斑马鱼LD50鱼类(斑马鱼)急性毒性(重铬酸钾)实验报告.pdf

1 鱼类鱼类 斑马鱼斑马鱼 急性毒性急性毒性 重铬酸钾重铬酸钾 实验报告实验报告 一 一 实验目的与实验要求实验目的与实验要求 1 通过本实验 熟悉和掌握急性毒性试验的设计 条件 操作步骤 以及 试验结果的计算 分析和报告等全过程 2 掌握常用的动物染毒途径和方法 掌握急性毒性实验设计 操作方法 结果判定 3 了解一次或 24 小时内多次给予受试化学物后 动物所产生的急性毒性反 应及其严重程度 中毒死亡的特征以及可能的死亡原因 观察受试物毒 性反应与剂量的关系 求出半数致死量 能较熟练地计算出 LC50及毒性 判定 4 对比观察毒物对斑马鱼的作用 5 体验开放式实验教学 培养生物实验意识 提高学习的主动性 获取实 验知识的能力和撰写实验报告水平 二 二 实验方案实验方案 1 实验仪器 天平 手套 50mL 烧杯 量筒 培养皿 鱼缸 曝气装置 2 实验药品 斑马鱼 100 条 重铬酸钾 鱼食 3 实验原理 1 方法的设置 鱼类毒性实验方法可以分为静态法和动态法两大类 本实验采用 静态法 以 96 小时为一试验周期 在 24 48 72 96 小时记录斑马 鱼的死亡率 确定斑马鱼死亡 50 时的受试物浓度 半数致死浓度用 24h LC50 48h LC50 72h LC50和 96h LC50表示 并记录无死亡的最 大浓度和导致鱼类全部死亡的最小实验浓度 2 受试药物 受试毒物要为常见毒物 并在水体中会存在 对鱼类养殖的影响 较为严重 另外受试毒物在水中应要稳定 不易分解 易溶解等 2 3 受试鱼类 实验鱼类一般选择对污染物敏感 在生态类群中具有 代表性 经济价值比较高 来源丰富 取材方便 遗传稳定 生物学背景资料 丰 富 大小适中 在室内条件下易于饲养和繁殖的种类 斑马鱼是国际上通用的鱼类急性毒性实验鱼种 建议的实验温度 21 25 建议实验鱼的全长 2 0 1cm 4 研究意义 鱼类是水生食物链的顶级生物 也是水体中最为重要的经济动物 在污染水体中 当污染物达到一定浓度时 就会引起鱼类各种中毒反 应 例如行为失常 组织器官病变 生理功能紊乱乃至死亡 在人为 控制条件下 进行各种鱼类毒性实验 不仅用于化学品毒性强度测定 水体污染程度 废水及其处 理效果检查 而且也为制定水质标准 评价环境质量和管理废水排放提供科学依据 因此 开展鱼类急性毒 性实验的研究 对实验结果给出正确合理的评价 对于我国水资源保 护具有重要意义 4 实验步骤 1 预实验 正式实验前必须对实验用鱼进行驯养 然后根据预实验得出的结 果 以上部分内容可另行安排实验时间 在包括使鱼全部死亡的最低 浓度和 96h 鱼类全部存活的最高浓度之间至少应设置 5 个浓度组 每 个实验浓度组应至少设 3 个平行系列 每一系列设一个空白对照 2 正式试验 浓度系列 每组分别取 0 50 100 150mg L 重铬酸钾加入鱼缸 水中 充分混匀 在实验开始后 3h 或 6h 观察各处理组鱼的状况 并记录实验鱼的 异常行为 如鱼体侧翻 失去平衡 游泳能力和呼吸功能减弱 色素 沉积等 至少在 24h 48h 72h 和 96h 后检查受试鱼的状况 并做记录 如果受试鱼没有任何肉眼可见的运动 如鳃的扇动 碰触尾柄后无反 3 应 即可判断该鱼已死亡 观察并记录死鱼数目后 将死鱼从容器中 取出 三 三 实验结果与数据处理实验结果与数据处理 1 斑马鱼数据记录情况 表 1 斑马鱼时间 存活条数 浓度 时间 h 0 24 48 72 96 126 0 4 4 4 4 4 4 10 4 4 3 3 3 3 40 4 4 4 4 4 4 70 4 4 4 4 4 4 100 4 4 3 3 3 3 150 4 4 4 4 4 2 2 数据处理结果 直线内插法 表 2 斑马鱼死亡率 浓度关系 浓度 时间 h 0 24 48 72 96 126 0 0 0 0 0 0 0 10 0 0 25 25 25 25 40 0 0 0 0 0 0 70 0 0 0 0 0 0 100 0 0 25 25 25 25 150 0 0 0 0 0 50 图 1 24LC50 图 2 48LC50 任取72小时数据分析误差25 0 25 100 任选100mg L浓度分析误差24 48 小时 25 0 25 其他小时 25 25 0 四 四 实验结论实验结论 1 数据评价 a 由表格记录数据仅 126 小时 150mg L 浓度死亡率为 50 其他数据作 图不能够得出 LC50 4 b 由误差分析可以得到数据误差率为 100 因而可以认为鱼类死亡为 偶然因数或者因饥饿死亡 数据不具参考价值 c 由预实验和相关文献分析得到斑马鱼的 24 小时半致死浓度为 350mg L 大于所设的 150mg L 的范围 d 有上述实验结果对照 化学物质对鱼类急性毒性危害分级标准 150mg L 对斑马鱼为低毒 2 原因分析 a 所设浓度不在范围之内 故现象不明显 b 实验之前鱼类没有养殖好 存在饥饿等不适应因素 c 药品被水里有机物影响 五 五 实验心得体会实验心得体