血栓与止血试验PPT课件.ppt

血栓与止血检验 临床血液学和血液检验 1 学习目的和要求 1 掌握血栓止血的筛选试验 血小板检验 凝血因子检验和纤溶活性检验 2 了解血液流变学检验 了解纤维蛋白溶解系统及血液流变学 2 第一节血栓与止血筛选检验 一期止血筛选检验 二期止血缺陷的筛选检验 共同途径筛选检验 纤溶活性增强筛选检验 3 一期止血 出血时间 BT 血小板计数 PLT 检验 一期止血筛选检验 出血时间 4 原理 是指刺伤毛细血管后自然出血到自然止血所需的时间 主要用于检测毛细血管结构和功能 血小板数量和质量以及两者之间相互作用的影响 出血时间 Bleedingtime BT 一期止血筛选检验 出血时间 5 方法 血压40mmHg 刀片长6mm 刺入皮肤深度1mm 肘前窝下5cm尺侧皮肤 一期止血筛选检验 出血时间 参考值 6 88 2 08min 6 临床意义 BT延长见于 血管性血友病 血管壁结构异常 血小板明显减少或增多症 血小板功能异常 严重缺乏血浆某些凝血因子 DIC等 纤溶亢进症 药物干扰 如乙酰水杨酸 潘生丁等 BT缩短见于 血栓前状态和血栓性疾病 药物如促红细胞增多症等 一期止血筛选检验 出血时间 7 原理 计数单位容积内血小板的含量 方法 普通光镜直接计数法相差显微镜直接计数法 参考方法血分析仪法 血小板计数 plateletcount PLT或bloodplateletcount BPC 一期止血筛选检验 血小板计数 8 参考值 100 300G L 临床意义 减低见于 血小板生成减少 血小板破坏过多 血小板消耗过多 增多见于慢性粒细胞性白血病 真性红细胞增多症 急性化脓性感染 急性出血后及脾切除手术后等 一期止血筛选检验 血小板计数 9 一期止血的筛检试验临床意义BTPLT原因延长减少血小板减少延长增多血小板增多延长正常血小板功能缺陷延长正常血管异常正常正常血管脆性增加 一期止血筛选检验 临床意义 10 二期止血 一期止血 二期止血筛选检验 11 TF Ca2 TF Ca2 PF3 Ca2 PF3 APTT 内源性凝血途径 外源性凝血途径 共同途径 二期止血筛选检验 12 二期止血缺陷的筛选检验 全血凝固时间活化部分凝血活酶时间凝血酶原时间 13 离体静脉血发生凝固所需要的时间反映内源凝血途径功能 活化凝血时间 activatedclottingtime ACT 最敏感 硅管法 较敏感 普通试管法 二期止血筛选检验 全血凝固时间 全血凝固时间 coagulationtime CT 14 原理 向血浆中加入足量激活剂 白陶土 和部分凝血活酶 脑磷脂 和Ca2 从加入到血浆凝固所需的时间 二期止血筛选检验 活化部分凝血活酶时间 活化部分凝血活酶时间 activatedpartialthromboplastintime APTT 15 方法 手工法 参考方法 仪器法 光学法 比浊法 电流法 磁珠法 二期止血筛选检验 活化部分凝血活酶时间 16 质量控制 标本采集和处理患者准备 停药1周以上 抗凝剂 0 109M枸椽酸钠 1 9 采血 止血带 容器 一针见血 立即分离血浆 室温F 易失活 2h内完成 激活剂 白陶土 此时APTT又称kaolinpartialthromboplastintime KPTT 硅藻土 鞣花酸 部分凝血活酶 脑磷脂 二期止血筛选检验 活化部分凝血活酶时间 17 参考值 25 35s 临床意义 APTT结果超过正常对照10s以上的即为延长 是目前推荐应用的内源性凝血系统的筛选试验 是监测肝素的首选指标 治疗时APTT维持在正常对照1 5 3 0延长 内源性凝血途径和共同途径因子减少或缺乏 血中含有抗凝物质 纤溶亢进等 缩短 见于高凝状态 如DIC的高凝血期等 血栓性疾病 二期止血筛选检验 活化部分凝血活酶时间 18 原理 向血浆中加入足量的组织凝血活酶 TF 和Ca2 从加入到血浆凝固所需的时间 二期止血筛选检验 凝血酶原时间 凝血酶原时间 prothrombintime PT PTR 病人PT值 秒 平均正常PT值 秒 ISI INR PTR 19 方法 手工法 参考方法 仪器法 光学法 比浊法 电流法 磁珠法 二期止血筛选检验 凝血酶原时间 20 质量控制 1 标本采集和处理患者准备 停药1周以上 抗凝剂 0 109M枸椽酸钠 1 9 采血 止血带 容器 一针见血 立即分离血浆 室温F 易失活 2h内完成 二期止血筛选检验 凝血酶原时间 21 质量控制 2 组织凝血活酶试剂质量3 国际敏感指数 ISI 表示标准品组织凝血活酶与每批组织凝血活酶PT校正曲线的斜率 4 报告方式病人PT s 及正常对照PT s PTR INR 二期止血筛选检验 凝血酶原时间 22 参考值 PT 11 15s PTR 0 85 1 15 超过正常对照3s以上的即为延长 临床意义 是外源性凝血因子缺陷的筛选试验 PT延长或PTR增大 外源性凝血途径和共同途径因子减少或缺乏 血中含有抗凝物质 纤溶亢进等 PT缩短或PTR降低 见于先天性因子 增多症 口服避孕药和血栓前状态或血栓性疾病 DIC早期 INR是监测口服抗凝剂的首选指标 国人以2 3为宜 二期止血筛选检验 凝血酶原时间 23 二期止血缺陷的筛检试验原因PTAPTT外源途径缺陷AN内源途径缺陷NA共同途径缺陷AA血中有抗凝物质AA 二期止血筛选检验 临床意义 24 Fg FM Fb X Y D E B 1 42 A B C H X Y D E B 15 42 A B C H X Y D E DD PL PL PL F a FPA B F a 纤溶活性增强筛选检验 纤维蛋白溶解机制及产物 25 原理 胶乳凝集试验 纤溶活性增强筛选检验 FDP 纤维蛋白 原 降解产物F g DP检测 FDP 抗FDP 26 参考值 血清FDP 5mg L 尿FDP28 17 g L 临床意义 血液中FDP增高 原 继发纤溶亢进 溶栓治疗等 尿中FDP增高 见于急性肾炎 慢性肾炎 尿毒症 肾移植术后排斥反应 妊娠毒血症以及DIC等 纤溶活性增强筛选检验 FDP 27 原理 胶乳凝集试验 纤溶活性增强筛选检验 DD 2 D 二聚体 D dimer DD DD 抗DD 28 参考值 阴性或 0 5mg L 临床意义 DD在继发性纤溶症时升高 而在原发性纤溶症时正常 这是鉴别两者的重要依据 高凝状态 血栓性疾病和DIC时 血浆DD体明显升高 是诊断DIC的重要依据 纤溶活性增强筛选检验 DD 29 原发性纤溶与继发性纤溶的鉴别原因FDPD dimer原发性纤溶增高阴性继发性纤溶增高阳性溶栓治疗增高阳性 纤溶活性增强筛选检验 30 第二节血管壁 内皮 检验 血管性血友病因子抗原检测 血浆内皮素 1检测 血浆血栓调节蛋白抗原检测 31 原理 ELISA或其它免疫学方法 参考值 94 1 32 5 临床意义 减低血管性血友病 是诊断vWD及其分型的重要指标 增高 见于血栓性疾病如心肌梗死 脑血栓等 血管壁检验 血管性血友病因子 血管性血友病因子抗原 vWF Ag 检测 32 原理 在瑞斯托霉素存在的条件下 vWF通过与血小板GP b 相互作用 使血小板发生凝集 凝集强度与受检血浆中的vWF量和 或 质有关 参考值 50 150 临床意义 血小板对瑞斯托霉素的诱导不产生聚集 是vWD的特异性诊断试验之一 是诊断vWD及其分型的重要指标 血管壁检验 血管性血友病因子 瑞斯托霉素因子 vWF Rcof 活性检测 33 原理 ELISA或其它免疫学方法 参考值 5ng L 临床意义 可了解血管内皮损伤程度 进行血栓性疾病流行病学研究的指标 增高 见于心肌梗死 心绞痛 缺血性脑卒中 肾功能衰竭 醛固酮增多症 支气管哮喘 妊高征等 血管壁检验 内皮素 1 血浆内皮素 1 ET 1 检测 34 原理 ELISA或其它免疫学方法 参考值 TM Ag25 52 g L 临床意义 是了解血管内皮损伤的最好指标 增高 见于糖尿病 DIC 血栓性血小板减少性紫癜 SLE 血栓性疾病如心肌梗死 脑血栓等 血管壁检验 TM 血浆血栓调节蛋白抗原 TM Ag 检测 35 第三节血小板检验 血小板相关抗体检测血小板粘附试验血小板聚集试验血小板膜糖蛋白检测 血小板球蛋白和血小板第4因子检测血小板P选择素检测 36 原理 ELISA 参考值 PAIgG0 78 8ng 107血小板 PAIgM0 7 0ng 107血小板 PAIgA0 2ng 107血小板 临床意义 急性和慢性原发性血小板减少性紫癜 显著增高 血小板检验 血小板抗体 血小板相关抗体检测 37 原理 血小板检验 粘附试验 血小板粘附试验 plateletadhensiontest PAdT 38 参考值 玻璃柱法53 9 70 1 临床意义 增高 见于血栓前状态和血栓性疾病 减低 见于vDW 巨大血小板综合征 血小板无力症 肝硬化 尿毒症 MDS 抗血小板药物等 血小板检验 粘附试验 39 原理 在富血小板血浆中加入致敏剂 血小板发生聚集 浊度减低 透光度增加 记录变化曲线 了解血小板聚集程度和速度 血小板检验 聚集试验 血小板聚集试验 plateletaggrregationtest PAgT 40 参考值 因方法和致聚剂而异 临床意义 增高 血小板聚集功能增强 见于高凝状态和 或 血栓前状态和血栓性疾病 减低 见于巨大血小板综合征 血小板无力症 肝硬化 尿毒症 MDS 抗血小板药物等 血小板检验 聚集试验 41 参考值 GPIa 1 54 0 49 104分子数 血小板 GPIIb a 5 45 1 19 104分子数 血小板 临床意义 增高 反应血小板被活化 见于血栓前状态和 或血栓性疾病 GPI缺乏见于巨大血小板综合征 GPIIb a缺乏见于血小板无力症 血小板检验 膜糖蛋白 血小板膜糖蛋白 GP 检测 42 参考值 TG 6 6 26 2 g LPF4 0 9 5 5 g L 临床意义 两者临床意义相同 增高 反应血小板被激活及其释放反应亢进 见于血栓前状态和 或 血栓性疾病 减低 见于先天性或获得性贮存池病 颗粒缺陷症 血小板检验 TG PF4 血小板球蛋白 TG 和血小板第4因子 PF4 检测 43 参考值 9000 1100 分子数 血小板 临床意义 增高 反应血小板被激活及其释放反应亢进 见于血栓前状态和 或 血栓性疾病 血小板检验 P选择素 血小板P选择素检测 44 第四节凝血因子检验 纤维蛋白原含量检测血浆因子 促凝活性测定血浆因子 促凝活性测定血浆因子 定性试验 45 原理 Clouse法 在受检血浆中加入凝血酶 血浆凝固所需的时间与Fg含量多少呈负相关 方法 Clouse法 参考方法其它 免疫法 比浊法 化学法 质量控制 同PT 凝血因子检验 纤维蛋白原 纤维蛋白原 fibrinogen Fg 含量检测 46 参考值 Clouse法 2 4g L 临床意义 增高 组织坏死和炎症 AMI发作期 急性感染 急性肾炎和尿毒症 结缔组织病 大手术后 妊娠晚期和妊高症 糖尿病 恶性肿瘤等 减少 DIC和原发性纤溶症 重症肝炎和肝硬化等 凝血因子检验 纤维蛋白原 47 凝血因子检验 促凝活性 血浆因子 促凝活性测定 原理 于缺乏因子 的血浆中 加入正常血浆或病人的受检血浆 再加入组织凝血活酶 TF 和Ca2 分别作PT测定 从各自的标准曲线中计算出结果 48 凝血因子检验 促凝活性 血浆因子 促凝活性测定 参考值 F C81 0 114 4 F C71 5 133 3 F C85 7 120 3 F C84 0 122 0 临床意义 增高主要见于血栓前状态和血栓性疾病 减低主要见于减低 主要见于先天性因子 缺乏症 获得性主要见于肝病 VitK缺乏 DIC 口服抗凝药等 49 凝血因子检验 促凝活性 血浆因子 促凝活性测定 原理 于缺乏因子 或 的血浆中 加入正常血浆或病人的受检血浆 再加入白陶土脑磷脂悬液和Ca2 分别作APTT测定 从各自的标准曲线中计算出结果 50 凝血因子检验 促凝活性 血浆因子 促凝活性测定 参考值 F C77 3 128 7 F C67 6 128 5 F C81 6 118 4 F C71 7 113 1 临床意义 增高主要见于血栓前状态和血栓性疾病 减低 F C F C F C减低分别见于血友病A 血友病B和F 缺乏症 肝病 VitK缺乏 DIC 口服抗凝药等 51 凝血因子检验 定性 血浆因子 定性试验 原理 于受检血浆中加入Ca2 将形成的纤维蛋白凝块置于5mol L的尿素溶液中 若24h内纤维蛋白凝块溶解 表示 缺乏 参考值 24h内纤维蛋白凝块不溶解 临床意义 若24h内纤维蛋白凝块溶解 表示 缺乏 52 生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测 生理性抗凝蛋白检测 第五节生理性抗凝蛋白检测 抗凝血酶活性检测蛋白C活性检测组织因子途径抑制物检测 53 生理性抗凝蛋白检测 抗凝血酶 抗凝血酶活性 AT A 检测 原理 受检血浆中加入过量凝血酶 使AT与凝血酶形成1 1复合物 剩余的凝血酶作用于发色底物S 2238 释出发色基团对硝基苯胺 PNA 显色深浅与剩余的凝血酶成正相关 与AT呈负相关 根据A值从标准曲线计算出AT A 54 生理性抗凝蛋白检测 抗凝血酶 参考值 AT A 103 2 113 8 临床意义 增高见于血友病 白血病和再生障碍性贫血等的急性出血期及口服抗凝药 减低见于先天性或获得性AT缺乏症 后者见于血栓前状态 血栓性疾病 DIC和肝脏疾病等 抗凝血酶活性 AT A 检测 55 生理性抗凝蛋白检测 蛋白C活性 原理 发色底物法 受检血浆中加入PC激活剂 PC被激活为APC 作用于发色底物PCA 释出发色基团PNA 显色深浅与PC成正相关 根据A值从标准曲线计算出PC A 蛋白C活性 PC A 检测 56 生理性抗凝蛋白检测 蛋白C活性 参考值 发色底物法 87 02 113 38 临床意义 减低 先天性或获得性PC缺乏症 后者见于DIC 肝病 手术后 口服抗凝剂 急性呼吸窘迫综合征等 蛋白C活性 PC A 检测 57 生理性抗凝蛋白检测 TFPT 参考值 ELISA70 9 124 1 g L 临床意义 减低 严重创伤 广泛手术 脓毒血症 休克 DIC 血栓性疾病 增高 老年人 妊娠 肾衰竭等 组织因子途径抑制物 TFPT 检测 58 第六节病理性抗凝物质检验 复钙交叉试验凝血酶时间凝血酶时间纠正试验 59 病理性抗凝物质检验 复钙交叉试验 复钙时间 RT 延长的血浆能被1 10正常血浆纠正 则说明凝血因子异常 复钙时间不在正常范围之内 2 2 3 8min 则认为受检血浆中存在异常抗凝物质 后者见于反复输血的血友病患者 严重肝脏病 SLE 类风湿关节炎等 复钙交叉试验 crossrecalcificationtest CRT 60 原理 在受检血浆中加入凝血酶 从加入到血浆凝固所需的时间 方法 同PT 质量控制 同PT 病理性抗凝物质检验 凝血酶时间 凝血酶时间 thrombintime TT 61 参考值 透射比浊法16 18s 超过正常对照3s以上为延长 临床意义 反映共同途径是否异常 延长 低 无 纤维蛋白原血症 纤溶亢进 抗凝物质存在等 见于DIC FDP增多等 肝素或类肝素物质增多 病理性抗凝物质检验 凝血酶时间 62 病理性抗凝物质检验 凝血酶时间纠正试验 TT延长的血浆中加入甲苯胺蓝后 TT缩短5秒以上 提示受检血浆中有肝素类或肝素类物质增多 若不缩短 表示受检血浆中存在其它抗凝血酶类物质或纤维蛋白原缺陷 在过敏性休克 应用氮芥 放疗后 严重肝脏病 肝叶切除术后 肝移植后患者血浆中有肝素或类肝素增多 肝素治疗的患者 其延长的TT也可被纠正 凝血酶时间纠正试验 甲苯胺蓝纠正试验 63 第七节纤溶活性检验 血浆鱼精蛋白副凝集试验组织型纤溶酶原激活物测定纤溶酶原活化抑制物活性测定血浆纤溶酶原活性测定 2 抗纤溶酶活性测定 64 sct PA tcu PA scu PA tct PA PLG PL PK K F aHMWK PAI 1 PAI 2 C1 抑制物 2抗纤酶 2巨球蛋白 t PASKUK 内激活途径 继发 外激活途径 原发 外源激活途径 Fb 纤溶活性检验 纤溶机制 65 纤维蛋白溶解产物 Fg FM Fb X Y D E B 1 42 A B C H X Y D E B 15 42 A B C H X Y D E DD PL PL PL F a FPA B F a 纤溶活性检验 66 纤溶活性检验 3P 血浆鱼精蛋白副凝集试验 3P 原理 FM FDPFMFM自行聚合呈肉眼可见的纤维网状 胶状或胶冻状 此为阳性结果 参考值 阴性 临床意义 阳性 见于继发性纤溶 如DIC的早期或中期 鱼精蛋白 67 纤溶活性检验 t PA 组织型纤溶酶原激活物 t PA 测定 原理 发色底物法 参考值 0 3 0 6U ml 临床意义 增高见于原发性或继发性纤溶症 减低见于高凝状态和血栓性疾病 68 纤溶活性检验 PAI A 纤溶酶原活化物抑制物活性 PAI A 测定 参考值 发色底物法 0 1 1 0抑制单位 毫升 临床意义 增高见于血栓前状态 血栓栓塞时 减低见于原发性或继发性纤溶症 69 纤溶活性检验 PLG A 血浆纤溶酶原活性 PLG A 测定 参考值 发色底物法 75 140 临床意义 增高见于血栓前状态 血栓栓塞性疾病 减低见于原发性或继发性纤溶症