商业无菌检验作业指导书.doc

商业无菌检验作业指导书1.0目的规定了王老吉凉茶商业无菌检验使其按标准化进行操作。2.0适用范围 王老吉凉茶的微生物检测。3.0术语 （无）4.0职责微生物检验员负责按作业指导书进行检验。5.0工作流程图（无）6.0内容及要求6.1设备和仪器：6.1.1冰箱：0-46.1.2恒温培养箱：361 5516.1.3显微镜6.1.4电子秤6.1.5接种环6.1.8 pH计6.1.9灭菌试管6.1.10吸管6.1.11平皿90mm6.1.12酒精灯6.1.13灭菌镊子6.2培养基和试剂6.2.1革兰氏染色液6.2.2琼脂营业培养基6.2.3溴甲酚紫葡萄糖肉汤6.2.4 75%酒精编写人/日期审核人/日期批准人/日期修改标志修改次数修改人/日期商业无菌检验作业指导书6.3操作步骤6.3.1抽样方法杀菌冷却完毕后每杀菌釜抽样2罐。抽样时应记录杀菌釜使用循环次数、釜号、篮数和抽样日期、时间,当遇杀菌异常(未达到杀菌条件)、生产流程积压、停电等特殊情况和新产品时,依实际情况而定。6.3.2称重：用电子秤称重，精确到0.1g，称重前对样品进行记录编号。6.3.3保温 将全部样罐按下述规定温度时间进行保温。温度 / 时间/ d36110551 7保温过程中,每天进行温度巡查，并检查罐头外观,看是否有胖听或泄漏等异常现象，如有立即剔出分析,同时上报上级。6.3.4开罐检验 保温到期后，将外观正常产品取出，检查毛重、pH、感官检查等项目，并及时记录，当遇pH值异常、感官异常的产品，须扩大抽样并反馈上级。6.3.5异常罐的细菌学检查 对于胖听、泄漏、怀疑为酸败罐及其它异常样品均须进行检查:胖听罐可用75%酒精檫拭消毒（胖听罐不能烧），漏罐处理方式同胖听罐，但泄漏端应朝上；其余产品均须先用0.1%的新洁尔灭溶液浸泡15min进行消毒，用干净布擦干后放于超净工作台上，用75酒精棉擦拭面盖端，并点燃进行灼烧消毒；用灭菌的卫生镊子开启样品（胖听罐先用经灭菌的卫生打孔器打孔将罐内气体释放，但不可伤及卷边结构）。 6.3.6留样开罐后，用灭菌吸管以无菌操作取出内容物10ml-20ml，移入灭菌试管中内，保存于冰箱中，待该批罐头检验得出结论后可随之弃去。编写人/日期审核人/日期批准人/日期修改标志修改次数修改人/日期商业无菌检验作业指导书6.3.7 pH测定 取经过留样后剩下的样品立即进行pH测定，与同一杀菌釜理化检验样品的pH值相比，看是否有显著的差异。若pH 发生明显变化,应保存该样品的空罐做密封实验。6.3.8感官检查在光线充足，空气清洁无异味的检验室中将罐头内容物倾入烧杯内，由有经验的检验人员对产品的外观、色泽、状态和气味等进行观察和嗅闻，并进行品尝检查是否有异味；鉴别饮料有无腐败变质的迹象。6.3.9涂片染色镜检6.3.9.1涂片 对感官出现明显变化、pH变化超过0.5，保温前后重量变化超过1克，以及出现其它异常变化的样品，均应进行涂片染色镜检。6.3.9.2染色镜检 用革兰氏染色法染色，镜检，至少观察5个视野，记录细菌的染色反应、形态特征以及每个视野的菌数。与同批的正常样品进行对比，判断是否有明显的微生物增殖现象。6.3.10接种培养 保温期间出现的胖听、泄漏,或开罐检查发现pH、感官质量异常、腐败变质,进一步镜检发现有异常数量细菌的样罐,均应及时进行微生物接种培养；对需要接种培养的样品用无菌吸管吸取1ml分别接种培养。 接种培养基，管数及培养条件如下：培养基管数培养条件/时间/h庖肉培养基2361（厌氧， 嗜温）96-120庖肉培养基2551（厌氧， 嗜热）24-72溴甲酚紫葡萄糖肉汤（带倒管）2361（需氧， 嗜温）96-120溴甲酚紫葡萄糖肉汤（带倒管）2551（需氧， 嗜热）24-72编写人/日期审核人/日期批准人/日期修改标志修改次数修改人/日期商业无菌检验作业指导书6.3.11微生物的判定对有微生物生长的管进行观察，并涂片染色镜检，按所发现的微生物判定需氧、厌氧，嗜热、嗜温，是否有芽胞等类型。对确定有微生物增殖的样品的包装罐应进行密封性试验，具体操作按空罐的密封性试验操作方法进行。6.4结果判定6.4.1样品经保温实验未胖听或泄漏；保温后开罐,经感观检查、pH测定或涂片镜检，或接种培养，确证无微生物增殖现象，则该釜产品应判断为商业无菌检验合格。