquid phase)。 固定液的要求：1、挥发性小，操作温度下有较低蒸气压，以免流失 2、热稳定性好，操作温度下不发生分解和聚合反应，并且液体状态，保持固定液原来的特性 3、对试样有一定的溶解能力，以免被测组分被带走起不到分配作用 4、具有良好的选择性，即操作条件下，对沸点相近或者性质相似的不同物质有尽可能高的分离能力 5、化学稳定性好，不与被测组分，担体，载气发生化学反应 固定液的选择： 一般采取相似相溶原则 1、分离非极性物质时，选用非极性固定液，非极性大的后出峰，小的先出峰 2、分离极性物质时，选用极性固定液，极性大的后流出，小的先流出 3、极性与非极性混合液时，选择极性固定液，极性大的后出峰，小的先出峰 4、对于氢键型的物质，选择极性或者氢键型固定液，不易形成氢键的后流出色谱柱，反之则反 5、分离复杂的难分离物质，可选用两种或两种以上的混合固定液。 参数的影响低沸点脂肪酸受温度影响小氮气流速影响出峰时间和基线走稳的时间氢气、氧气的比例，影响点火本色谱柱属于非极性的或者弱极性的基线走稳时间长的原因：进样量大、甲酯化程度低老化柱子：设柱子最高使用温度为温度1，设置柱箱初温比温度1小1020度，进样温度和检测温度比柱箱初温高30度，通氮气，保持16个小时。本机正常开机即为老化柱子，符合老化柱子的条件。重复性：同一操作者使用同一仪器对同一试样连续进行两次测定的误差，对于含量大于5(mm)的